心壁内 P 物质免疫反应阳性神经纤维的来源

本研究用成年大鼠9只,在左心室前壁肌层内,6例注入20%～40%HRP 生理盐水溶液12～16μl,3例注射 CB-HRP 10μl。取双侧胸_(1～3)脊神经节和结状神经节,切片应用 HRP(TMB 反应)和免疫组织化学 PAP 法(第Ⅰ抗体为抗 Sp 血清)相结合方法显色。在双侧胸_(1～3)脊神经节和双侧结状神经节内,观察到3种标记细胞:HRP 阳性细胞、Sp-IR 细胞以及 HRP 阳性和P 物质阳性的双重标记细胞。脊神经节和结状神经节内的双标细胞说明,心壁内 Sp-IR 阳性神经纤维部分来源于脊神经节和结状神经节,而发起这些纤维的神经元中含有 P 物质,其功能可能与传导心脏的痛觉有关。同时也证实,心交感传入纤维的主要功能是传导痛觉。结状神经节内极少数的双标细胞,能否被认为是部分心副交感传人纤维参与心痛觉冲动的传导,尚有待进一步研究。

异丙肾上腺素对心内神经节中肽能递质VIP影响

异丙肾上腺素是临床常用的心脏骤停的抢救药物。为了研究该药对心内神经节中肽能递质的影响，本文在大鼠皮下注射异丙肾上腺素５ｍｇ／ｋｇ，连续三天，后固定取心房后壁，用免疫组化结合图像分析，观察心内神经节中肽能递质ＶＩＰ的变化。对照组大鼠心内神经节中含有ＶＩＰ免疫反应（ＶＩＰ－ＩＲ）阳性神经纤维和胞体；实验组大鼠心内神经节中含有ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经纤维和胞体呈不同程度增多。其中ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经纤维积分光密度较对照组增加２５．３％，而神经胞体积分光密度只增加８．１％。结果提示：１．大鼠心内神经节中ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经纤维可能有两个来源：即心内ＶＩＰ－ＩＲ阳性神经节细胞和心外副交感神经元；２．异丙肾上腺素对心脏的作用并非单一的直接作用，其中部分是通过影响心内神经节中肽能递质的变化而发挥间接作用。

心壁内P物质免疫反应神经纤维的来源

心脏含Sp免疫反应神经纤维,但其起源于何处,未见直接形态学研究报道。本实验在成年大鼠左心室前壁内注入20%~40%HRP生理盐水溶液12~16μl,存活2天,常规灌流固定。取双侧胸_(1~3)脊神经节、结状神经节,切片用HRP和免疫组化PAP(第Ⅰ抗体为Sp)结合法反应。在脊神经节和结状神经节内观察到3种细胞:较多的Sp单标细胞;一些以中、小型为主的HRP标记细胞;少数中、小型的HRP和Sp-IR双重标记细胞。

大鼠颈上神经节内P物质和降钙素基因相关肽免疫反应纤维的超微结构

大鼠颈上神经节的尾端和头端切断后，用免疫电镜方法研究节内P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）免疫反应神经纤维的超微结构。尾端切断后，节内SP和CGRP免疫反应纤维数量比正常组明显减少，甚至消失。然而，头端切断后，该二种肽能神经数量则无明显变化。以此推测该节内SP、CGRP免疫反应神经纤维是节外起源。尾端切断后少数小强荧光细胞呈SP或CGRP免疫反应。SP阳性轴突与节后神经元紧密接触，但未见突触连结。SP阳性轴突与SP阴性反应树突构成对称性轴树突触。CGRP阳性轴突与阴性反应的小强荧光细胞构成轴体突触。讨论了大鼠颈上神经节内SP、CGRP免疫反应神经纤维的功能。

雌性大鼠心内神经节中雌激素受体及其mRNA的表达

目的 在雌激素受体蛋白及ERmRNA水平提供雌激素对心内神经节中神经元作用的形态学依据。方法 采用免疫组织化学及原位杂交技术。 结果 在心内神经节部分神经元中 ,雌激素受体免疫反应及其mRNA原位杂交反应阳性。雌激素受体免疫反应沉淀物呈棕黄色 ,定位于胞核 ,雌激素受体mRNA免疫反应沉淀物呈棕黄色 ,定位于胞浆。 结论 大鼠心内神经节中 ,部分神经元能合成雌激素受体蛋白 ,说明ER阳性神经元可以为雌激素提供结合位点 ,因此 ,这些神经元可能受到雌激素的影响。

大鼠盆神经节内投射至膀胱VIP、SP及NOS阳性神经元的研究

用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪法与免疫组织化学、NADPH- d酶组织化学结合法 ,对大鼠盆神经节中支配膀胱的神经元进行了研究。结果显示 :在盆神经节中支配膀胱的神经细胞中存在 HRP- VIP,HRP- SP及 HRP- NOS双标细胞。提示膀胱功能的调节是多因素的 ,神经肽 (VIP,SP)和

