磷酸三苯酯和磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯对小鼠精母细胞DNA损伤和细胞周期的影响

目的 探讨不同剂量的磷酸三苯酯(TPhP)和磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯(TDCPP)对小鼠精母细胞DNA损伤和细胞周期的影响。方法 选取小鼠精母细胞(GC-2)为细胞模型,经TPhP和TDCPP(0、3、10、30和50μmol/L)染毒48 h后,利用CCK-8方法检测GC-2的细胞存活率,采用高内涵分析系统检测TPhP和TDCPP对细胞核碎片化程度、磷酸化组蛋白(pH2AX)、DNA同源重组修复蛋白(Rad51)及细胞周期等参数的影响。实时荧光定量PCR法分析精母细胞生长发育关键调控基因,包括环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB-1)、抑制素-α (inhibin-α)、粘连蛋白2(nectin-2)和增殖标记蛋白(Ki67)mRNA的表达水平。结果 与对照组相比,30和50μmol/L TPhP和TDCPP均显著降低GC-2细胞存活率(P<0.05),并引起细胞核碎片化程度加剧(P<0.01)。DNA损伤标志物pH2AX在10、30和50μmol/L TPhP组及TDCPP组均显著升高(P<0.05),Rad51蛋白在30和50μmol/L TPhP组和10、30和50μmol/L TDCPP组均显著升高(P<0.01),表明较高浓度的TPhP和TDCPP可引起DNA损伤。细胞周期分析显示,TPhP主要将细胞阻滞在G0/G1期,而TDCPP主要将细胞阻滞在G0/G1期和G2/M期。荧光定量PCR结果可见,与对照组相比,TPhP(30和50μmol/L)和TDCPP(10、30和50μmol/L)抑制精母细胞生长发育关键基因(CREB-1、inhibin-α、nectin-2和Ki67)的表达(P<0.01)。结论 TPhP和TDCPP均可引起GC-2细胞DNA损伤和细胞周期阻滞,并最终影响精母细胞的生长发育。

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法测定牛奶中51种激素

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS),建立了牛奶中51种激素的高通量筛选和定量方法,并采用信息依赖型采集(IDA)模式建立了51种激素的定性筛选数据库。牛奶样品经乙腈沉淀蛋白后,采用氧化锆包覆硅胶(Z-Sep)填料进一步净化。采用Waters Acquity BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7µm)色谱柱进行分离,UPLC-Q-TOF MS测定,基质匹配曲线外标法定量。牛奶中51种激素的线性范围为0.10~500µg/L,相关系数(r^(2))均大于0.99;检出限为0.03~1.67µg/kg,定量下限为0.10~5.00µg/kg;在5、10、50µg/kg加标水平下的回收率为44.6%~120%,相对标准偏差为0.90%~20%。利用该方法测定了20份市售牛奶样品,其中19份样品检出孕酮,检出量为0.80~4.51µg/kg;1份样品中含有痕量的氢化可的松,检出量为0.62µg/kg;其他激素均未检出。该方法具有良好的线性、灵敏度、准确度和精密度,可用于多种激素的同时定性定量分析。

基于高内涵分析技术表征磷酸三苯酯的肺细胞毒性

磷酸三苯酯(triphenyl phosphate,TPhP)是环境中最常见的有机磷酸酯阻燃剂之一,具有较强的挥发性,每天持续摄入TPhP,可能对人体肺部组织产生不利影响。本研究以人源的非小细胞肺癌细胞系(A549)为研究对象,采用高内涵分析系统检测50、100和200μmol·L^(-1) TPhP对细胞核形态、核膜通透性、线粒体纹理结构、线粒体膜电位、细胞内氧自由基水平、磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated histones H2AX,pH2AX)、细胞色素C和细胞凋亡等参数的影响。结果显示,与对照组相比,随着TPhP暴露浓度的增加,A549细胞活性显著下降,细胞核面积增加、核亮度降低和核碎片化程度加剧,核膜通透性增高,细胞核的各参数在200μmol·L^(-1) TPhP组变化最显著;细胞内氧自由基水平的显著升高,进一步导致线粒体损伤和细胞色素C释放,当TPhP为100μmol·L^(-1)时,线粒体损伤程度最严重;当TPhP为100μmol·L^(-1)和200μmol·L^(-1)时,pH2AX含量显著升高,表明DNA受到损伤;100μmol·L^(-1) TPhP主要诱导细胞发生早期凋亡,而200μmol·L^(-1) TPhP诱导细胞发生早期凋亡和晚期凋亡。TPhP对人肺细胞呈现明显的细胞毒性,可引起氧化应激介导的DNA损伤和线粒体损伤,并最终导致人肺细胞发生凋亡。本研究结果为科学评估TPhP对人体健康的危害提供了数据支持和理论依据。

