曲古抑菌素A促进As_2O_3诱导HL-60细胞分化与分子机制的研究

目的:研究曲古抑菌素A能否促进小剂量三氧化二砷(As2O3)诱导HL-60细胞分化并对其机制进行初步探讨。方法:用MTT实验测定药物对细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞表面CD11b表达率观察药物对细胞的分化作用;RT-PCR方法检测p21和cyclinD3在mRNA水平的表达变化。结果:HL-60细胞经曲古抑菌素A和(或)小剂量As2O3作用24h后,联合用药组较单用As2O3组能明显抑制细胞增殖,促进细胞分化,p21在mRNA水平表达增加,cyclinD3在mRNA水平表达降低。结论:曲古抑菌素A能促进小剂量As2O3诱导HL-60细胞的分化,其机制可能与细胞周期蛋白cyclinD3和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21的表达变化有关。

“顺藤摸瓜”血液内科见习教学模式的探讨

血液内科教学是医学教学的难点之一,存在疾病的表现特异性不强、疾病的诊断对实验室检查依赖性强、血液学知识比较抽象学生不易记忆等问题。我们根据血液科疾病的一般诊断思路建立了一种"顺藤摸瓜"的见习教学模式,有利于提高见习教学质量。

急性白血病FAB分类及预后

FAB分类在临床上应用了三十余年,在AL的分层治疗中起到了背景和桥梁的作用,现将FAB分类在AL分层治疗中的应用作一介绍,以期为提高AL患者的诱导治疗缓解率,降低复发风险提供参考。

复发难治性MM的治疗

随人口老龄化及免疫固定电泳等检查手段的逐渐普及,越来越多的MM患者得以早期诊断、早期治疗,进而生存期延长、并发症减少、预后改善。随包括蛋白酶体抑制剂在内的化疗及造血干细胞移植逐渐成为不同年龄段的一线治疗方案,越来越多的MM患者缓解率提高、生存期延长,

HL-60细胞高三尖杉酯碱诱导后CD44表达变化及机制的研究

目的:研究高三尖杉酯碱(homohar-ringtonine,HHT)诱导HL-60细胞分化后CD44表达变化及其与细胞周期调控的关系,探讨HHT的作用机制。方法:建立HHT诱导分化模型,瑞氏染色观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,流式细胞术检测细胞表面CD11b表达及细胞周期变化,RT-PCR检测CD44、p27、p21和Cyclin E基因在mRNA水平的表达变化。结果:MTT实验显示,HHT对HL-60细胞产生增殖抑制作用,HL-60细胞G0/G1期细胞百分比明显上升,S期细胞百分比明显下降,P<0.05。半定量分析PCR扩增产物光密度相对表达量显示,HHT诱导后HL-60细胞中CD44基因表达逐渐减弱,p27和p21基因逐渐增强,Cyclin E基因逐渐减弱。CD44与p27表达呈明显负相关,r=-0.686,P<0.05。结论:HHT可能通过下调CD44基因,进而提高p27和p21表达,抑制Cyclin E活性而对HL60细胞产生诱导分化作用。

FLAG方案及MEA方案治疗难治性和复发性AML的效果比较

目的探讨FLAG方案及MEA方案治疗难治性和复发性急性髓系白血病(AML)的疗效及安全性。方法将同期收治的36例AML患者随机分为观察组16例和对照组20例,分别采用FLAG方案及MEA方案治疗1个疗程,两组中性粒细胞(ANC)<0.5×109/L者均应用G-CSF至WBC>4.0×109/L,化疗期间均予水化及碱化治疗,并及时输注悬浮红细胞、血小板等纠正贫血及防治出血,观察疗效及不良反应发生情况。结果观察组完全缓解(CR)6例(37.50%)、部分缓解(PR)5例(31.25%)、有效率为68.75%(11/16);对照组CR 4例(20.00%)、PR3例(15.00%)、有效率为35.00%(7/20),观察组有效率显著高于对照组(P<0.05);两组均出现Ⅳ级骨髓抑制,但其化疗后白细胞及血小板最低值、中性粒细胞缺乏及血小板减少持续时间比较均无统计学差异;两组继发出血率、感染率及非血液学不良反应发生率均相似,其中观察组继发感染率为100.00%,但经针对性治疗后均能耐受化疗。结论 FLAG方案对难治性和复发性AML的疗效明显优于MEA方案,且血液学及非血液学不良反应无明显增加,但继发感染率高。

