肝再生磷酸酶-2的最新研究进展

肝再生磷酸酶-2(phosphatase of regenerating liver-2,PRL-2)是蛋白酪氨酸磷酸酶家族的成员。作为一种蛋白磷酸酶,PRL家族因其成员PRL-3在肿瘤组织中的特异性高表达而备受人们关注。在近几年的研究中,人们逐渐把目光转向了在正常人体各个组织中均高表达的PRL-2分子,现综述了PRL-2的生物学功能及其在肿瘤相关研究中的最新进展。

华支睾吸虫钙结合蛋白Cs16的重组表达及血清诊断应用的初步评价

目的以原核和真核表达系统克隆、表达华支睾吸虫含有EF手型结构域的钙结合蛋白(Cs16),纯化并初步评价其在华支睾吸虫病免疫诊断中的作用。方法以华支睾吸虫成虫c DNA为模板,PCR扩增含有EF手型结构域的Cs16基因,分别构建原核重组质粒p GEX-4T-1-Cs16和真核重组质粒p PIC9K-Cs16,将酶切和测序鉴定正确的重组质粒分别转入大肠埃希菌BL21和毕赤酵母GS115后,表达并纯化目的蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)验证其纯度及免疫原性。以华支睾吸虫重组蛋白Cs16为包被抗原,采用ELISA检测24例华支睾吸虫病患者血清中相应抗体的反应性及其与日本血吸虫病患者血清的交叉反应性。结果PCR扩增获得Cs16基因片段,大小为515 bp。构建的重组质粒p GEX-4T-1-Cs16和p PIC9K-Cs16经酶切和测序鉴定正确。SDS-PAGE结果显示,2个重组质粒在大肠埃希菌BL21和毕赤酵母GS115中均为可溶性表达,重组蛋白Cs16相对分子质量约为16 000。Western blotting结果显示,2个重组蛋白能分别被抗GST抗体和抗His抗体特异性识别。ELISA检测结果显示,原核表达和真核表达重组蛋白Cs16的敏感性分别为70.8%(17/24)和54.2%(13/24),特异性分别为95.2%(20/21)和100%(21/21),差异均有统计学意义(P<0.05)。与日本血吸虫病患者血清的交叉反应为1/10。结论获得了原核和真核Cs16重组抗原,其在华支睾吸虫病的诊断上具有潜在的应用价值。

肝再生磷酸酶2缺失促进巨噬细胞的杀菌功能

肝再生磷酸酶2(protein phosphatase of regenerating liver 2,PRL-2)是肝再生磷酸酶家族成员,其在免疫系统中的作用未有研究。文章对免疫器官组织中PRL-2的表达及其在巨噬细胞中的作用进行了初探。研究发现,PRL-2在免疫组织与器官中均高表达,PRL-2-/-小鼠的脾脏与胸腺中免疫细胞的类群及比例与WT小鼠相比无显著差异。体外研究显示,PRL-2的缺失不影响小鼠原代巨噬细胞细胞因子的产生及细菌吞噬能力,但PRL-2缺失后巨噬细胞杀伤细菌的能力显著增强。综上,PRL-2可能通过调控固有免疫细胞的杀菌能力在抗感染免疫中发挥作用。