肝细胞肝癌患者外周血CD8^+T淋巴细胞凋亡相关机制探讨

目的:探讨肝细胞肝癌患者外周血CD8^+T淋巴细胞(CTL细胞)凋亡的相关机制及临床意义。方法:收集30例健康体检者及60例不同临床分期肝细胞肝癌患者外周血,应用流式细胞仪检测分析CTL细胞相对百分比、凋亡情况及CTL细胞表面Fas(CD95)表达情况。结果:肝细胞肝癌患者外周血CTL细胞相对百分比含量高于健康体检者[(26.4%±9.2%)vs(19.7%±4.7%),P<0.05]。肝细胞肝癌患者外周血Annexin V+CTL细胞凋亡率高于健康体检者[(25.3%±6.5%)vs(12.1%±6.5%),P<0.05]。肝细胞肝癌患者Fas+CTL细胞含量高于健康体检者[(62.2%±18.5%)vs(42.6%±16.5%),P<0.05]。Fas表达与CTL细胞的凋亡呈正相关。不同TNM分期患者CTL细胞凋亡能力不同,随着病情程度恶化,细胞凋亡水平增加[(27.7%±5.9%)vs(20.6%±5.1%),P<0.001]。结论:肝细胞肝癌患者外周血中CTL细胞的百分比增加,提示在肿瘤的发生发展过程中机体存在抗肿瘤免疫效应,但是基于Fas/FasL途径的CTL细胞凋亡比例增加,可能是肿瘤细胞免疫逃逸的重要机制。

膀胱癌造口病人生存质量及其影响因素的研究

[目的]了解膀胱癌造口病人术后12个月内生存质量状况及其影响因素。[方法]选择36例膀胱癌腹壁造口病人作为造口组及同期膀胱癌行保留膀胱手术病人36例作为对照组,分别在术后1个月内、3个月、6个月和12个月,采用世界卫生组织生存质量(WHOQOL-100)量表收集资料;选择欧洲癌症研究与治疗组织直肠癌特异量表(QLQ-CR38)对造口组病人进行上述4个时间段生存质量调查。[结果]造口组与对照组WHO-QOL-100得分术后1个月内差异无统计学意义(P>0.05),在术后3个月有了明显改善;造口组病人QLQ-CR38中身体形象、泌尿道症状和与造口相关问题,术后3个月后有明显改善。[结论]膀胱癌造口病人术后1年内的生活质量是动态变化的,而且生存质量较未造口病人差,与造口相关的问题对造口病人的生存质量影响较大。

沉默Id1基因表达对卵巢癌细胞生长影响的实验研究

目的:通过构建人卵巢癌SKOV3 Id1特异性siRNA慢病毒载体及其裸鼠移植瘤模型,观察沉默分化抑制因子(inhibitor of differentiation-1,Id1)表达对卵巢癌SKOV3生长的影响。方法:根据Id1基因序列设计并合成的siRNA片段转染SKOV3细胞,将转染细胞分为四组:cell+lv-shRNA-Id1(实验组)、cell+lv-shRNA-NC(质粒对照组)、cell+lv-control(空病毒对照组)、cell(空白对照组),筛选出稳定转染的SKOV3细胞克隆,48小时后检测细胞生长活性。将40只裸鼠随机分为四组,分别接种上述转染成功的细胞,30天后称取瘤体重量,计算抑瘤率;然后通过Western blotting法检测移植瘤中Id1蛋白的表达。结果:在体外试验中,实验组的细胞生长活性显著低于空白对照组,具有统计学意义(P<0.05),三对照组间无明显差异(P>0.05);体内实验显示,实验组平均瘤重均低于其他三对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),三对照组间瘤重差异无统计学意义(P>0.05);实验组、质粒对照组、空病毒组抑瘤率分别为45.98%、4.84%、4.50%;Western blotting结果显示,实验组中Id1表达较对照组明显下调(P<0.05)。结论:沉默Id1基因能抑制卵巢癌细胞的生长,有望成为卵巢癌治疗新靶点。

肝细胞癌患者外周血死亡受体表达及其与CD8＋T淋巴细胞凋亡的相关性

目的探讨肝细胞癌（HCC）患者外周血CD8＋T淋巴细胞凋亡的相关机制。方法应用流式细胞术检测了30名健康对照、30例肝硬化患者及60例HCC患者外周血CD8＋T淋巴细胞比例、凋亡情况，CD8＋T淋巴细胞表面Fas表达情况。组间差异比较用独立样本t检验，方差不齐的数据用Mann—WhitneyU非参数检验，P〈0．05为差异有统计学意义。结果HCC组外周血CD8＋T淋巴细胞占总T淋巴细胞比例为26．4％士9．2％，高于肝硬化组的24．5％±7．1％（t=0．783，P=0．489）及健康对照组的19．7％±4．7％（t=2．920，P=0．004）。HCC组外周血凋亡的CD8＋T淋巴细胞占总CD8＋T淋巴细胞比例为25．3％±6．5％，高于健康对照组的12．1％±6．5％（t=7．555，P〈0．001）及肝硬化组患者的13．6％±5．8％（t=5．213，P〈0．001），差异均有统计学意义。HCC组Fas’CD8＋T淋巴细胞占总CD8＋T淋巴细胞比例为62．2％±18．5％，高于健康对照组的42．6％±16．5％（t=4．127，P〈0．001）和肝硬化组的46．1％±14．5％（t=2．561，P〈0．01），差异均有统计学意义。Fas表达与CD8＋T淋巴细的凋亡呈正相关（r2=0．113，P〈0．05）。结论HCC患者外周血中CD8＋T淋巴细胞比例较健康对照组增加，但是基于Fas／FasL途径的CD8＋T淋巴细胞凋亡比例增加，可能是肿瘤细胞免疫逃逸的重要机制。

