脑梗死并房颤患者机械取栓术后出血转化启动抗凝治疗1例报告

脑梗死是导致世界人口死亡和残疾的首位原因,经统计全球每年约有1 824.7万缺血性脑卒中患者,其中新发脑梗死患者约有72.6万[1],其中致死率5%~15%,致残率50%。脑梗死的病因学类型主要分为五种,为大动脉粥样硬化型、小动脉闭塞型、心源性、其他原因型和不明原因型,其中心源性脑栓塞在临床上较为常见,约占总缺血性脑卒中的15%。心瓣膜病、心脏手术、心肌梗死、心房颤动、先天性心脏病、心肌病、感染性心内膜炎等心脏疾病均存在诱发脑栓塞风险[2].

护理专业学位硕士研究生核心能力的质性研究

目的探究护理专业学位硕士研究生(master of nursing specialist,MNS)应具备的核心能力培养和策略,为MNS研究生培养的教学改革和培养方案的制订提供参考依据;方法采用现象学研究方法,通过半结构式访谈获取研究资料。访谈对象包括MNS学生、硕士生导师、临床护理部主任、护理临床带教老师、护理学院管理者共24人。结果通过访谈总结出MNS研究生核心能力,包括6项基本核心能力和2项专科核心能力。结论核心能力的培养是MNS研究生教育的重点,培养过程中应以核心能力为导向,根据研究方向不同,区分核心能力培养的侧重点,丰富培养内容,优化课程设置,注重实践培养,健全考核体系,将MNS研究生的培养质量提升到一个新的高度。

氯化胆碱和蔗糖切片液制作的小鼠脑片下丘脑视前区神经元电生理特性的比较

目的比较不同切片液对小鼠下丘脑视前区(mPOA)脑片神经元电生理特性的影响。方法选取6~8周龄C57雌性小鼠,异氟烷麻醉后心脏灌注(通混合气950 mL/L O_(2),50 mL/L CO_(2))4℃氯化胆碱切片液或蔗糖切片液后取脑,振动切片机制备含mPOA脑区的冠状脑片,全细胞膜片钳记录mPOA电生理特性。结果采用蔗糖切片液制作的脑片mPOA神经元的内在兴奋性要优于氯化胆碱切片液,具体表现为细胞静息膜电位更超极化,动作电位幅度、不同电流刺激平均放电幅度、放电个数均高,半宽、基强度较小。而氯化胆碱切片液制作的脑片突触活性要更好,表现为兴奋性微小突触后电流频率高于蔗糖切片液制作脑片的细胞。结论蔗糖切片液和氯化胆碱切片液在保证细胞活性的情况下,蔗糖切片液更适合记录mPOA神经元的内在兴奋性,而氯化胆碱切片液更适合突触特性的记录。

长链非编码RNA LINC00519在胃癌中的表达及其临床意义

目的探究长链非编码RNA LINC00519在人胃癌组织中的表达,分析LINC00519表达量与胃癌发生、发展间的关系。方法首先,用在线软件GEPIA分析癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库中LINC00519在胃癌中的表达情况,LINC00519表达量与胃癌患者总生存期的关系。其次,利用实时荧光定量PCR技术检测LINC00519在20例人胃癌及其配对癌旁组织中的表达情况。统计学方法分析LINC00519表达量与胃癌患者年龄、性别、临床分期、淋巴结转移等临床病理参数间的关系。结果 LINC00519在不同癌组织中表达具有差异性;在胃癌组织中LINC00519表达呈上升趋势,且与患者总生存期相关。LINC00519在人胃癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P <0. 05); LINC00519的表达量在不同年龄、性别的胃癌患者中无明显差异; LINC00519在淋巴结转移的胃癌组织中的表达量显著高于未发生淋巴结转移的患者(P=0. 011)。结论LINC00519在胃癌及发生淋巴结转移的胃癌组织表达量较癌旁及未发生淋巴结转移的组织高,LINC00519表达升高可能与胃癌的发生及远端转移相关。

