青蒿琥酯调节PI_(3)K/Akt信号通路对肾草酸结石形成的影响

目的探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对肾结石形成及磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI_(3)K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路的影响。方法实验分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、青蒿琥酯低剂量组(Art-L组)、青蒿琥酯高剂量组(Art-H组)、青蒿琥酯高剂量+PI_(3)K抑制剂组(Art+LY294002组)。通过乙二醇饮水和草酸钠腹腔注射建立肾结石大鼠模型;HK-2细胞暴露于200mg/L一水草酸钙晶体和2mmol/L草酸盐中建立肾结石细胞模型。检测尿液Ca^(2+)、草酸(oxalic acid,Ox)及血液血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;Pizzolato染色测量肾组织钙盐沉积;HE染色测定肾病理形态;丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒检测肾组织和HK-2细胞MDA、SOD水平;ELISA法检测肾组织和HK-2细胞TNF-α、IL-1β和IL-6水平;荧光定量检测Bax、caspase-3及PI_(3)K、Akt水平;免疫组化和Western blot法测量PI_(3)K、Akt蛋白表达;流式细胞术测量HK-2细胞凋亡。结果与Model组比较,Art-L组、Art-H组Ca^(2+)、Ox、Scr、BUN、肾组织和HK-2细胞MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6及肾组织Bax、caspase-3下降,肾组织和HK-2细胞SOD、PI_(3)K、Akt升高(P<0.05);与Art-H组比较,Art+LY294002组Ca^(2+)、Ox、Scr、BUN、肾组织和HK-2细胞MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6及肾组织Bax、caspase-3升高,肾组织和HK-2细胞SOD、PI_(3)K、Akt下降(P<0.05)。结论青蒿琥酯可以可以抑制肾结石的形成;其抑制结石形成可能是通过上调PI_(3)K/Akt信号通路的机制产生的。