雪旺细胞复合细胞外基质凝胶移植对神经元逆行性死亡保护作用的研究

目的 雪旺细胞 (SC)和细胞外基质 (ECM)凝胶复合 ,修复周围神经缺损 ,研究 SC的成活和对背根神经节内神经元逆行性死亡的保护作用。 方法 1将 SC制成 1× 10 8/ ml的 ECM凝胶后 ,置入 PL A中空纤维管中 ,修复大鼠 10 mm坐骨神经缺损 ,以单纯 ECM凝胶组和生理盐水组作为对照。术后 8、 12周 ,组织学检测 ,评价其效果。 2将Brd U标记的 SC复合 ECM凝胶后 ,置入 PL A中空纤维管中 ,修复大鼠坐骨神经缺损 ,术后 3、6周取材 ,Brd U免疫组织化学染色 ,观察 SC存活情况。 结果 1SC和 ECM凝胶复合移植 ,多数细胞可存活至 3周 ,部分细胞可存活至 6周。2 SC和 ECM凝胶复合组、ECM凝胶组 ,L5背根神经节内成活的神经元数量分别是健侧的 83.5 %和 81.3% ,显著高于单纯生理盐水组的 72 .9% (P<0 .0 5 )。 结论 SC和 ECM凝胶复合移植 ,多数细胞能成活并能使背根神经节内 83.5

bFGF-MAb抑制卵巢癌细胞及其腹腔移植瘤生长的实验研究

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子的单克隆抗体 b FGF- MAb对人卵巢癌细胞的增殖、卵巢癌腹腔移植瘤裸鼠的生存率和肿瘤血管生成的影响 ,为卵巢癌的临床生物治疗提供实验基础。方法 1将人卵巢癌细胞株 SKOV3接种于 2 4孔板 ,加入不同浓度的 b FGF- MAb,每日行结晶紫染色、Vector2 - 14 2 0多标记计数仪比色 ,测定 OD4 90 值 ;2将 SKOV3细胞接种于 BAL B/ c裸鼠腹腔形成卵巢癌腹腔移植瘤模型 ,每周 2次将 b FGF- MAb注射于腹腔 ,比较裸鼠生存时间 ;3解剖裸鼠 ,计数肠系膜上种植瘤的个数并称重 ;4对移植瘤组织进行 CD31 的免疫组化染色后测定肿瘤内微血管密度 (MVD)。结果 1b FGF- MAb在 0～ 15 μg/ ml的范围内 ,其抑制 SKOV3细胞增殖的作用呈浓度依赖性 ,实验第 4 d,15 μg/ m l组能抑制细胞增殖的 2 4 % ;2腹腔注射 b FGF- MAb的裸鼠生存时间较对照组平均延长 10 d;3b FGF- MAb组肠系膜上肿瘤种植灶的数目和重量分别是对照组的 70 .6 %和 6 9.2 % ;4 b FGF- MAb组腹腔移植瘤 MVD是对照组的 6 2 .8%。结论 b FGF- MAb能明显抑制卵巢癌的生长和肿瘤血管生成 。

DNA疫苗引发局部肌肉组织DCs、CD4^+T细胞的聚集浸润

目的观察在注射DNA疫苗后的不同时间段内,肌肉注射部位细胞的聚集情况,并对细胞表型进行检测,为阐述DNA疫苗激活机体免疫反应机制提供直接的组织学证据。方法分别于DNA注射小鼠后6h、12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d切取注射部位肌肉组织,HE染色观察细胞聚集情况;LSAB法检测聚集细胞CD205、CD4及CD8分子的表达。结果疫苗注射后6h～6d,在肌肉组织间隙中发现有不同程度的细胞浸润,早期主要以巨噬细胞样细胞和淋巴细胞为主,晚期巨噬细胞样细胞占优势。在疫苗注射后24h的肌肉组织中有少量的CD205阳性细胞,第3d时数量稍多,其余时间段CD205染色均为阴性。对浸润的淋巴细胞的亚型进行鉴定发现,在6h～6d的肌肉切片中只检测到CD4+T细胞,未发现CD8+T细胞的细胞。结论DNA疫苗免疫注射引发的细胞浸润与一般的炎症反应不同,有其特有的特征。DCs、CD4+T细胞参与DNA免疫并可能起着重要的作用;DNA免疫激活的CTL发挥免疫效应可能不在肌肉组织。