细辛挥发油化学成分研究

目的:定性、定量分析细辛挥发油成分和抑菌活性。方法:用超临界CO2提取细辛挥发油,用气相色谱毛细管色谱柱进行分离和分析,归一化法测定其相对含量,用气相色谱-质谱(GC/MS)方法测定其挥发油的成分。通过体外抑菌试验方法研究其抑菌活性。结果:鉴定出29种化学成分,主要为:正癸烷、3,5-二甲氧基甲苯、优葛缕酮、1,8-桉叶素、丁香醛、黄樟醚、甲基丁香酚、2,4,6-三甲氧基甲苯、肉豆蔻醚、正十五烷等。细辛挥发油对多种供试菌种均有明显的抑菌作用。结论:用超临界CO2提取细辛挥发油得率高,方法可行,其多种活性成分有明显抑菌活性,抑菌效果较理想。

黑种草籽挥发油化学成分分析

目的提取、分析黑种草籽的挥发性成分。方法用超临界二氧化碳萃取法提取、气相色谱-质谱分析(GC-MS)方法测定挥发油的成分,质谱图用NIST图谱库检索,对其挥发性成分进行定性、定量。结果得到了29个定性结果,鉴定出29个化合物,主要化合物有异长叶烯(isolongifolene)38.01%,松烯(sabinene)11.23%,4-(1-异丙基)-苯甲醛(4-methylethyl-benzaldehyde)7.67%,5-异丙基-2-甲基-1,4苯醌(5-isopropyl-2-methyl-1,4-benzoquin)7.02%,乙酸龙脑酯(bomylacetate)5.27%,樟脑(camphor)4.98%,冰片(bornol)3.13%,左旋薄荷酮(L-menthone)2.25%。结论用超临界二氧化碳萃取法得到的挥发油的纯度高。

75种农药的离子流淌度质谱多维数据库的建立

目的建立75种农药的离子流淌度质谱多维数据库。方法本研究中的农药包括杀虫剂、除草剂和杀菌剂,对75种农药采用离子淌度多维鉴定分析,数据采集信息种类包括精确质量数、二级碎片和碰撞截面积值数据,运用拟合优度(goodness of fit,R^(2))作为统计方法,探究碰撞截面积值和质荷比之间的相关性。结果用75种农药的碰撞截面积值和质荷比进行了统计分析,获得了在不同加合物情况下碰撞截面积值与质荷比之间的非线性关系。在不同的加合物情况下获得了不同的拟合度结果。首先进行了全部加合物计算,拟合度值R^(2)为0.8440;加合物+H离子时,拟合度值R^(2)为0.7786;加合物+Na离子时,拟合度值R^(2)为0.9141;在加合物+H和+Na离子时,拟合度值R^(2)为0.8267。在27份牛奶和20份牛肉样本中,经过筛查未发现本研究中的75种农药残留。结论本方法适用于这75种农药在未知物中的筛查和确证,为未知物中农药筛查中提供数据基础。

分光光度法测定二氧化钛悬浮体系中甲基橙及光催化降解效果的表征

首次利用三波长分光光度法在二氧化钛(TiO2)悬浮体系中直接测定了甲基橙(AO)并用于光催化降解效果的表征.根据三波长原理,用计算机程序选出的最佳三波长组合为420、476和516 nm.在浑浊度不同的二氧化钛悬浮体系中,用三波长法直接测定了标准加入的甲基橙,其回收率为96.7%～101%;同样,在浑浊度一定的悬浮体系中,测定了不同浓度的甲基橙,回收率为99.0%～101%.该法用于表征紫外光照射下的二氧化钛(P25,TiO2纤维)光催化降解甲基橙实际体系,其实际效果与常规测量体系得出的结论完全一致,且不同浑浊度下测量结果的重现性良好.结果表明,三波长分光光度法可以有效地消除悬浮体系中浑浊的干扰,为实现二氧化钛光催化体系的在线监测及光催化降解机理的动力学研究提供了一条可行的途径.

