药用野生稻基因组DNA提取方法比较

以药用野生稻为试验材料,分别选用传统的CTAB提取法、CTAB改良方法、碱裂解法、磁珠法、吸附柱法、尿素提取法及酶消化法7种方法提取水稻叶片组织DNA,7种方法分别标记为A~G。通过比较这些方法提取出DNA的浓度和纯度,分析这些方法的优劣势。7种方法均能获得较好的基因组,按获得DNA浓度表现为A>B>F>C>G>E>D,纯度表现为D>E>C>G>B>F>A。综合考量DNA的纯度、浓度、提取时间、成本、安全无毒等方面因素,若对基因组的质量要求不高,只是做简单的检测且考虑成本问题,可以选择CTAB提取法、CTAB改良方法和尿素提取法;若需要高纯度基因组,可以选择磁珠法、吸附柱法、碱裂解法;若考虑安全无毒、快速提取及成本可控,可以选择磁珠法、吸附柱法;若样品稀有,可以选用CTAB提取法和CTAB改良法。

树枝状大分子(PAMAM)的合成与表征及端基分析

用乙二胺为核,采用发散合成法,通过迈克尔加成反应和氨酰化反应合成3.0代(G)树枝状大分子聚酰胺-胺(PAMAM);采用傅立叶变换-红外光谱仪(FTIR)和核磁共振波谱仪(NMR)对合成产物的结构进行表征研究,并通过氨基滴定法对1代、2代和3代产物研究分析,获得端基(氨基)含量较高的目标产物。

马铃薯茎尖脱毒及病毒鉴定技术研究

为探讨利用马铃薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法,本实验以马铃薯茎尖分生组织为培养对象,通过外源激素分化愈伤组织形成组培苗,并用分子生物学的手段对病毒进行鉴定。实验中将本地小黄皮马铃薯品种的芽通过显微镜切下0.2~0.3 mm的茎尖,在基本培养基(MS)+0.5 mg·L^(-1)6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1或0.5 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA)培养基中进行试管苗分化培养,当分化出的试管苗培养到苗长5~10 cm时,转接到MA+6-BA 0.15 mg·L^(-1)+NAA 0.2 mg·L^(-1)培养基中进行壮苗培养,然后采用qRT-PCR的方法对小黄皮马铃薯试管苗进行病毒检测,实验表明,在试管苗中未检测出马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)、马铃薯H病毒(potato virus H,PVH)和马铃薯M病毒(potato virus M,PVM)等,大田种植的脱毒试管苗形成试管薯后,其产量和品质明显优于对照组。该研究为马铃薯茎尖脱毒苗生产提供合适的培养基配方以及简易的脱毒鉴定技术,为宁波马铃薯产业的发展提供技术保障。

中国首次发现旋柄腐霉(Phytopythium helicoides)引起草莓根茎腐病

根腐病是草莓主要病害之一,其病原菌种类较多,国内已报道的病原菌有:立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、终极腐霉(Pythium ultimum)[1]、镰刀菌(Fusarium sp.)、恶疫霉(Phytophthora cactorum)、拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis sp.)[2]等。草莓根腐病危害根部、茎基部,严重的导致茎内部髓坏死,甚至整株枯死,近几年逐年加重,尤其是在夏季育苗期其病害蔓延快,严重影响草莓产业的发展。