在基质材料中生长的许旺细胞:存活、黏附、三维生长和迁移特性

目的:将许旺细胞与细胞外基质凝胶、聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝复合培养,观察许旺细胞的存活、黏附、三维生长和迁移等生物学行为。方法:实验于2005-02/2006-03在四川大学完成。①实验材料:3～6月龄SD大鼠40只。16～24周流产胎儿由四川大学华西二医院计划生育科提供,产妇及其家属均签署知情同意书,实验经医学伦理委员会批准。聚乳酸-羟基乙酸共聚物(中国科学院成都分院化学所提供);细胞外基质凝胶(Sigma)。②实验方法:将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解,旋转抽丝法制成直径为20～40μm的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝。无菌条件下取胎儿坐骨神经,去除神经外膜,胰酶消化+差速贴壁法去除成纤维细胞,达80%融合时行BrdU标记。③实验评估:将许旺细胞离心制成0.1～0.2mm3的微粒,接种在细胞外基质凝胶中,观察许旺细胞在凝胶中的存活、生长和移行。将许旺细胞制成1×1010L-1的30%细胞外基质凝胶后,分别滴加在经过胶原、细胞外基质凝胶预处理的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝的一端,观察许旺细胞在纤维丝上的黏附、生长和迁移。将BrdU标记的许旺细胞复合细胞外基质凝胶后,置入聚乳酸纤维管用以修复大鼠坐骨神经缺损,术后3,6周取材,BrdU免疫组化染色观察许旺细胞的存活情况。结果:①许旺细胞在无血清状态下能在细胞外基质凝胶中存活,并分裂、增殖,相互移行形成类似Bungner带状的许旺细胞柱状结构。②许旺细胞能贴附在聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝上生长并沿纤维丝移行,形成多层排列的类似Bungner带状的许旺细胞柱,细胞外基质凝胶能显著增加贴附和移行细胞数量,而胶原作用不显著。③许旺细胞和细胞外基质凝胶复合移植,6周后BrdU阳性细胞数明显低于第3周(t=3.71,P<0.01),成活细胞能在细胞外基质凝胶中移行。结论:许旺细胞与细胞外基质凝胶、聚乳酸-羟基乙酸共聚物纤维丝等生物材料复合培养时,能存活、分裂、增殖,相互移行形成类似Bungner带状的细胞柱,并可贴附在纤维丝上生长迁移,该生物学行为对神经组织工程具有重要作用。

大鼠肝纤维化进程中AT1R/MasR的动态变化

目的研究大鼠肝纤维化进程中肝脏AT1R、MasR水平及AT1R/MasR的动态变化。方法将36只雄性Wistar大鼠随机为正常组8只和模型组28只,模型组采用四氯化碳(CCl4)制备大鼠肝纤维化模型,正常组给予腹腔注射等量的生理盐水,分别在干预第2,4,6,8周取各组大鼠肝组织进行HE和Masson三色染色,观察肝组织结构变化情况,并采用Western blot法检测肝组织匀浆中AT1R、MasR蛋白表达情况。结果随着时间延长,模型组大鼠肝纤维化程度逐渐加重;在大鼠肝纤维化进程中,肝组织中AT1R、MasR蛋白表达水平呈上升趋势;第2,4周,模型组AT1R/MasR比值明显低于正常组(P均<0.05),而第6周模型组其比值高于正常组及第4周时(P<0.05),第8周时该比值明显高于第6周时(P<0.05)。结论 AT1R、MasR均参与大鼠肝纤维化形成。

早老素-1基因多态性与迟发性老年痴呆的相关性

老年性痴呆（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病，ＡＤ）是以记忆减退，认知障碍，人格改变为特征的脑退行性疾病。根据发病年龄的不同，将本病分为早发性和迟发性两种类型。对于早发性家族性ＡＤ的遗传学研究已较清楚，但是迟发性ＡＤ的发病机理尚不明了。１９９６年Ｗｒａｇｇ等［１...

弗劳地枸橼酸盐杆菌致小儿腹泻病因探讨

为了解弗劳地枸橼酸盐杆菌引起小儿腹泻的致泻机理,对从腹泻患儿粪便中分离的弗老地枸橼酸盐杆菌采用聚合酶链反应(PCR)技术和家兔肠袢结扎等试验。结果,50株受检菌中共检出产肠毒素菌26株,其中产LT16株、产ST6株、产ST-LT4株。动物眼角膜试验表明枸橼酸盐杆菌不具有侵袭性。结果提示产肠毒素是该菌致患儿腹泻的重要因子。

检验大专班医学遗传学教学的几点体会

我校招收的首届成人检验大专班学员．他们学习热情高，了解现令检验方面的新技术、新方法，但部分学员基础较差．这就使教学在课时分配，内容设置等方面的安排有一定难度。现把我们在教学过程中的几点体会作一介绍，希望对今后的教学及安排工作能有所帮助。

1例因情绪问题而求助的案例报告

1例因工作与学习冲突导致心情焦虑、紧张，主动求助。通过对求助者临床资料的收集分析，求助者自知力完整，有强烈的求助动机和行为，并且没有出现违背判断病与非病三原则的情况。制定咨询的目标，应用认知一行为疗法改变认知，缓解紧张情绪，改善人际关系取得支持帮助。咨询划分心理诊断、心理帮助、结束巩固三个阶段。求助者自我评估情绪好转，心情放松，取得帮助。咨询师评估求助者情绪明显好转，正常学习与生活，达到咨询目标。

艾滋病的流行迫使第三世界国家使用疫苗

巴西、泰国、乌干达将实施已被美国抛弃的HIV疫苗的大规模实验计划。不久前,这三个发展中国家的代表在世界卫生组织的一次会议上向美国提出了需要疫苗的请求。因为在他们的国家中,艾滋病正迅速流行,使他们在来不及确认疫苗是否有效的情况下,便使用疫苗。

