长程居家多导睡眠监测评估发作性睡病日间嗜睡的应用价值

目的探讨一种可以定量评估发作性睡病日间嗜睡严重程度的监测方法并验证其效果。方法收集2021至2022年在河北医科大学第二医院神经内科确诊的发作性睡病患者相关信息,整理患者记录的睡眠日志,所有患者均采用便携式多导睡眠记录仪进行长程居家多导睡眠监测,记录睡眠发作次数、发作时间及发作时长。结果发作性睡病患者三项睡眠量表评估分数均明显高于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.05)。多导睡眠监测数据结果与睡眠日志在发作次数、发作时长方面结果一致。用药前后、停药后多导睡眠监测记录的发作次数均多于睡眠日志记录,多导睡眠监测记录的发作时长长于睡眠日志记录。结论长程居家多导睡眠监测可作为定量评估发作性睡病日间嗜睡的方法,评估发作性睡病病情严重程度及药物治疗的效果,提供更加客观的睡眠数据。

小白菊内酯对杏仁核电点燃大鼠的神经保护作用及机制

目的探讨小白菊内酯对杏仁核电点燃癫痫大鼠行为学影响及其机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只。对照组不进行电刺激,每天给予Tween80腹腔注射;模型组、小白菊内酯低剂量组、小白菊内酯高剂量组每天给予1次电刺激制备杏仁核电点燃癫痫模型,其中小白菊内酯低、高剂量组于电刺激1 h前分别给予小白菊内酯250μg/kg、500μg/kg腹腔注射,模型组给予Tween80腹腔注射,共干预15 d。观察各组大鼠癫痫发作情况;电刺激结束后24 h行Morris水迷宫实验,记录大鼠逃避潜伏期及穿越平台象限百分比;然后检测脑组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果随着造模时间的延长,癫痫造模各组大鼠癫痫发作等级逐渐升高,但小白菊内酯低、高剂量组大鼠癫痫发作级别均明显低于模型组(P均<0.05),且小白菊内酯高剂量组明显低于同期小白菊内酯低剂量组(P均<0.05)。水迷宫实验中,模型组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显长于对照组(P均<0.05),穿越平台象限百分比明显低于对照组(P<0.05);小白菊内酯低、高剂量组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显短于模型组(P均<0.05),穿越平台象限百分比均明显高于模型组(P均<0.05);可视平台实验中,各组大鼠逃避潜伏期、游泳速度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脑组织中MDA含量明显升高(P<0.05),GSH含量明显降低(P<0.05);海马突触间隙明显增宽(P<0.05),活性带长度明显缩短(P<0.05),突触后致密物厚度明显降低(P<0.05)。与模型组比较,小白菊内酯低、高剂量组大鼠MDA含量均明显降低(P均<0.05),GSH含量均明显升高(P均<0.05);海马突触间隙均明显缩短(P均<0.05),活性带长度均明显变长(P均<0.05),突触后致密物厚度均明显增加(P均<0.05)。与小白菊内酯低剂量组比较,小白菊内酯高剂量组大鼠脑组织中MDA、GSH含量变化更明显(P均<0.05)。结论小白菊内酯对杏仁核癫痫大鼠有很好的神经保护作用,机制可能与其抗氧化和保护海马超微结构有关。

丰富环境对孕期癫痫仔鼠的保护作用

目的探讨丰富环境干预对孕期癫痫仔鼠认知功能的影响及其作用机制。方法7~8 w龄SD雌鼠随机分为两组:模型组、正常对照组,模型组大鼠给予杏仁核电点燃;对照组大鼠仅给予电极植入,造模成功后两组大鼠分别合笼,待仔鼠出生后饲养至21d分笼饲养,进行丰富环境干预,分为3组,分别为对照组(CON组)、孕期癫痫组(EP组)及丰富环境组(EP+EE组)。丰富环境干预28 d后应用Morris水迷宫评定仔鼠认知功能;透射电镜观察海马超微结构变化;Western blot检测蛋白PSD-95、SYN表达情况。结果EP组仔鼠较正常组逃避潜伏期明显延长;目标象限比明显降低(P<0.05);海马突触间隙明显增宽;活性带长度、突触后致密物厚度明显减低(P<0.05);海马突触相关蛋白SYN、PSD-95蛋白表达明显降低(P<0.05)。丰富环境干预后显著缩短逃避潜伏期;提高目标象限百分比(P<0.05);显著缩短海马突触间隙;增加活性带长度、突触后致密物厚度(P<0.05);明显升高突触相关蛋白SYN、PSD95表达(P<0.05)。结论丰富环境可显著改善孕期癫痫仔鼠认知功能,其作用机制可能是通过保护海马超微结构及调节突触相关蛋白来实现的。