单细胞自由生物基因组全序列的测定和比较基因组研究

近几年来五种单细胞生物的基因组计划得以完成。本文介绍了从五种生物的全基因组序列获得的一些成果，包括全基因组鸟枪法测序、基因组分析和新比较基因组等三个方面，并对生物基因组计划的研究方法作一些探讨。

小剂量As_2O_3体外诱导HL-60细胞发生非终末分化分子机制的研究

目的探讨增强子结合蛋白C／EBPs在小剂量三氧化二砷(As_2O_3)诱导HL-60细胞发生非终末分化中的作用。方法采用瑞式染色观察细胞形态,WST1实验测定细胞增殖变化,测定和分析细胞周期,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测C／EBPα和C／EBPε的 mRNA表达。结果HL-60细胞经全反式维甲酸(ATRA)作用24 h后,随着细胞分化的发生, C／EBPε mRNA的表达明显增加,C／EBPα mRNA的表达降低。HL-60细胞经As_2O_3作用24 h后, C／EBPα mRNA的表达降低,C／EBPε mRNA的表达轻微增加。结论经As_2O_2和ATRA诱导后不同分化状态HL-60细胞,C／EBPα mRNA的表达降低,二者差异无显著意义;C／EBPε的表达差异较大(P<0．05),二者差异有显著意义。小剂量As_2O_3诱导HL-60细胞发生非终末分化可能是由于C／EBPε不能持续表达升高引起的。

急性髓系白血病(非M3)患者诱导治疗主要风险因素的研究

目的筛选影响接受诱导化疗急性髓系白血病(非M3)患者预后情况的主要风险因素,根据风险因素产生数学模型,预测其预后情况。方法对108例急性髓系白血病(非M3)患者进行回顾性研究,筛选年龄、细胞毒(药物)治疗史及全身状况等影响因素,构建Logistic回归模型,用该模型进行预测,与实际缓解情况比较,对缓解率做卡方检验,验证模型预测的准确性。结果 (1)单因素分析发现对急性髓系白血病(非M3)患者缓解有影响的变量为FLT3表达(χ2=23.336,P=0.000),CD34、HLADR共表达(χ2=6.783,P=0.000),NPM1表达(χ2=23.156,P=0.014),是否有骨髓增生异常综合征(MDS)前期病变(χ2=6.000,P=0.014),染色体核型(χ2=3.458,P=0.045)及乳酸脱氢酶(LDH)水平(χ2=2.472,P=0.015)。(2)多因素分析发现对急性髓系白血病(非M3)患者缓解有影响的因素为FLT3及NPM1表达[OR分别为0.042(95%CI 0.007~0.245)和9.287(95%CI 3.028~28.484),P值分别为0.000和0.000]。结论本试验中Logistic回归模型拟合较好,且具有一定的诊断价值。

Notch信号通路抑制剂在小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病中的作用

目的探讨Notch信号通路抑制药物r分泌酶抑制剂（γ-secretase inhibtor，GSI）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）发生发展的影响。方法用C57BL／6小鼠作为供鼠，BALB／c小鼠作为受鼠，建立小鼠同种allo-BMT模型。BALB／c小鼠随机被分为6组：（1）实验组1：受者经60Co射线照射后输注供者的骨髓细胞与脾细胞，并于移植前第1天，移植后第1、3天分别给受鼠腹腔注射GSI 5μmol／kg；（2）实验组2：受者经。Co射线照射后输注供者的骨髓细胞与脾细胞，并于移植后第1、2、3天分别给受鼠腹腔注射GSI5μmol／妇；（3）移植对照组：受者经。co射线照射后输注供者的骨髓细胞与脾细胞，并分别于移植前第1天和移植后第1、3天给受鼠腹腔注射二甲基亚砜；（4）单纯移植组：受者经60Co射线照射后输注供者的骨髓细胞与脾细胞；（5）单纯照射组：小鼠经60Co射线照射后不进行移植；（6）空白对照组：小鼠未作任何处理。观察各组小鼠的生长情况，监测外周血白细胞数和血小板数，测定移植后第7天时血白细胞介素4（IL-4）和7干扰素（IFN-γ）水平，观察小鼠的肝脏和小肠组织的病理变化。结果实验组1及实验组2的aGVHD发生率分别为60％（6／10）、50％（5／10），均明显低于移植对照组的90％（9／10，P％0．01）。实验组1及实验组2的小鼠存活时间分别为（25．4±3．1）d、（25．2±3．4）d，均明显长于移植对照组的（17．4±2．3）d（P〈0．01）。实验组1及实验组2发生aGVHD的受鼠小肠及肝脏病理改变明显轻于移植对照组。实验组1及实验组2受鼠移植后第7天时的血清IL-4浓度分别为（31．71±1．60）ng／L、（29．27±1．86）ng／L，均高于移植对照组的（23．04±1．82）ng／L（P〈0．01，P〈0．05）；实验组1及实验组2血清IFN-γ浓度分别为（25．97±1．15）ng／L、（22．69±3．01）ng／L，均明显低于移植对照组的（36．77±2．62）ng／L（P〈0．01）。接受移植的小鼠移植后第7天白细胞和血小板降至最低，然后缓慢回升，至研究结束，实验组1及实验组2小鼠的白细胞和血小板仍明显低于正常值（P〈0．01，P〈0．05）。结论GSI能够抑制小鼠allo-BMT后致死性aGVHD的发生，其机制可能与GSI抑制IFN-γ分泌，同时促进IL-4分泌有关。