长链非编码RNA LINC00858在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测长链非编码RNALINC00858在人胃癌及其癌旁组织中的表达情况,分析LINC00858表达量变化与人胃癌发生、发展的关系。方法利用在线统计软件分析TCGA数据库中LINC00858在人胃癌中的表达情况及其表达量变化与胃癌患者总生存期、无病生存期及患者临床分期间的关系。用实时荧光定量PCR法检测LINC00858在胃癌及其配对癌旁正常组织中的表达情况。统计学方法分析LINC00858表达量与胃癌患者年龄、性别及临床分期的关系。结果LINC00858在三种肾癌和骨髓癌组织中的表达量有所下降,在胃癌及其他类型的肿瘤组织中呈上升趋势;胃癌患者肿瘤组织中LINC00858表达量越高患者的临床分期越晚。结论LINC00858表达量的升高与胃癌的发生、发展相关,LINC00858表达量的检测及调控可能有助于临床胃癌患者病情的监测及治疗。

Uhrf1与Dppa3相互作用调节印记基因的表达

目的明确Uhrf1与Dppa3相互作用是否能够调节印记基因的表达。方法利用基因体外克隆构建Dppa3和Uhrf1的过表达载体p CMV-Myc-Uhrf1和p CDH-Flag-Dppa3;利用免疫共沉淀法检测Dppa3与Uhrf1间的相互作用;以维甲酸诱导分化前后的J1细胞为模型,过表达Dppa3、Uhrf1、Dppa3和Uhrf1,q PCR检测Dppa3与Uhrf1共同表达对印记基因表达量的影响。结果 Uhrf1可与Dppa3相互作用。过表达Dppa3或Uhrf1均可抑制维甲酸诱导的印记基因表达,Dppa3与Uhrf1同时表达可增强Dppa3、Uhrf1过表达对印记基因的调节作用。结论 Dppa3与Uhrf1相互作用能够调节印记基因的表达。

基于信息素养的基础医学研究生科研创新能力培养

基础医学研究生是医学研究主体的重要组成部分,其科研创新能力的高低不仅影响着当下医学研究的进展和水平,一定程度上也代表着未来基础医学研究的水平和层次。基于目前医学研究的全球化,信息数据的网络化时代背景,认为应加强基础医学研究生的信息素养培养。为此,我们在基础医学研究生培养过程中进行了Meta分析、癌症数据统计分析、网络药理学等课程内容的渗透,依据教学实际认为应从主观意识、基础思维模式训练、实践操作训练和信息更新四方面加强基础医学研究生的科研创新能力培养。

“-GCT(A)GCGAGATC-”序列负向调控Nanog基因启动子-135/-230区活性研究

目的探究Nanog启动子-332/+50区与双荧光素酶报告载体p GL4. 10连接后负向调节Nanog-135/-230区活性的调节序列。方法截短法将Nanog启动子-812-+171区不同片段与p GL4. 10载体连接,脂质体转染法将各载体分别与内参载体p RL-TK共转入细胞,双荧光素酶系统报告系统检测报告基因的表达变化。结果Nanog启动子-812/-332区、+50/+171区及-332/+51(或+56)区均不含Nanog-135/-230区的负向调控元件,改变Naong-332/+50区与报告载体p GL4. 10的连接位点(NheⅠ,BglⅡ)行成序列"-GCT (A)GCGAGATC-"即可消除Nanog启动子-332/+50对报告基因的正向调控作用。结论待检测启动子与载体连接构成"-GCT(A) GCGAGATC-"序列后可负向调控Nanog-135/-230区的活性。

MRNA N6-甲基腺苷(m6A)修饰与发育调控

有关RNA的修饰有超过100种不同的修饰方式,其中信使RNA修饰中的N6-甲基腺苷(m6A)是最重要的修饰之一,其由甲基转移酶复合物m6A "writer"生成,与RNA结合蛋白m6A "readers"特异性结合,通过去甲基酶m6A"erasers"除去。m6A修饰涉及参与mRNA加工过程中的多个步骤,以此实现其对基因的转录后表达的调节,尤其是能够在发育过渡期间通过靶向m6A标记来降解该转录物,从而调节发育过程。本文重点介绍m6A修饰在发育过程的主要生物学功能及其机制,并比较其在不同物种之间的差异。

