基于网络药理学和分子对接探讨通关藤治疗胃癌的作用机制

目的基于网络药理学技术分析和分子对接探讨通关藤抗胃癌的作用机制。方法采用PubMed数据库检索文献,利用化学成分数据库及Swiss ADME筛选通关藤的主要活性成分,通过Swiss Target Prediction获取药物活性成分靶点。检索疾病数据库得到胃癌相关靶点,与药物活性成分靶点取交集后,制作蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,筛选通关藤作用于胃癌的关键靶点蛋白。采用AutoDock及PyMOL对关键蛋白进行分子对接验证,采用DAVID数据库进行关键蛋白富集分析,结合两者结果预测通关藤可能的分子作用机制。结果筛选后共得到通关藤有效活性成分36个,作用于胃癌的靶点116个,预测通路与ErbB、VEGF、EGFR、PI3K/Akt等相关。结论通关藤可能通过影响SRC、PTK2、HSP90AA1等关键蛋白调节PI3K/Akt、Ras/Raf/MEK/ERK、SRC/FAK等相关信号转导通路,从而抑制胃癌的侵袭与转移,起到治疗胃癌的作用。

齐墩果烷型五环三萜协同miR-451抑制胃癌AGS细胞的增殖和迁移及其可能的机制

目的:探索南蛇藤提取物齐墩果烷型五环三萜(28-hydroxy-3-oxoolean-12-en-2-oic acid)协同miR-451对人胃癌AGS细胞增殖、迁移的影响及其可能的分子机制。方法:用miR-451过表达慢病毒感染AGS细胞,并用盐酸多西环素(DOX)10或100 ng/ml诱导24 h,构建过表达miR-451的细胞AGS/miR-451^(+)。采用10、20、40、80、160μmol/L的齐墩果烷型五环三萜处理AGS/miR-451^(+)细胞,MTT法、划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力的变化,WB法检测细胞中mTOR通路及凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果:成功构建过表达miR-451的AGS/miR-451^(+)细胞。与未加药对照组相比,齐墩果烷型五环三萜处理后AGS/miR-451^(+)细胞的增殖抑制率均呈时间和浓度依赖性升高(P<0.05或P<0.01),细胞迁移率均显著降低(P<0.05或P<0.01)。齐墩果烷型五环三萜处理组细胞中,mTOR信号通路相关蛋白的表达量均有所降低(P<0.05或P<0.01);凋亡相关蛋白中,Bcl2的表达量下降,BAX、caspase-3、caspase-1及细胞色素c的表达量升高(P<0.05或P<0.01)。结论:齐墩果烷型五环三萜能够协同miR-451抑制人胃癌AGS细胞的增殖与迁移,其机制可能与影响凋亡和mTOR信号通路相关蛋白的表达有关。

南蛇藤提取物对MGC803/miR-144^(+)细胞增殖和迁移能力的影响

目的:观察南蛇藤提取物(celastrus orbiculatus ethylacetate extract,COE)对MGC803/miR-144^(+)细胞增殖和迁移能力的影响。方法:将不同浓度的COE(0 mg·L^(-1)、20 mg·L^(-1)、40 mg·L^(-1)、80 mg·L^(-1)、160 mg·L^(-1)、320 mg·L^(-1))加入对数生长期的人胃癌MGC803/miR-144^(+)细胞中,作用24 h后,MTT法检测MGC803/miR-144^(+)细胞的增殖率,根据半数抑制浓度,确定后续实验所用的药物浓度。同时设立空白质粒对照组、不加药阴性组、COE组和5-氟尿嘧啶注射液(50 mg·L^(-1))组,作用24 h后,细胞划痕实验分析迁移能力,Western Blot法检测上皮间质转化相关蛋白(N-cadherin、Vimentin及E-cadherin)的表达。结果:COE作用24 h后,MGC803/miR-144^(+)细胞的增殖能力受抑制,并呈一定的浓度依赖性(P<0.05),半数抑制浓度约为126.86 mg·L^(-1)。与对照组相比,COE可使MGC803/miR-144^(+)细胞的迁移能力受到抑制(P<0.05);可显著增加E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin和Vimentin蛋白表达(P<0.05)。结论:COE可抑制MGC803/miR-144^(+)细胞的增殖和迁移能力,其机制可能与上皮间质转化相关。