高效液相色谱法测定祛斑类化妆品中常用的功效成分

建立了高效液相色谱 (HPLC)法测定祛斑类化妆品中苯酚、氢醌、熊果苷、维甲酸、曲酸等功效成分的检测方法。方法灵敏度高 ,准确度好 ,检出浓度范围是 1～ 2 0 0 μg g ,线性良好 ,相关系数γ均大于 0 998,精密度良好 ,RSD <6 % ,回收率在 85 9%～ 10 5 %之间 ,操作简单 。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定尿液与血清中23种双酚类化合物

建立了基于吡啶-3-磺酰氯衍生和超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测尿液和血清中23种双酚类化合物(BPs)的方法。尿液样品采用乙酸乙酯提取;血清样品采用乙腈提取,上清液经PRiME HLB柱净化。提取液经吡啶-3-磺酰氯衍生后,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱进行分离。质谱离子源为电喷雾电离源,正离子模式检测。23种目标物在0.005~100μg/L范围内线性关系良好,检出限为0.002~0.030μg/L,定量下限为0.005~0.100μg/L,回收率为76.6%~122%,相对标准偏差(RSD)为0.60%~14%。使用建立的方法分别对20份尿液和20份血清样品进行了检测。该方法样品用量少,灵敏度高,可以满足尿液和血清样品中23种BPs的同时测定要求。

哈密瓜开发现状及前景

对我国哈密瓜加工的现状进行了评述,展望了哈密瓜加工利用的前景。

在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中双酚A等4种内分泌干扰物

建立了乳制品中三氯生、三氯卡班、双酚A和壬基酚4种内分泌干扰物的在线固相萃取超高压液相色谱-串联质谱(On-line SPE LC-MS/MS)检测方法。液态乳制品或奶粉样品中加入乙酸缓冲液,目标物经β-葡糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶酶解后,用乙腈提取,冷冻离心10 min后,取上清液,用水稀释,在线固相萃取串联质谱法测定。样品溶液经Xbridge C8柱富集,BEH C18色谱柱分离,甲醇和水梯度洗脱,三重四极杆质谱电喷雾负离子模式下采集数据,同位素内标法定量。4种目标化合物的线性范围为0.005~5.0μg/L,相关系数R2>0.99;方法的定量限为0.03~1.0μg/kg,3个添加水平的平均加标回收率为80.2%~106.7%,RSD<15%。本方法快速、简单、灵敏度高,适用于乳制品中4种内分泌干扰物的同时检测。应用本方法对原料乳和北京市售液奶样品进行了分析,结果表明,壬基酚的检出率最高。

稳定同位素质谱分析技术及其在食品检验中的应用研究进展

简述稳定同位素质谱分析技术的基本原理,综述该技术几年来在食品安全溯源及真伪鉴别中的应用研究进展,重点介绍其在婴幼儿奶粉掺假、蜂蜜掺假及产地溯源、植物油掺假、酒水溯源及掺假及动物食品产地溯源及掺假检验等方面的研究及应用,展望该技术在食品安全中的发展前景。

应用GC/MS分析筛选家族多种生物样本中标志物

目的汗液和尿液中代谢产物可以反映代谢情况,基于人体两种分泌物提取其共同检出峰,利用识别算法筛选家族与家族之间因为生长环境和习性不同的差异。方法应用GC/MS分析16个家族的两类生物样本,从高到低评分原则筛选与家族相关的潜在标志性化合物。结果家族D被随机选为例子进行说明。共确定显著性潜在生物标记物22个。结论新评分算法快速筛取目标化合物并揭示家族具有特异代谢产物。

氨基化多壁碳纳米管净化液相色谱-飞行时间质谱测定牛奶中80种农药残留

目的建立氨基化多壁碳纳米管(NH2-MWNTs)净化液相色谱-飞行时间质谱法测定牛奶中80种农药残留的方法。方法牛奶中的目标化合物用含1%乙酸的乙腈-甲醇(9∶1,V/V)溶液提取,经NH2-MWNTs净化,采用Waters Acquity UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,用液相色谱-飞行时间质谱测定,采用基质匹配曲线外标法定量。结果80种农药在5~100μg/L线性关系良好,r2均大于0.99。方法的检出限为0.01~0.50μg/L,定量限为0.03~1.50μg/L。3个浓度加标水平的平均回收率为71.5%~116.9%,精密度为1.2%~18.1%(n=6)。利用该方法测定了40份市售牛奶样本,80种农药均未检出。结论该方法具有良好的线性、灵敏度、准确度和精密度,适用于牛奶中80种农药残留的同时快速测定。