二甲双胍联合顺铂对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用

为研究二甲双胍联合顺铂处理对人成骨肉瘤MG-63细胞的影响及潜在作用机制,本研究使用无药物处理组为对照组细胞,使用二甲双胍和顺铂联合处理MG-63细胞,采用CCK8法和流式细胞术检测细胞的增殖凋亡情况;用细胞克隆形成实验检测各组克隆形成率;用Trans well实验检测各组细胞迁移侵袭能力,用qPCR法和蛋白质印迹法检测凋亡相关基因的RNA水平和蛋白质水平表达量。结果显示,二甲双胍联合顺铂处理对人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖抑制作用更加显著(P<0.01);流式细胞术检测结果也表明,二甲双胍联合顺铂处理能够更显著的促进人成骨肉瘤MG-63细胞的凋亡(P<0.01);细胞克隆形成的结果表明,二甲双胍联合顺铂处理抑制人成骨肉瘤MG-63细胞克隆的形成(P<0.01);Trans well结果表明,二甲双胍联合顺铂处理抑制人成骨肉瘤MG-63细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01);qPCR和蛋白质印迹法检测结果表明,二甲双胍联合顺铂处理后可下调人成骨肉瘤MG-63细胞中凋亡相关基因MCl-1和XIAP(P<0.01),上调凋亡标志基因CASPASE-3和Cyto C(P<0.01),及细胞迁徙侵袭相关基因MMP-2和MMP-9(P<0.01)表达水平。本研究结果表明,二甲双胍联合顺铂对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制可能是通过调节MCL-1和XIAP来促进人成骨肉瘤MG-63细胞的凋亡,通过调节MMP-2和MMP-9途径来实现抑制人成骨肉瘤MG-63细胞的迁移侵袭。

小针刀治疗屈指肌腱狭窄性腱鞘炎1例

本文应用小针刀治疗屈指肌腱狭窄性腱鞘炎,对狭窄的腱鞘进行剥离和疏通,使粘连组织松解、消肿,狭窄点消失,恢复正常的解剖结构,从而恢复其生理功能,达到治愈的目的,且复发率低。

小鼠三箱社交偏好测试影响因素追溯分析

目的:探究多种因素对三箱社交偏好(TCSP)测试的影响。方法:追溯297只健康雌雄C57/BL6小鼠的原始实验数据,按性别、年龄、实验装置、行为实验室、动物饲养室、季节因素各自分组进行三箱社交偏好测试。结果:对三箱社交偏好测试单因素分析结果显示,性别、年龄、实验装置、行为实验室、动物饲养室、季节均未显著影响三箱社交实验结果;对三箱社交行为测试多元线性回归分析结果显示,性别、年龄、实验装置、行为实验室、动物饲养室、季节亦均不能显著影响三箱社交实验结果。结论:性别、年龄、实验装置、行为实验室、动物饲养室和季节因素均未显著影响三箱社交实验的结果,表明三箱社交实验可以稳定准确地评价小鼠社交行为的偏好状态。

延安地区新型农村合作医疗开展状况调查分析

目的为了更好地了解延安地区新型农村合作医疗开展的实际情况,为当地的农村医疗保障基金运行提供可行的建议。方法随机抽取延安地区5 个县、区共600 名农村居民作为本次的研究对象,对学历、年龄段及对新型农村合作医疗政策是否满意等相关问题进行调查。结果在2017 年期间,延安地区新型农村合作医疗开展普及率已经达到80.56%,满意率达83.25%,但依然存在筹集资金时间固定、报销机构较少等问题。结论延安地区的新型农村合作医疗对于偏远山区居民仍存在参合、就诊及报销困难。建议新型农村合作医疗政策向偏远穷困地区倾斜,将新型农村合作医疗因地制宜的政策化、规范化。

