液相色谱-串联质谱法测定蜂王浆中新型烟碱类药物及其代谢物残留量

采用QuEChERS净化-液相色谱-串联质谱法(QuEChERS-LC-MS/MS)测定蜂王浆中新型烟碱类药物吡蚜酮、呋虫胺、烯啶虫胺、噻虫嗪、氟啶虫酰胺及代谢物4-(三氟甲基)烟酰胺、吡虫啉、噻虫胺、氯噻啉、啶虫脒及代谢物N-去甲基啶虫脒和噻虫啉的残留量。样品经水稀释,甲醇沉淀蛋白并提取,以N-丙基乙二胺(PSA)、C18和无水硫酸镁作为分散剂进行QuEChERS净化,采用液相色谱-串联质谱法进行检测(电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测模式),以同位素内标法和外标法进行定量分析。结果表明,该方法定量限以S/N=10计,吡呀酮、呋虫胺为2.5μg/kg,烯啶虫胺、氯噻啉、啶虫脒、噻虫啉为5.0μg/kg,噻虫嗪、氟啶虫酰胺、吡虫啉、噻虫胺、4-(三氟甲基)烟酰胺、N-去甲基啶虫脒为12.5μg/kg。线性相关系数大于0.996。对空白蜂王浆进行添加回收实验,回收率为81.2%～119%;相对标准偏差为1.7%～12.2%。该方法简便、快捷,定量限能够满足目前国内外最大残留限量的要求,可作为蜂王浆中新型烟碱类药物及其代谢物残留量的测定方法。

固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时测定葛根中11种黄酮苷元的含量

建立了固相萃取-液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定葛根中葛根素、甘草素、大豆素、野黄芩素、大豆黄素、槲皮素、鸢尾黄素、染料木素、山萘酚、黄芩素和刺芒柄花素11种黄酮苷元含量的方法。在0.10 g葛根样品中加入0.5 g叔丁基对苯二酚,36 mL 50%(体积分数)乙醇溶液和4 mL盐酸,在氮气保护下水解120 min,提取其中的11种黄酮苷元。采用Waters HLB固相萃取柱,以20%(体积分数)甲醇溶液为淋洗液,以甲醇为洗脱液对样品进行净化。以Mightysil RP-18色谱柱为固定相,以甲醇-水体系(大豆苷、大豆黄苷、刺芒柄花苷)或甲醇-0.15%(体积分数,下同)甲酸溶液体系(其他8种黄酮苷和11种黄酮苷元)为流动相进行梯度洗脱,采用LC-MS/MS测定其中11种黄酮苷元的含量。用体积比为4∶6的甲醇-0.15%甲酸溶液的混合液配制的混合标准溶液系列绘制标准曲线,外标法定量。结果显示:11种黄酮苷元的质量分数在0.05%~2.50%内与其对应的峰面积呈线性关系,葛根素、大豆素和黄芩素的检出限(3S/N)均为0.04%,甘草素、野黄芩素、大豆黄素、槲皮素、鸢尾黄素、染料木素、山萘酚和刺芒柄花素的检出限均为0.02%;对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,11种黄酮苷元的回收率为75.0%~94.0%,测定值的相对标准偏差(RSD,n=6)为3.5%~12%;方法用于实际葛根样品的测定,葛根素、大豆素、大豆黄素、染料木素和刺芒柄花素均被不同程度地检出。

固相萃取-超高效合相色谱法测定猪肉中氟苯尼考对映体及其代谢物氟苯尼考胺的含量

在10.0 g猪肉样品中加入含3%(体积分数)氨水的乙酸乙酯溶液25 mL,涡旋1 min混匀,离心5 min,所得沉淀用上述方法再重复提取一次。合并两次提取液,于40℃减压浓缩至近干,用10 mL磷酸盐缓冲溶液(pH 6.0)溶解残渣。所得溶液过活化好的HLB固相萃取柱,用10 mL水淋洗,真空抽柱1 min,用6 mL甲醇洗脱。收集洗脱液,于40℃氮吹至近干,加入体积比8∶2的正庚烷-异丙醇混合溶液1 mL,涡旋3 min溶解残渣,过0.22μm有机滤膜,滤液供超高效合相色谱仪分析。采用CHIRALPAK AD-3手性色谱柱作固定相,设置柱温40℃,系统背压13.8 MPa,以不同体积比的超临界二氧化碳和含0.5%(体积分数)氨水的甲醇溶液的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,在检测波长224 nm处用外标法测定(-)-氟苯尼考、(+)-氟苯尼考及它们的代谢物氟苯尼考胺的含量。结果显示:3种目标化合物的质量浓度在0.50~20.00 mg·L^(-1)内与其对应的峰面积呈线性关系,测定下限为0.05 mg·kg^(-1)[(-)-氟苯尼考和(+)-氟苯尼考]和0.1 mg·kg^(-1)(氟苯尼考胺)。以阴性猪肉样品为基质进行3个浓度水平的加标回收试验,3种目标化合物的回收率为81.2%~107%,测定值的相对标准偏差(n=6)为5.0%~9.0%。方法用于20份猪肉样品的分析,仅在1份样品中检出(-)-氟苯尼考(248μg·kg^(-1))。

液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中双甲脒及其代谢产物残留量

称取蜂蜜样品2.00g,加入同位素内标40ng,用pH7的磷酸二氢钾-磷酸氢二钠缓冲溶液溶解并稀释至10.0mL。充分混匀后,加入乙腈10.0mL和氯化钠2.0g,离心涡旋提取5min。取上层乙腈相保留待用,于下层水相中再加入乙腈10mL重复提取1次。合并两次提取液,加乙腈定容至20.0mL。分取此提取液1.0mL,加入于己预置N-丙基乙二胺(PSA)25mg、十八烷基硅烷(C18)10mg和MgSO430mg的离心管中,充分混匀后,高速离心,进行分散固相萃取(dSPE)净化。转移全部上清液,加水定容至2.0mL,此溶液供液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析。色谱分离中采用XDB-C18色谱柱为固定相,用不同比例的φ0.15%甲酸溶液(A)和乙腈(B)的混合液作为流动相进行梯度淋洗。所得各洗脱液按工作条件进行MS/MS测定双甲脒及其代谢物单甲脒、2,4-二甲基苯基甲酰胺和2,4-二甲基苯胺的残留量。由于采用空白蜂蜜作基体加入混合标准溶液制作工作曲线,并加入同位素内标参与定量,有效地克服了基质效应。上述4种化合物工作曲线的线性范围为0~100μg·kg^-1,测定下限(10S/N)依次为0.10,0.20,5.0,2.0μg·kg^-1。在实际样品基体中加入3个浓度水平的标准溶液(5.0,10,20μg·kg^-1)进行回收试验,测得回收率均大于80%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于10%。所提出方法具有简便、快速的优点,其测定下限能满足目前国内外的规定要求。