基于主成分分析和支持向量机的细菌性食物中毒预警研究

目的利用文献报道的细菌性食物中毒历史数据,快速有效地对细菌性中毒因素进行评估并建立预测模型。方法通过归一化处理消除不同量纲影响,采用主成分分析方法(PCA)降低评分矩阵的维数即提取有效主元作为输入变量,随即抽取70%作为训练集结合支持向量机算法(SVM)建立回归模型,完成对剩余30%测试集预测。结果主元成分分析通过降维对计算进行优化,提高了循环迭代运算效率。PCA与SVM联合计算可提供满意预警结果。在有限的样本数和高维等条件下突现算法的优势。此外参数优化后可以达到80%以上的预测准确率。结论建立的预警系统对细菌性食物中毒暴发事件的监测、预警等提供科学的理论依据。

超高效液相色谱-荧光检测法准确定量调味油中罗丹明B的两种前处理方法比较

目的研究有效提取和净化调味油中罗丹明B的两种前处理方法,为超高效液相色谱-荧光检测(UPLC-FLR)法的准确定量提供有价值的参考。方法第一种方法用酸化乙腈提取,混合型阳离子交换固相萃取(SPE)柱净化;第二种方法用含20%丙酮的正己烷提取,中性氧化铝SPE柱净化。两种方法的净化液吹至近干,用50%甲醇-水复溶,滤膜过滤后用UPLC-FLR测定。结果两种方法中罗丹明B在5.0、50.0、200.0μg/kg三个水平下的加标回收率分别在82.8%~101.9%、80.9%~93.6%之间,相应相对标准偏差(RSD)分别在1.5%~2.9%(n=6)、1.0%~2.1%(n=6)之间。结论两种方法均可满足调味油中罗丹明B的测定,第一种方法在5.0、50.0μg/kg加标水平的回收率均优于第二种方法,且无需大容量SPE柱;高浓度(200.0μg/kg)加标水平的回收率差异无统计学意义(P>0.05)。

赭曲霉毒素A检测方法的研究进展

赭曲霉毒素是由曲霉菌，如赭曲霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉以及绿青霉等产生的一类毒素。包括7种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素A（OTA）毒性最强，分布最广，对人类和动物影响最大。OTA主要侵害动物的肾脏和肝脏，肾脏是第一靶器官，只有剂量很大时才出现肝脏病变。大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死，还可在动物试验中观察到它的致畸作用。OTA作为一种天然污染物，对食品污染的范围较广，主要包括谷类、咖啡和葡萄等及其相关产品。

食品中牛磺酸测定方法比较

牛磺酸的化学名为2-氨基乙基氨基酸（2-aminoethanesulfonic cid）,化学式为C2H7NSO3,结构式为H2N-CH2-CH2-SO3H,分子量为125.15。外观为白色单斜柱状晶体或结晶型粉末。无臭味,味微酸,易溶于水,微溶于95%的乙醇,不溶于无水乙醇、醚及烃等有机溶剂[1]。牛磺酸可加快神经细胞的分化、发育,增强机体的免疫能力,

固相萃取-气相色谱-质谱法测定酸奶中氨基甲酸乙酯

目的建立酸奶中氨基甲酸乙酯的固相萃取-气相色谱-质谱检测方法。方法称取1.0 g的酸奶样品,加入氨基甲酸乙酯-d5内标溶液后,采用乙腈提取样品,提取液经佛罗里硅土固相萃取柱净化,净化液浓缩定容后用气相色谱-质谱法测定。结果氨基甲酸乙酯在20 ng/ml^800 ng/ml时呈良好的线性关系,3个加标水平200.0 ng/g、100.0 ng/g和40.0 ng/g的平均回收率分别为104.0%、106.4%和91.2%,相对标准偏差(RSD)分别为2.28%、2.55%和4.77%,定量限为10.0μg/kg。结论方法净化效果好,检测灵敏度、准确度均满足检测要求,具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点,适用于酸奶中氨基甲酸乙酯的检测。