PTZ诱导孕鼠痫性发作对胎鼠海马中bax、bcl-2、capase-3表达的影响

目的探讨母鼠孕期痫性发作对胎鼠海马中bax、bcl-2、capase-3表达的影响。方法将雌性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、盐水组(NS组)和癫痫组(PTZ组),采用戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)致痫模型,PTZ组大鼠每天给予腹腔下注射PTZ 35 mg/kg,点燃成功后将雌性SD大鼠与雄性SD大鼠合笼;发现阴栓记为孕0d,孕鼠继续孕前处理至孕20d。NS组腹腔注射相应剂量的生理盐水,NC组不做任何处理。Western Blot方法测定胎鼠海马组织中bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达变化。结果 PTZ组胎鼠海马caspase-3蛋白(2.57±0.08)较NC组(0.53±0.13)明显升高(P<0.05);PTZ组胎鼠海马bax蛋白(3.24±0.32)较NC组(1.55±0.11)明显升高(P<0.05);PTZ组子鼠海马bcl-2表达水平(1.42±0.074)较NC组(2.45±0.07)明显降低(P<0.05)。结论孕期痫性发作使胎鼠海马促凋亡蛋白bax表达增加,抑凋亡蛋白bcl-2表达降低,凋亡执行蛋白caspase-3表达增加,推测孕期痫性发作可能使胚胎海马神经元凋亡增加。

PI3K/Akt信号通路在癫痫鼠海马神经细胞中的作用及葡萄籽原花青素影响

目的探讨PI3K/Akt信号通路在戊四氮(PTZ)诱导癫痫大鼠海马神经细胞凋亡中的作用及葡萄籽原花靑素(GSPE)对其影响。方法根据是否给予PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂LY294002,将大鼠随机分为5组,每组10只:正常对照组、癫痫模型组(PTZ组)、LY294002+PTZ组、GSPE+LY294002+PTZ组、GSPE+PTZ组。采用流式细胞学检测海马组织线粒体膜电位(ΔΨm)水平,Western blot法检测海马组织p-Akt、Caspase 3蛋白的表达变化,电镜观察线粒体的超微结构,以明确GSPE预处理对上述指标的影响。结果与PTZ组相比,LY294002+PTZ组中Caspase 3表达水平显著升高。与LY294002+PTZ组相比,GSPE+PTZ组中p-Akt水平明显升高、Caspase 3蛋白水平明显下降(P<0.05),相应海马组织中线粒体ΔΨm的水平升高(P<0.05)及超微结构有所改善;而GSPE+LY294002+PTZ组中上述指标则差异无统计学意义。结论 GSPE干预可抑制癫痫鼠海马神经细胞的凋亡并保护线粒体的功能,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路抑制Caspase 3的表达有关。

表没食子儿茶素没食子酸脂对戊四氮致痫大鼠的保护作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸脂(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)致痫大鼠行为学影响及其作用机制。方法采用戊四氮致痫癫痫大鼠模型,将7~8w龄清洁级健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为五组:模型组(PTZ组);正常对照组(CON组);25mg·kg^(-1) EGCG+PTZ组;50mg·kg^(-1) EGCG+PTZ组;50mg·kg^(-1) EGCG组。行为学分级标准依据Racine分级,同时观察肌阵挛潜伏期、癫痫大发作潜伏期和癫痫大发作持续时间。给药结束后24h,各组大鼠断头处死,测定全脑还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果(1)EGCG干预可有效降低癫痫大鼠发作级别和癫痫大发作持续时间、延长肌震挛潜伏期及癫痫大发作潜伏期;(2)EGCG干预升高了癫痫大鼠脑内GSH水平;同时降低了MDA水平。结论EGCG可以有效抑制戊四氮诱导的癫痫发作,其抗癫痫作用可能是通过抗氧化作用来实现的。

表没食子儿茶素没食子酸酯对癫痫大鼠学习记忆能力的影响及其作用机制

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对杏仁核电点燃癫痫大鼠学习记忆能力的影响,探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、干预组(模型+25 mg·kg^(-1)EGCG)、EGCG组(25 mg·kg^(-1)EGCG)。EGCG组大鼠仅给予EGCG腹腔注射,正常组大鼠仅给予电极植入,另外各组给予杏仁核电刺激制备慢性点燃癫痫模型。EGCG每日于电刺激前给予腹腔注射,在最后1次电刺激24 h,应用Morris水迷宫记录大鼠逃避潜伏期,目标象限百分比;行为学测试结束后24 h,各组大鼠断头处死,尼氏染色观察海马神经元数量;应用透射电镜(TEM)观察海马突触致密物厚度、突触间隙、活动带长度及突触界面曲率;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马突触相关蛋白:突触囊泡蛋白(Syt)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)、Kalirin-7表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01),目标象限比明显降低(P<0.05);海马神经元数量显著减少(P<0.01);大鼠海马突触间隙明显增宽、活性带长度、突触后致密物厚度明显减低(P<0.05,P<0.01);海马突触相关蛋白Syt、PSD-95、Kalirin-7蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,干预组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01),目标象限百分比明显提高(P<0.05);海马神经元数量显著增加(P<0.01);大鼠海马突触间隙明显缩短、活性带长度、突触后致密物厚度明显增加(P<0.05,P<0.01);大鼠突触相关蛋白Syt、PSD-95、Kalirin-7表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:EGCG可有效改善癫痫大鼠认知功能,其保护作用可能是通过保护海马突触超微结构及调节突触相关蛋白Syt、PSD-95、Kalirin-7表达来实现的。