Prdx1通过维持线粒体稳态调节巨噬细胞的极化

为了研究过氧化物还原酶1(peroxiredoxin 1,Prdx1)在巨噬细胞极化过程中的作用,使用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)联合干扰素γ(interferon gamma,IFNγ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)处理小鼠白血病单核巨噬细胞(mouse leukemia cells of monocyte macrophage,RAW264.7),敲除Prdx1标记为Prdx1~(-/-)组,采用流式细胞术检测巨噬细胞分化标志物,采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞因子水平,检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric-oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)活性反应以及Prdx1~(-/-)细胞氧化损伤情况,通过能量分析仪检测细胞胞外酸化率和氧消耗速率,线粒体膜电位染料(mitochondrial membrane potential dye,JC-1)荧光探针法检测线粒体膜电位,荧光染色法检测线粒体超氧化物水平,并用线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)清除剂处理RAW264.7细胞来评估细胞极化情况。结果表明,敲除Prdx1导致巨噬细胞ROS、过氧化氢和8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHDG)水平升高,线粒体拷贝数降低,线粒体内膜转位酶23(translocase of inner mitochondrial membrane 23,TIM23)蛋白和热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)表达减少,线粒体膜电位下降,超氧化物增多,三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)水平降低;在1型巨噬细胞(type 1 macrophage,M1)中敲除Prdx1,细胞外酸化率(extra cellular acidification rate,ECAR)增加,在2型巨噬细胞(type 2 macrophage,M2)中敲除Prdx1,耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)降低。这表明敲除Prdx1能够通过损伤巨噬细胞线粒体来降低其氧化磷酸化功能,导致巨噬细胞倾向M1型极化而抑制其向M2型极化,本研究可为巨噬细胞介导的免疫治疗提供新的治疗策略。

长链非编码RNA调控宿主抗SARS-CoV-2固有免疫应答作用机制的研究进展

由SARS-CoV-2引起的COVID-19在全球持续流行,严重威胁公共卫生安全。长链非编码RNA(lncRNA)是宿主抗病毒固有免疫应答中的关键调控因子,其可直接影响病毒复制或参与调节宿主以干扰素为核心的固有免疫应答信号通路,同时可作为COVID-19的潜在诊断和治疗手段。本文综述了新冠病毒感染后宿主lncRNA的变化,并从固有免疫应答角度阐述lncRNA参与调控病毒感染的作用机制,为相关药物的研发提供潜在靶点。

全反式维甲酸调节GAS5基因表达诱导人胃癌细胞凋亡

在前期研究中我们发现用全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导胚胎干细胞分化时长链非编码RNA GAS5的表达呈下调状态。基于癌细胞和胚胎干细胞无限增殖的共性,本研究拟探究ATRA对人胃癌细胞生长的调节作用及其对长链非编码RNA GAS5表达量的影响。研究首先用CCK-8试剂盒和qPCR检测不同浓度ATRA对人胃癌细胞SGC-7901的增殖及GAS5基因表达的影响。结果显示:ATRA在诱导胃癌细胞死亡的同时可上调GAS5基因的表达。进一步的流式细胞检测结果显示过表达GAS5即可诱导胃癌细胞凋亡。因此,ATRA可通过上调GAS5基因的表达诱导胃癌细胞凋亡。

生物信息学分析鉴定肝细胞癌中的关键基因和信号通路

肝细胞肝癌是死亡率较高的癌种之一。本研究旨在为HCC的发生发展机制研究提供更多数据支持,从而对HCC的基因治疗提供一定的理论基础。从GEO数据库检索下载肝癌患者芯片数据GSE62232,包括10个正常肝脏样本,81个HCC患者的肿瘤样本。用Limma包分析HCC肿瘤组织中与正常肝组织中差异表达基因。随后进行基因本体论(GO)和信号通路(KEGG)富集分析。Cytoscape的MCODE插件用于分析差异基因的蛋白质相互作用关系。并筛选出Hub基因并应用Kaplan-Meier分析其在肝癌患者中的总体存活率情况。筛选得到237个DEGs(82个上调基因和155个下调基因),主要富集在视黄醇代谢通路,P53信号通路和PPAR信号通路。从PPI网络中鉴定出2个关键子网络和29个Hub基因;并得到与肝癌患者预后不良相关的8个基因的生存曲线。本研究可为HCC的发生发展的机制研究和药物靶点提供新的研究方向。