人肾上腺内肽能神经的超微结构

应用抗生蛋白链菌素一生物素一过氧化物酶复合物的免疫电镜技术，在相邻切片中，分别观察人肾上腺内ＮＰＹ、ＶＩＰ、ＳＰ和ＣＧＲＰ免疫反应神经纤维的超微结构和免疫反应物的定位。ＮＰＹ和ＶＩＰ免疫反应物位于小颗粒羹泡和线粒体外膜，部分嗜铬细胞呈ＮＰＹ免疫反应阳性。ＳＰ和ＣＧＲＰ免疫反应物主要定位于大颗粒囊泡内。ＳＰ和ＣＧＲＰ免疫反应轴突与嗜铬细胞形成对称性或非对称性的轴体突轴。测量了这４种肽能神经末梢的直径，从而推测其来源，并讨论了该４种神经肽对人肾上腺的作用。

心内神经节的研究进展

近年研究表明,心内神经节不仅是副交感神经的换元处.而且含有交感神经、感觉神经和多种肽类递质。本文根据前人研究成果和本实验室工作对心内神经节的分布和形态、纤维联系、存在的递质以及心内神经节细胞分类和心内神经节在心功能调节中的作用等方面进行综述.1.心内神经节的分布和形态 心内神经节遍及整个心脏的心外膜下近心肌层处,心房多于心室.在心房又以心房后壁、房间隔和冠状沟等处多见.Steele等认为:豚鼠心内神经节主要分布在以下两个区域:(1)右心房上、下腔静脉之间的心外膜下;(2)房间隔背侧部分到左肺静脉根部之间的心外膜下.1996年,Singh等观察了成人心脏心内神经节的分布情况,发现人的心内神经节全部位于心房,其中较大的心内神经节分布在窦房结和房室结周围,较小的心内神经节存在于左心房上表面、房间隔和心耳心房交界处.

实验性肝硬化酶组织化学变化的研究

实验选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠１５只，随机分为正常组５只，实验组（４０％ＣＣｌ４植物油皮下注射组）１０只，同时喂养９周。断头法快速处死动物，立即取肝，冰冻切片，用酶组织化学和图像分析法观察肝内主要代谢酶活性变化。结果显示：实验组肝内ＳＤＨ、ＣＣＯ活性降低，ＬＤＨ、ＮＯＳ活性升高。

大鼠心瓣膜神经支配

本文通过对32只大鼠心瓣膜进行胆碱酯酶组织化学法、乙醛酸诱发荧光法及P物质免疫组化方法的观察,获得心瓣膜胆碱能、肾上腺素能及肽能(SP)神经支配全貌。P物质免疫反应阳性神经纤维在房室瓣自瓣膜基部向下及自腱索向上进入瓣膜;在动脉瓣自附着缘进入瓣膜。该纤维的性质及走向提示SP免疫反应阳性神经纤维可能是感受血流动力学变化的传入神经。

心室肌层的副交感神经支配——HRP-AChE结合法的研究

于11只家兔左、右心室前壁肌层内,注射20~50%HRP生理盐水溶液10~20μl。取心房后壁、窦房结区和房室结区,冰冻或恒冷箱切片,厚25~40μm,以HRP(TMB法)-AChE结合法进行孵育。心房后壁心外膜层内,少数AChE强阳性神经节细胞胞质内含HRP与TMB反应所生成的蓝色颗粒,说明这种HRP-AChE双标细胞的突起,分布于心室前壁肌层。一般认为,AChE强阳性神经细胞是胆碱能神经元。本研究进一步证实,心室肌层有副交感神经支配,支配左、右心室前壁的副交感节后神经元,主要位于心房后壁心外膜层内。

异丙肾上腺素对大鼠心内神经节中生长抑素(SS)影响的研究

研究异丙肾上腺对心内神经节中肽能神经递质 SS的影响 ,本文在大鼠皮下注射异丙肾上腺素 5 m g/ kg,连续三天 ,固定后取心房后壁 ,用免疫组织化学结合图像分析方法观察大鼠心内神经节中肽能递质 SS的变化。对照组大鼠心内神经节中含有 SS免疫反应 (SS- IR)阳性神经纤维和细胞 ;实验组大鼠心内神经节中 SS- IR阳性神经纤维和神经元的积分光密度均明显减低。结果说明异丙肾上腺素可降低心内神经节中 SS含量 ,提示 ,异丙肾上腺素的正性变时和变力作用可能通过降低 SS的含量来实现。

雄激素对大鼠心内神经节神经生长因子表达的影响

目的 观察神经生长因子 (NGF)在成年雄性大鼠、雌性大鼠、雌性大鼠睾酮处理组、睾丸切除大鼠、睾丸切除后睾酮替代大鼠心房后壁心内神经节的表达及变化。 方法 免疫组织化学染色。 结果 各组大鼠心内神经节均存在NGF阳性神经元 ,但睾丸切除组大鼠心内神经节NGF阳性神经元的数量明显减少 ,表达明显降低。 结论 心内神经节细胞内含NGF ;雄激素可能影响心内神经节细胞的NGF表达。