超声造影引导下行微波消融术治疗肝癌的临床效果分析

目的：评估超声造影（CEUS）gl导下微波消融（MwA）治疗肝癌的有效性及应用价值。方法：108例肝癌患者，共147个病灶经MWA治疗。根据患者在做常规超声检查时，是否有扫查不清晰的结节或其他影像学检查提示可能存在多发结节等，分成CEUS族和对照组。CEUS组41名患者，年龄（57．9±7．8）岁，共57个病灶，平均直径（2．4±1．5）cm，经超声造影引导下行微波消融治疗。对照组67名患者，年龄（55．5±8．9）岁，共90个病灶，平均直径（2．6±1．7）cm，常规超声引导下同种条件行微波消融治疗。治疗后对两组患者进行6～12个月随访。结果：CEUS组的57个病灶均清晰显示其位置、数目、大小、边界、形态，完全消融的结节为55个，未完全消融的结节为2个。对照组67名患者的90个病灶，完全消融的病灶78个；未完全消融的结节12个。CEUS组完全消融率高于病例对照组（96．49％VS86．67％；P〈0．05）。随访6～12个月后发现，CEUS组完全消融率高于病例对照组（P〈0．05），差异有统计学意义。结论：CEUS能更好的显示病灶的位置、数目、大小，更精确显示病灶边界、范围，造影引导下MWA是一种有效提高完全消融效率的方法，具有较大应用价值。

siRNA干扰Id1表达增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性

[目的]探讨体外DNA结合抑制因子(inhibitor of DNA bindingor differentiation,Id)的表达对卵巢上皮癌SKOV3对顺铂化疗敏感性的影响。[方法]构建靶向Id1基因siRNA慢病毒载体并转染SKOV3细胞,筛选出稳定转染的SKOV3细胞克隆。实验分为4组:实验组(Cell+LvshRNA-Id1)、阴性对照组(Cell+Lv-shRNA-NC)、病毒对照组(Cell+Lv-control)与空白对照组(Cell group)。CCK8检测各组SKOV3细胞不同时间增殖活性以及暴露于不同浓度顺铂(0.1、0.2、0.5、1、2、5、10μg/ml)48h后顺铂对各组SKOV3细胞的半数抑制浓度,分析沉默Id1基因后卵巢癌细胞对顺铂化疗敏感性的影响。[结果]三组对照组细胞增殖活性随着时间增加显著,而实验组则增加缓慢。在48h和72h时,实验组细胞增殖活性值分别为0.449±0.072μg/ml、0.885±0.232μg/ml,与三组对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);实验组顺铂对SKOV3细胞的半数抑制浓度为1.5±0.71μg/ml,明显低于对照组(P<0.01)。[结论]抑制Id1基因表达可以增加顺铂对卵巢癌细胞的生长抑制作用,为临床进一步提高卵巢癌的疗效提供了研究基础。

罗格列酮促进卵巢癌细胞凋亡的体内实验研究

[目的]探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)配体罗格列酮(RGZ)对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌SKOV3细胞的抑制作用。[方法]建立卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,观察不同剂量RGZ对移植瘤体积的影响;HE染色观察各组移植瘤组织细胞形态学变化;免疫细胞化学法观察移植瘤中Bcl-2、Cytochrome C蛋白表达水平。[结果]RGZ组(4mg/kg,12mg/kg,60mg/kg,120mg/kg)裸鼠移植瘤体积分别为0.190±0.023mm3、0.065±0.003mm3、0.195±0.004mm3和0.182±0.023mm3,较对照组(0.300±0.016mm3)均明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05)。抑瘤率分别为36.7%、78.3%、35.0%和40.0%。HE染色观察RGZ作用SKOV3细胞后有变性细胞、单细胞死亡及大面积的凝固性坏死。Bcl-2在RGZ组(60mg/kg,120mg/kg)中的表达较对照组显著下调,Cytochrome C在RGZ组(60mg/kg,120mg/kg)中的表达较对照组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]RGZ对卵巢癌裸鼠移植瘤有明显抑制作用,可促进凋亡。提示PPAR-γ可能成为卵巢癌治疗的新分子靶点。

34例儿童颅后凹肿瘤的临床观察及护理

３４例儿童颅后凹肿瘤的临床观察及护理哈尔滨医科大学附属第三医院（１５００４０）石春红，常永红，毕玉美儿童颅内肿瘤占儿童全身肿瘤的１５％～２０％，其中２／３位于颅后凹［１］。颅后凹内重要结构较多，又是脑脊液循环的必经之路，加之后颅凹空间狭小，容积代偿能...