HL-60细胞淫羊藿甙诱导后信号传导因子表达变化与意义

目的检测急性早幼粒白血病细胞HL-60经过淫羊藿甙(ICA)诱导后信号传导与转录激活因子(STAT1、STAT3)和有丝分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK、p42MAPK)表达变化在分化中的作用。方法建立ICA诱导分化模型,用瑞氏染色观察细胞形态,MTT实验测定细胞增殖的变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,RT-PCR方法检测STAT1、STAT3、p38MAPK、p42MAPK 的mRNA的表达。结果 HL-60细胞经ICA作用24 h后,随着细胞增殖降低和分化的发生, p42MAPK的mRNA表达增加,STAT3的mRNA表达降低,STAT1和p38MAPK的mRNA未见明显的表达。结论 p42MAPK和STAT3与ICA诱导HL-60细胞分化有关,而p38MAPK和STAT1则与ICA诱导HL-60细胞分化无关。

Notch1 siRNA对骨髓瘤细胞硼替佐米药物敏感性的影响

目的探讨Notch1 siRNA对体内外人骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞硼替佐米药物敏感性的影响。方法体外采用Notch1 siRNA转染RPMI-8226细胞,CCK-8实验检测细胞增殖及硼替佐米药物的敏感性;Western blot检测各组细胞Notch1蛋白表达变化;将RPMI-8226细胞皮下注射于NOD/SCID小鼠,建立人多发性骨髓瘤(MM)小鼠移植瘤模型,将成瘤小鼠分为三组:NS+bortezomib(Notch1 siRNA转染联合硼替佐米)组;CS+bortezomib(Control siRNA转染联合硼替佐米)组;UN+bortezomib(硼替佐米)组,观察各组肿瘤体积变化,免疫组化染色法观察Notch1变化,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 Notch1 siRNA有效下调骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞Notch1蛋白表达;Notch1 siRNA在96 h抑制细胞增殖作用明显增加,与CS及UN组比较对细胞增殖的作用可见明显差异(P<0.01);Notch1 siRNA转染组细胞对硼替佐米IC50值为1.21μmol/L,与Control siRNA转染组及未转染组相比均存在统计学差异(P<0.01);Notch1 siRNA降低移植瘤Notch1蛋白表达,Notch1 siRNA转染组细胞的AI明显高于Control siRNA转染组及未转染组(P<0.01);Notch1 siRNA转染联合硼替佐米组肿瘤体积明显减小,13、17及21 d与Control siRNA转染联合硼替佐米组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论体外实验Notch siRNA抑制人骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞增殖增加硼替佐米的敏感性,体内试验证实Notch siRNA联合硼替佐米可以明显减小荷瘤MM小鼠肿瘤体积、增加凋亡,提示Notchl是治疗MM的有效分子靶点。

试析中职教育面临的主要问题及对策

为促进职业教育大发展,自治区政府连续出台了一系列推进中等职业教育发展的重大政策措施,进一步加大了国家发展中等职业教育的力度。但中职教育仍然面临着各种困难和问题,如办学理念、专业设置、队伍建设等。文章以宁夏水校办学为例,试析中职教育问题与对策。

产教融合的现代学徒制实践探索

文章介绍了宁夏水电技师学院在学徒制实践中,与行业签订产教资源共享意向书,学院与行业资源深度融合,重组职教集团,探索现代学徒制实践经验,企业实行新型学徒制,形成了企校招工与招生利益共同体,深化了产教融合,为技工院校的发展带来了新机遇。