大鼠心房后壁NA、Ach及SS含量对心率的影响

目的：探讨去甲肾上腺素（ＮＡ）、乙酰胆碱（Ａｃｈ）及生长抑素（ＳＳ）含量对大鼠心率的影响。方法：用６－ＯＨ－ＤＡ（５０ｍｇ／ｋｇ）经尾静脉注射，作心电图，然后用生化测定方法观察大鼠心房后壁ＮＡ、ＳＳ含量及ＡｃｈＥ活性的变化。结果：实验组大鼠心房后壁ＮＡ含量明显降低，ＳＳ含量及ＡｃｈＥ活性明显升高。进一步数理统计结果显示，心率与ＮＡ、ＳＳ含量及ＡｃｈＥ活性均密切相关，且ＳＳ含量与ＡｃｈＥ活性的相关性极强。结论：①ＳＳ是心内神经结构中重要的调节肽，其与Ａｃｈ对心率的影响是同功的。②心脏的交感神经和迷走神经存在相互抑制作用，且在正常情况下，交感神经的支配占优势。

大鼠心瓣膜的肽能神经(PAP法)

本文对大鼠心脏整体瓣膜进行了P物质(SP)免疫组化观察,以了解瓣膜SP免疫反应(SP-IR)阳性神经纤维在瓣膜的分布。15只重180~250g杂种大鼠(雌雄不拘),戊巴比妥膜腔内麻醉,经主动脉生理盐水冲洗,Millonig液固定(4℃,24h)。取房室瓣(连同腱索和乳头肌)以及动脉瓣(伴相邻动脉壁)后固定.

移植大鼠心肌的SDH和LDH活性变化及定量研究

本文用组织化学方法,研究了移植大鼠心脏心肌琥珀酸脱氢酶(SDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并用显微分光光度计扫描定量测定,其光密度(OD)值平均数:移植后3～5d的大鼠心脏心肌SDH和LDH活性分别为32.60±2.59和22.78±1.55,移植后7～8d大鼠心脏心肌SDH和LDH活性分别为23.50±1.71和18.61±0.65,受体鼠原位心心肌SDH和LDH活性分别为31.30±2.35和20.42±1.6。结果表明,移植后3～5d大鼠心肌酶活性与受体原位心心肌酶活性相似,而移植后7～8d大鼠心肌酶活性明显下降。本文对移植心脏心肌酶活性变化的意义进行了讨论。

化学损毁交感神经后大鼠心内神经节生长抑素的变化

应用免疫组织化学和原位杂交方法研究了大鼠心内神经节细胞中 SS的分布及其 m RNA表达。结果发现 ,大鼠心内神经节中有 SS- IR阳性神经纤维和细胞 ,心内神经节部分细胞胞浆中有 SSm RNA表达。表明大鼠心内神经节细胞有 SS合成和贮存。用小剂量 6 - OH- DA选择性损毁心内交感神经纤维后 ,心内神经节中 SS- IR阳性神经纤维和细胞的积分光密度均有不同程度增强 ,反映了心内交感神经和付交感神经的相互抑制作用。

选择性切除交感神经对大鼠心内神经节中去甲肾上腺素、乙酰胆碱和NPY的影响

为了探讨心内神经节中去甲肾上腺素（ＮＡ）、乙酰胆碱（ＡＣｈ）和ＮＰＹ的相互作用，本实验应用６－ＯＨ－ＤＡ选择性切除大鼠心脏交感神经纤维，然后应用荧光和酶组织化学法、免疫组织化学结合图像分析法观察了大鼠心内神经节ＮＡ、ＡＣｈＥ活性和ＮＰＹ的变化。结果显示：实验组大鼠心内神经节中儿茶酚胺荧光反应阳性和ＮＰＹ免疫反应（ＮＰＹ－ＩＲ）阳性的神经纤维明显减少，ＡＣｈＥ阳性神经纤维明显增多，ＡＣｈＥ反应性神经元积分光密度增加，而儿茶酚胺荧光反应和ＮＰＹ－ＩＲ阳性神经元变化不明显。结果提示：１．交感神经化学切除后大鼠心内神经节中ＮＡ、ＡＣｈＥ活性和ＮＰＹ出现不同的变化，体现了心脏交感神经和副交感神经的相互抑制作用；２．心内神经节可能含有两种性质的ＮＰＹ，即交感性和非交感性ＮＰＹ。

大鼠心内神经元至颈上神经节的分支投射研究

应用CB－HRP逆行追踪法研究了大鼠心内神经元至颈上神经节的分支投射。将CB－HRP注入大鼠颈上神经节内，在心脏壁内神经节见到CB－HRP标记细胞，这些细胞为中小型梭形或园形，多位于心房后壁。结果表明心内神经元有分支投射到颈上神经节，并对此进行了讨论。