牛胎儿神经干细胞的分离培养与鉴定

分别采用机械分离法和酶消化分离法从胎龄为3个月的牛胎儿脑组织中分离培养牛神经干细胞(Neural stem cells,NSCs),比较这2种方法对NSCs培养的影响。根据培养液中是否添加bFGF、EGF和FBS,选择不同的培养液培养NSCs,观察不同培养液对NSCs培养的影响,进而筛选出最适培养液。对NSCs及经诱导分化成的神经细胞进行生物学特性分析,包括细胞形态学观察和细胞免疫荧光检测。结果显示:组成成分为Neurobasal Medium+20μg/L bFGF+20μg/L EGF+20mL/L B27+100IU/mL青霉素+100IU/mL链霉素的神经干细胞培养液能够很好地支持牛胎儿NSCs的存活和增殖;机械分离法获得的牛胎儿NSCs的神经球数量和细胞活性要比酶消化分离法效果好;NSCs特异性标志物Nestin表达呈强阳性,Sox2、Nanog、Oct4和SSEA4等干细胞表面标志表达均呈阳性;经体外诱导的NSCs可分化为星形胶质细胞(表达GFAP)和神经元(表达βⅢ-tubulin)。结果表明,可从牛胎儿脑组织中分离培养出NSCs,NSCs可长期传代培养,具有分化功能。牛NSCs为克隆牛的供体细胞和转基因牛的受体细胞提供了细胞新来源。

mRNA m6A甲基化修饰异常与疾病的研究进展

在RNA中有100多种不同的修饰方式,其中信使RNA(messenger RNA,mRNA)中的N6-甲基腺苷(m6A)修饰是最常见的一种。m6A修饰是一种动态可逆的调节方式,在甲基转移酶复合物(m6A Writers)的酶促反应下发生甲基化,识别并结合于特异的RNA结合蛋白(m6AReaders),通过去甲基酶(m6A Erasers)恢复腺苷,以此实现对转录物的调控。本文分析了mRNA m6A修饰位点的分布以及不同修饰过程中不同组分的功能,重点介绍了m6A的错误修饰与疾病发生间的关系。未来的研究工作还需要更先进的手段去完善关于mRNA m6A修饰位点的测序鉴定,以及对发生m6A修饰的mRNA的定量鉴定,并阐述mRNA m6A修饰异常导致疾病发生的具体机制。

肉苁蓉对卵巢早衰大鼠免疫因子和凋亡相关蛋白的影响

目的探讨肉苁蓉对卵巢早衰大鼠免疫因子和凋亡相关蛋白的影响及其作用机制。方法按照体重将SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组,每组10只。用雷公藤多苷50μg·g^-1给予大鼠制备卵巢早衰大鼠模型。低、中、高3个剂量实验组分别给予5,10,20 g·kg^-1肉苁蓉。用酶联免疫吸附法检测大鼠促卵泡激素(FSH)、雌激素和抗苗勒管激素(AMH)水平;以实时定量聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的基因相对表达水平;以免疫印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达水平。结果正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的FSH水平分别为(16.42±1.76),(31.83±2.67),(25.89±2.48),(23.73±2.05)和(21.55±2.94)U·L^-1;上述这5组的雌激素水平分别为(97.64±7.85),(53.47±6.98),(89.56±7.28),(93.35±6.29)和(92.45±5.60)ng·L^-1;上述这5组的AMH水平分别为(280.84±22.42),(149.35±14.57),(231.71±27.38),(253.33±27.36)和(265.64±25.34)pg·mL^-1;上述这5组的TNF-α基因的相对表达水平分别为1.00±0.00,3.54±0.35,2.41±0.27,2.32±0.25和2.13±0.21;上述这5组的IFN-γ基因的相对表达水平分别为1.00±0.00,4.45±0.98,2.93±0.31,2.85±0.29和2.67±0.26;上述这5组的Bcl-2蛋白的相对表达水平分别为0.72±0.05,0.28±0.04,0.42±0.04,0.51±0.06和0.64±0.07;上述这5组的Bax蛋白的相对表达水平分别为0.48±0.04,1.05±0.07,0.86±0.08,0.69±0.07和0.53±0.06。模型组与正常组比较,或者低、中、高3个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论肉苁蓉能够调控FSH、雌激素和AMH的水平,抑制TNF-α和IFN-γ基因的表达,其可能通过调控性激素因子及Bcl-2/Bax蛋白的平衡从而影响卵巢早衰。