1株产铁载体辣椒内生细菌的分离鉴定及其促生长作用

本研究从多年种植辣椒的田间采集了长势优良的植株根系,表面消毒后从中分离到1株内生细菌PEB40。该菌株能在铬天青(CAS)平板上产生较大的噬铁圈,还具有较好的产吲哚-3-乙酸(IAA)和溶解有机磷的能力,显示了很好的植物促生长潜能。盆栽试验显示,PEB40菌株对辣椒具有显著的促生长效果,施用该菌剂后,辣椒的结果数、产量、株高、展幅与空白组相比均存在显著的优势(P<0.05),其中株高增加了18.9%,展幅增加了20.7%,产量增加了35.3%,表明内生菌PEB40对辣椒具有明显的促生长效果。根据其16S rDNA序列、进化树及形态特征分析,该菌为假单胞菌属(Pseudomonas)新种的可能性大。本研究结果表明,CAS平板可用于高通量快速筛选促生菌,所得菌株PEB40亦为进一步开发新型微生物肥料奠定了基础。

短短芽孢杆菌TetR基因家族的鉴定及表达模式分析

采用生物信息学方法从生防菌短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)X23全基因组水平鉴定出13个TetR家族基因,将其命名为BbTetR1、…、BbTetR13,对其基本性质、基因结构和高级结构进行分析。结果表明:短短芽孢杆菌TetR家族成员在进化上具有保守性,基因序列长度为477~681 bp,编码的蛋白由168~226个氨基酸组成,相对分子质量为1.9×10^(4)~2.57×10^(4),等电点为4.84~7.77;其基因家族成员可划分为3个亚族,亚族Ⅰ包含5个成员,亚族Ⅱ、亚族Ⅲ各包含4个成员;所有BbTetR蛋白均含有大量α-螺旋,且这些蛋白的空间结构呈现多样化;转录组分析结果表明,不同的BbTetR在短短芽孢杆菌不同生长时期的表达模式和表达量差异显著,BbTetR1、BbTetR5、BbTetR8和BbTetR10在短短芽孢杆菌不同生长阶段均有较高表达,推测其可能发挥更重要的调控作用。

链霉菌Ahn75菌剂助剂的筛选及对水稻稻瘟病的防效研究

为了研制一种高效防治水稻稻瘟病菌剂,本文以水稻稻瘟病病原菌高效拮抗内生菌株灰褐色链霉菌Ahn75为研究对象,分析了不同助剂,包括营养物质、润湿剂、分散剂、紫外保护剂和稳定剂等对孢子萌发和菌剂稳定性能的影响,并探讨了优良助剂协同生防菌株对水稻稻瘟病的防效。结果发现,叶面肥、酵母提取物、吐温80和糊精均能显著促进链霉菌Ahn75孢子的萌发,且糊精还可一定程度保护Ahn75孢子免受紫外线伤害,而稳定剂海藻酸钠对链霉菌Ahn75孢子萌发影响最小,且表现出比其他稳定剂更好的稳定性能。室外盆栽试验显示,各助剂与Ahn75孢子悬浮液复配均能显著降低水稻叶瘟的发病率和病情指数,其中混合助剂的协同防效最佳,叶瘟防效达38.06%。结合室内和室外试验结果,最终确定菌剂的最佳配方为:孢子含量1×10^(8) CFU/mL、营养物质酵母提取物的质量分数0.05%、润湿分散剂吐温800.05%、紫外保护剂糊精1.00%、稳定剂海藻酸钠0.15%。该研究为生防链霉菌Ahn75菌株的田间应用提供了重要的理论依据和支撑。

抑真菌伯克霍尔德氏菌Z1的分离鉴定及其抑菌物质分析

研究表明多年连作农作物常因根际有益菌群的丢失出现抗病能力降低,而相应野生植株的根际土壤可让其恢复抗病能力。伯克霍尔德氏菌分布广泛,合成的天然产物结构丰富、活性多样,某些菌株还能杀虫、固氮。本研究采用针对该属细菌的选择性培养基,从野生禾本科植株根际分离到多株伯克霍尔德氏菌,其中菌株Z1能抑制多种植物病原真菌的生长。基因序列分析及生理生化特征表明,菌株Z1可能为洋葱伯克霍尔德氏菌基因组变异型Ⅸ(吡咯伯克氏菌)的一个新成员。根据高分辨质谱及血平板试验结果推测,该菌产生的抑真菌物质可能为环脂肽occidiofungins和burkholdines,其中有部分为新衍生物。尽管这两种环脂肽结构相似,但既能合成occidiofungins又能合成burkholdines的伯克氏菌还未见报道。次级代谢产物生物合成基因簇预测结果显示,Z1基因组中仅含有与occidiofungin生物合成基因簇高度同源的基因簇。

一株辣椒内生拮抗细菌的筛选及初步鉴定

从多年连作重茬的辣椒地采集健康植株,表面消毒后从根系中分离到1株内生拮抗细菌PEB-99,该菌株抗菌谱较广,对辣椒青枯雷尔氏菌、辣椒疫霉菌、辣椒炭疽病菌、辣椒镰刀枯萎病菌都有显著抑制效果,无菌发酵液亦具有抑制细菌和真菌的活性,通过16S r DNA测序对该菌株进行了鉴定,初步认为PEB-99菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),该菌能产生铁载体、吲哚-3-乙酸(IAA),还具有溶解有机磷的能力,显示了很好的抗病促生长潜力。

一株辣椒内生拮抗放线菌的筛选及初步鉴定

为筛选防治辣椒土传病害的优良生防菌种资源,从多年连作重茬的辣椒健康植株根系内分离到一株内生拮抗放线菌PES-A23。研究结果表明:该菌株抗菌谱较广,对辣椒疫霉菌、辣椒炭疽病菌、辣椒镰刀枯萎病菌、油菜菌核病菌、香梨腐烂病菌、水稻稻瘟菌、白色假丝酵母、金黄色葡萄球菌均具有显著抑制效果,通过16s rDNA测序、进化树分析初步鉴定为鲤链霉菌(Streptomyces carpaticus)。

湘南脐橙柑橘黄龙病的PCR检测及内生细菌的分离

为确保湘南脐橙产业发展安全,严格防控柑橘黄龙病,从湘南地区几个脐橙种植园采集柑橘黄龙病疑似病株样品和健康植株样品,利用文献报道的柑橘黄龙病PCR检测常用引物对样品进行分子检测,并从病株组织中分离内生细菌进行分析鉴定。结果表明:在柑橘黄龙病的常规PCR检测中,湘南脐橙总核酸对P400引物的灵敏度最高,是湘南地区脐橙中柑橘黄龙病害常规PCR检测的最佳引物,其次为P535引物,而OI和16S这2对引物的灵敏度较低;对脐橙中柑橘黄龙病病株组织内生细菌的分离鉴定发现,柑橘中可培养内生细菌主要归类为7个属,分别为短杆菌属(Curtobacterium)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、异常球菌属(Deinococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、甲基杆菌属(Methylobacterium)、微杆菌属(Microbacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus);其中,LB和1/10LB培养基中的优势菌属为短杆菌属、鞘氨醇单胞菌属和芽孢杆菌属;而脐橙树叶汁培养基中的优势菌属为短杆菌属、鞘氨醇单胞菌属和微杆菌属。