血栓弹力图在肝移植围术期中的应用进展

凝血功能紊乱是影响肝移植患者预后的重要因素,及时有效的判断、凝血功能监测就变得尤为重要。

丙泊酚对幼鼠肝缺血再灌注致脑损伤时NR2B/CaMKⅡα信号通路的影响

目的评价丙泊酚对幼鼠肝缺血再灌注致脑损伤时含2B亚基的NMDA受体(NR2B)/钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)信号通路的影响。方法健康清洁级C57BL/6小鼠64只,2周龄,体重4~6g,采用随机数字表法分为4组(n=16):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(HI/R组)、丙泊酚组(P组)、丙泊酚+肝缺血再灌注组(P+HI/R组)。采用夹闭肝左、中叶脉管共干制备70%肝缺血再灌注损伤模型。P组、P+HI/R组于建模前30min腹腔注射丙泊酚20mg/kg。再灌注6h时处死8只小鼠,取海马组织,观察病理学结果,TUNEL法确定凋亡指数;采用Westernblot法测定海马NR2B、磷酸化NR2B(p-NR2B)、CaMKⅡα、磷酸化CaMKⅡα(p-CaMKⅡα)表达水平。其余8只于建模后1个月行Morris水迷宫实验。结果与S组比较,HI/R组和P+HI/R组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间百分比降低,海马p-NR2B及p-CaMKIIα表达上调,凋亡指数升高(P<0.05),P组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与HI/R组比较,P+HI/R组逃避潜伏期缩短,原平台所在象限停留时间百分比升高,海马p-NR2B及p-CaMKIIα表达下调,凋亡指数降低(P<0.05),海马组织病理损伤减轻。结论丙泊酚减轻幼鼠肝缺血再灌注致脑损伤的机制可能与抑制NR2B/CaMKIIα信号通路活性,减轻神经元凋亡有关。

小檗碱对小鼠肝缺血再灌注致脑损伤的预防效应:与GSK-3β活性的关系

目的评价小檗碱对小鼠肝缺血再灌注致脑损伤的预防效应及其与糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)活性的关系.方法健康清洁级雄性C57BL∕6小鼠48只,体重20~25g,采用随机数字表法分为3组(n=16):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(I∕R组)和小檗碱组(B组).B组于术前7d经胃灌注小檗碱50mg∕kg,1次∕d,连续7d.采用夹闭肝左、中叶脉管的共干制备70%肝缺血再灌注损伤模型.再灌注后6h处死小鼠,取海马组织,光镜下观察病理学结果,TUNEL法确定凋亡指数;采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量;采用Westernblot法测定磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和GSK-3β表达,计算p-GSK-3β∕GSK-3β比值;采用分光光度法测定线粒体通透性转换孔(mPTP)开放程度.结果与S组比较,I∕R组和B组凋亡指数和MDA含量升高,SOD活性和p-GSK-3β∕GSK-3β比值降低,mPTP开放程度增加(P<0.05);与I∕R组比较,B组凋亡指数和MDA含量降低,SOD活性和p-GSK-3β∕GSK-3β比值升高,mPTP开放程度降低(P<0.05),海马组织病理损伤减轻.结论小檗碱对小鼠肝缺血再灌注所致的脑损伤有预防效应,机制可能与抑制GSK-3β活性,从而抑制mPTP开放有关.

氢气对脓毒症大鼠免疫抑制状态的影响

目的评价氢气对脓毒症大鼠免疫抑制状态的影响。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠,7~8周龄,体重220~260 g。实验Ⅰ采用随机数字表法分为2组:脓毒症组(Sep组,n=36)和假手术组(Sham组,n=12)。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备大鼠脓毒症模型。于CLP术后即刻、1、2、3和4 d时采用流式细胞术检测外周血组织相容性DR抗原(HLA-DR)/CD14^(+)单核细胞水平。外周血HLA-DR/CD14^(+)单核细胞水平<30%为脓毒症免疫抑制模型制备成功。实验Ⅱ随机选取脓毒症免疫抑制大鼠12只,采用随机数字表法分为2组(n=6):脓毒症免疫抑制组(Sep-IS组)、脓毒症免疫抑制^(+)氢气处理组(Sep-IS+H组);另取正常大鼠12只,采用随机数字表法分为2组(n=6):假手术组(Sham组)和假手术^(+)氢气组(Sham^(+)H组)。Sep-IS^(+)H组于脓毒症免疫抑制成功制备即刻、制备后6 h时,Sham^(+)H组于相应时点吸入67%氢气1 h。于上述时点氢气吸入结束即刻(T0、T1)和模型制备后12 h(T_(2))时采用流式细胞术检测外周血辅助T淋巴细胞17(Th17细胞)、调节性T淋巴细胞(Treg细胞)和HLA-DR/CD14^(+)单核细胞水平。结果实验Ⅰ与Sham组相比,Sep组CLP术后1~4 d时外周血HLA-DR/CD14^(+)水平降低(P<0.05)。实验Ⅱ与Sham组相比,Sep-IS组、Sep-IS^(+)H组各时点外周血HLA-DR/CD14^(+)单核细胞水平降低,Treg细胞、Th17细胞水平升高(P<0.05),Sham^(+)H组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与Sep-IS组相比,Sep-IS^(+)H组T_(1,2)时外周血HLA-DR/CD14^(+)单核细胞水平升高,T_(2)时外周血Th17细胞水平升高,T_(1,2)时外周血Treg细胞水平降低(P<0.05)。结论氢气可改善脓毒症大鼠免疫抑制状态。