p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)能特异性地与p53蛋白结合并增强其促凋亡的功能,进而发挥抗肿瘤作用.本室前期研究发现,ASPP2可以通过p53-DRAM-自噬途径诱导细胞凋亡.在本研究中,利用ASPP2腺病毒感染He...p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)能特异性地与p53蛋白结合并增强其促凋亡的功能,进而发挥抗肿瘤作用.本室前期研究发现,ASPP2可以通过p53-DRAM-自噬途径诱导细胞凋亡.在本研究中,利用ASPP2腺病毒感染Hep3B细胞(p53缺陷型肝癌细胞系)并用甲基磺酸(MMS)处理后;Calcein AM/PI和M30染色检测细胞凋亡;GFP-LC3质粒转染细胞后检测自噬;荧光定量PCR和免疫印迹检测自噬基因表达.结果表明,ASPP2在p53缺陷的Hep3B细胞内可诱导发生凋亡;在MMS存在和缺失条件下,Adr-ASPP2均引起自噬体水平升高及自噬基因的表达增加,且MMS协同Adr-ASPP2能使自噬水平增加;进一步用VPS34 siRNA和DRAM siRNA抑制自噬发现,细胞凋亡水平下降,说明由Adr-ASPP2诱发经损伤相关自噬调节蛋白(DRAM)介导的自噬参与了肝癌细胞系凋亡的发生.综上结果表明,ASPP2可以通过非p53依赖的DRAM介导自噬,并促进肝癌细胞凋亡.该研究可为肝癌的基因治疗提供新的思路.展开更多
目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,...目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,分离白细胞,提取基因组DNA,采用特异性引物PCR方法,扩增LAPTM4B第一外显子5′UTR内的部分序列,对三组人群进行分析研究.x^2检验分析肝癌组与对照组LAPTM4B的基因多态性和其他相关因素的相关性.结果:LAPTM4B等位基因在三组观察对象中的分布,^*1和^*2在健康对照组的频率分别是75.71%和24.29%,慢肝组73.16%和26、84%,肝癌组中66.84%和33.45%,三组比较等位基因分布频率有统计学意义,健康对照组与肝癌组比较有统计学意义(x^2=6.979,P=0.008).LAPTM4B的基因型LAPTM4B1^*1型、LAPTM4B^*1/2混合型和LAPTM482^*2型在肝癌组中的频率分别是37.9%、57.9%和4.2%、慢肝组50.5%、45.3%和4.2%、健康对照组56.6%、38.3%和5.1%,三组间三种基因型分布频率比较有统计学意义(x^2=14.854,P〈0.005).结论:基因型^*1/2和等位基因^*2可能与肝癌的发生有关.展开更多
文摘p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)能特异性地与p53蛋白结合并增强其促凋亡的功能,进而发挥抗肿瘤作用.本室前期研究发现,ASPP2可以通过p53-DRAM-自噬途径诱导细胞凋亡.在本研究中,利用ASPP2腺病毒感染Hep3B细胞(p53缺陷型肝癌细胞系)并用甲基磺酸(MMS)处理后;Calcein AM/PI和M30染色检测细胞凋亡;GFP-LC3质粒转染细胞后检测自噬;荧光定量PCR和免疫印迹检测自噬基因表达.结果表明,ASPP2在p53缺陷的Hep3B细胞内可诱导发生凋亡;在MMS存在和缺失条件下,Adr-ASPP2均引起自噬体水平升高及自噬基因的表达增加,且MMS协同Adr-ASPP2能使自噬水平增加;进一步用VPS34 siRNA和DRAM siRNA抑制自噬发现,细胞凋亡水平下降,说明由Adr-ASPP2诱发经损伤相关自噬调节蛋白(DRAM)介导的自噬参与了肝癌细胞系凋亡的发生.综上结果表明,ASPP2可以通过非p53依赖的DRAM介导自噬,并促进肝癌细胞凋亡.该研究可为肝癌的基因治疗提供新的思路.
文摘目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,分离白细胞,提取基因组DNA,采用特异性引物PCR方法,扩增LAPTM4B第一外显子5′UTR内的部分序列,对三组人群进行分析研究.x^2检验分析肝癌组与对照组LAPTM4B的基因多态性和其他相关因素的相关性.结果:LAPTM4B等位基因在三组观察对象中的分布,^*1和^*2在健康对照组的频率分别是75.71%和24.29%,慢肝组73.16%和26、84%,肝癌组中66.84%和33.45%,三组比较等位基因分布频率有统计学意义,健康对照组与肝癌组比较有统计学意义(x^2=6.979,P=0.008).LAPTM4B的基因型LAPTM4B1^*1型、LAPTM4B^*1/2混合型和LAPTM482^*2型在肝癌组中的频率分别是37.9%、57.9%和4.2%、慢肝组50.5%、45.3%和4.2%、健康对照组56.6%、38.3%和5.1%,三组间三种基因型分布频率比较有统计学意义(x^2=14.854,P〈0.005).结论:基因型^*1/2和等位基因^*2可能与肝癌的发生有关.