小学篮球适宜形式研究报告

篮球是最受人们喜爱的体育项目之一。可是,在小学里,篮架常孤零零地站在球场上,很少有小朋友自发去玩;为迎接比赛任务而大力组织起来的代表队的训练,动作也容易歪扭错误而难于纠正,形不成腕、指发力的正确动作,以致小学球赛中的优秀运动员,以后难以向上输送,这是形成培苗史上挫折、夭折的原因之一;小学球赛,使人感到粘滞沉重,小朋友机敏灵活的特长不能得到发挥。

PDCA循环法在急诊护理教学中的应用

目的:探讨PDCA循环法在急诊护理教学中的应用效果。方法:96名护生分为对照组46名和试验组50名,分别采用传统急诊带教方法和PDCA循环法进行急诊教学,对比两组实习结束时考核成绩和对教学满意度。结果:试验组平时成绩、理论知识、操作技能和总分均显著高于对照组(P<0.05)。试验组对教学的满意度显著高于对照组(P<0.05)。结论:PDCA循环法在急诊教学使护生积极性、主动性更强,知识、技能的掌握和急诊(接诊)实践能力更好,达到了改善教学管理、教学实践,提高教学质量的目的。

邓州市人大代表担任节日廉政监督员

近日，邓州市人大常委会研究决定，由市、乡人大代表肩负起义务廉政监督员的重任，对借节日巧立名目滥发奖金，党员干部借红白喜事大操大办、借机敛财，以检查为名公款吃喝、高档消费以及借学习、考察之名到风景名胜区观光旅游等进行监督。一经发现，立即报告市人大常委会，由有关部门立案查处。目前，

组织工程化人工神经修复周围神经缺损的实验研究

目的 研究雪旺细胞和生物降解支架材料复合后构建成的组织工程化人工神经修复神经缺损的效果。方法 将雪旺细胞制成 1× 1 0 8/ml的ECM (extracellularmatrix,ECM)凝胶 ,与PLA无纺纤维布复合培养 7d ,置入PLA中空纤维管中 ,构建成组织工程化人工神经。建立大鼠坐骨神经缺损 1 0mm的动物模型 ,A组为人工神经组 ;B组为雪旺细胞复合ECM凝胶组 ;C组为单纯ECM凝胶组 ;D组为自体神经移植组。术后 8周、1 2周 ,行神经电生理和组织学检测评价疗效。结果 术后 1 2周A组的再生神经纤维已越过远端缝合口 ,有髓神经纤维数和神经纤维密度稍差于D组 ,但再生神经组织的面积显著高于后者 ;A、D组的髓鞘厚度和dLAT、NCV、AMP、AREA均无显著差别 ,但明显高于B、C组。结论 雪旺细胞、ECM凝胶和PLA多孔材料与PLA中空纤维管组合后构建成的组织工程化人工神经 。

直接扩增法在血痕、肋软骨和唾液检材中的应用

目的采用Identifiler Direct PCR试剂盒直接扩增法进行棉签擦拭血痕、肋软骨和烟蒂唾液斑DNA分型检验,并评价其应用价值。方法收集棉签擦拭血痕、烟蒂各20份,肋软骨10份,采用Identifiler Direct PCR试剂盒进行直接扩增及分型检验,以相同检材采用磁珠法/Chelex-100法提取模板DNA后扩增检验结果作为对照,对两组所得结果进行比较分析。结果棉签擦拭血痕和肋软骨一次检测完整分型率均为100%,分型结果与对照组一致;烟蒂上唾液斑有2份检材第一次未能完整分型,调整方法再次检验后获分型成功。结论实际检案中的棉签血痕、肋软骨和烟上唾液斑,采用直接扩增法检测,方法简单、快速、稳定、检材用量小,可在实际检案中选择使用。

许旺细胞在支架材料中的三维生长与迁移的研究

目的 研究许旺细胞在聚乳酸 (PLA)无纺纤维布及聚羟基乙酸 (PLGA)纤维丝上的粘附、三维生长及迁移情况。 方法 将许旺细胞 /ECM凝胶悬液与PLA无纺纤维布及经胶原、多聚赖氨酸和ECM预处理的PLGA纤维丝复合培养 ,相差和激光扫描共聚焦显微镜观察许旺细胞在纤维丝中的三维生长和迁移。 结果 许旺细胞 /ECM悬液 ,与PLA无纺纤维布复合 ,随着凝胶的形成 ,大部份许旺细胞滞留在纤维网孔中 ,多数细胞和纤维丝贴附 ,形成多层排列的类似B櫣ｎｇｎｅｒ带状的许旺细胞柱硗赴芴皆赑LGA纤维丝上生长并沿纤维丝移行 ,ECM凝胶能显著增加贴附和移行细胞数量。 结论 ECM凝胶能促进许旺细胞在支架中的黏附、生长与迁移 ,是构建组织工程化人工神经的良好整合材料。

“全面建设小康社会的经济目标”课堂实录

教学目标 1．知识目标：了解实现总体小康存在的缺陷和全面小康的目标；知道总体小康的建设成就在宏观和微观上的表现；把握全面建设小康社会的经济建设目标。