小鼠肠急性缺血再灌注模型中芳香烃受体活化对肠黏膜屏障功能的影响

目的观察吲哚并[3,2-B]咔唑-6-甲醛[6-formylindolo(3,2-b)carbazole,FICZ]活化芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)对C57BL/6小鼠肠急性缺血再灌注(I/R)后肠道屏障功能的影响。方法取C57BL/6小鼠18只,分成假手术组、I/R组和FICZ干预(I/R+FICZ)组,每组6只。小鼠肠I/R模型:肠系膜上动脉夹闭30 min,再灌注6 h。苏木精-伊红(HE)染色观察小肠组织形态学的变化。蛋白质印迹和免疫荧光检测观察肠黏膜AhR与ZO-1的表达与分布情况。结果与假手术组比较,I/R组肠黏膜明显肿胀,部分绒毛脱落、变粗,甚至倒伏、断裂,而I/R+FICZ组肠黏膜无明显肿胀,绒毛结构相对完整,形态接近正常;免疫荧光显示I/R后肠上皮表面ZO-1连续性明显破坏,而I/R+FICZ组肠上皮ZO-1连续性明显恢复。肠上皮蛋白定量分析显示:与假手术组比较,I/R组和I/R+FICZ组小鼠小肠上皮ZO-1表达分别下降50.7%和32.3%(P<0.05);I/R+FICZ组较I/R组小肠上皮ZO-1表达上调37.2%(P<0.05)。结论 FICZ预处理可有效缓解小鼠急性I/R对肠黏膜结构与功能的损伤,可能机制是上调ZO-1的表达。

6甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑通过下调角质细胞生长因子受体抑制结肠癌细胞增殖

目的研究芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)及其配体6甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑(6-formylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)对结直肠癌上皮细胞表面角质细胞生长因子受体(keratinocyte growth factor receptor,KGFR)的调控和对细胞增殖的影响。方法选用免疫组化和荧光定量PCR技术分别检测KGFR在结直肠正常组织和相应癌组织中的表达和定位,免疫荧光观察AhR在两种结肠癌细胞株(Lo Vo,Caco-2细胞株)中的分布,使用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR检测AhR、细胞色素P4501A1(CYP1A1)、KGFR在FICZ处理组和对照组中的表达差异,使用细胞计数板分别检测对照组,KGF处理组,KGF+FICZ处理组和FICZ处理组各组的细胞数。结果 12个结直肠癌临床样本中有11个患者样品中KGF高表达,8个患者样品中KGFR显著增高且KGFR主要高表达于上皮细胞。体外实验发现,FICZ处理后的Lo Vo细胞中KGFR的蛋白水平和mRNA水平分别降低了50%和58.8%。在Caco2细胞中分别降低了52.6%和62.5%。这种调节过程能被AhR抑制剂CH223191阻断。同时,在两种结肠癌细胞系中,FICZ能够降低KGF对癌细胞的增殖作用(Lo Vo:34%;Caco-2:37%)。结论 AhR通过下调KGFR的表达,抑制KGF对癌细胞的增殖效应。

立体定向数字导航系统辅助3D腹腔镜直肠癌全直肠系膜切除术的应用价值

目的探索立体定向数字导航(SDN)系统辅助3D腹腔镜直肠癌全直肠系膜切除术的应用价值。方法采用回顾性描述性研究方法。收集2021年5―9月陆军军医大学第二附属医院招募1例健康志愿者的临床资料和收治3例行SDN系统辅助3D腹腔镜直肠癌全直肠系膜切除术患者的临床病理资料。志愿者男,25岁。3例直肠癌患者中男2例,女1例;年龄分别为48、63、67岁。志愿者双侧腹股沟部的髂前上棘、耻骨结节、耻骨联合处分别放置10个专用贴片作为皮肤基准点,进行术中定位及系统注册。手术当日,患者在平卧位状态按志愿者测试结果在腹股沟部放置10个皮肤基准点,完成全腹部CT检查增强扫描。在腹腔内部选取7个相对固定的解剖标志(腹主动脉分叉、骶骨胛、双侧髂前上棘、双侧输尿管与髂动脉交叉点、腹膜反折正中点)分别验证器械尖端与系统图像对应的精准度。在SDN系统辅助下完成3D腹腔镜直肠癌全直肠系膜切除术。观察指标:(1)测试情况。(2)手术情况。(3)SDN系统精准度检测情况。正态分布的计量资料以x±s表示。结果(1)测试情况:志愿者10个皮肤基准点成功完成SDN系统注册,配准误差为2.8 mm。(2)手术情况:3例患者均顺利完成SDN系统辅助3D腹腔镜直肠癌全直肠系膜切除术。3例患者手术总时间分别为193、175、210 min,其中SDN系统设置时间分别为34、25、45 min;术中出血量分别为60、30、80 mL。3例患者术后病理学检查结果均为腺癌(其中1例为黏液腺癌),肿瘤长径分别为2.3、1.5、4.0 cm,淋巴结清扫数目分别为12、12、13枚,均无淋巴结转移;术前临床分期(cTNM分期)分别为cT3bN0M0期、cT4aN1M0期、cT3bN1M0期的患者新辅助治疗后分期(ypTNM分期)分别为ypT1N0M0期、ypT4aN0M0期、ypT2N0M0期。患者术后均无并发症发生,术后住院时间分别为7、6、7 d。(3)SDN系统精准度检测情况:3例患者皮肤基点配准误差分别为2.8、2.6、2.9 mm,体内基准点精准度误差分别为(2.5±0.4)mm、(2.3±0.7)mm、(2.6±0.6)mm。结论SDN系统辅助3D腹腔镜直肠癌全直肠系膜切除术安全可行。