酵母完整细胞快速高效转化法

通过研究影响转化效率的诸因素,最终找到一种快速、高效酵母完整细胞转化法。整个转化步骤能在1.5h内完成。在实验中发现:小牛胸腺DNA的加入,在加入DNA后随即加入PEG4000;将42℃热冲击时间从5min延长到25min;热冲击后直接将转化混合物涂布到选择性平板上能得到高效转化效率。所用四种类型质粒的转化效率如下:YRp:3.5—7.2×10~4(线性pCN60/BamHI:1.6×10~6);YEp:1.7—2.6×10~4(线性YEp13/BamHI:8×10~4);YCp:3.7×10~4;YIp5/Stu I:7.6×10~3。用快速法检测的7株受体菌的转化能力都达到10~4个转化子/μg DNA。

用重组DNA方法构建分解淀粉酿酒酵母的新进展

自1978年酵母转化方法建立以来,DNA重组技术在酵母系统中得到了日趋完善的发展,为改良工业酵母菌种提供了新的,更加有效的一整套方法。近年来,美国、日本、巴西、加拿大和丹麦等国的研究人员利用重组DNA技术将各种来源的淀粉酶基因引入酵母(Saccharomyces)

酵母基因克隆受体菌的构建

近年来,一些国家的实验室采用酵母菌重组DNA技术将外源淀粉酶基因引入酿酒酵母中,构建成具有分解淀粉能力的工程菌株,其中酵母糖化酶基因是重要的来源之一。大部分酿酒酵母携带糖化酶基因的抑制基因(INH1),为了在酿酒酵母中克隆和表达糖化酵母糖化酶基因(STA),需要构建适宜的受体菌,其遗传标记应为trp1/leu2 sta°inh°。

中国流动老年人口城市心理融入空间差异及影响因素研究

运用2017年中国流动人口动态监测数据,从融入意愿、心理距离、身份认同三个方面对中国地级及以上城市流动老年人口城市心理融入水平进行测度,在此基础上运用多尺度地理加权回归以及K均值聚类方法,对其空间差异和影响因素展开研究。研究发现:①中国流动老年人口城市心理融入水平整体较高,但其空间差异特征显著,呈现川渝、西北以及东北等地区较高,华南、中东部沿海地区明显滞后的分异格局。②流动老年人城市心理融入水平受到其自身层面流动、家庭、户籍地、个体行为因素以及流入城市的公共服务共同影响,但不同影响因素存在显著的空间异质性和空间尺度差异。以此为依据,利用K均值聚类方法将其划分为家庭、户籍和行为因素主导区、健康服务因素主导区、行为因素主导区以及多因素共同作用区四大影响区域,为因地制宜、有针对性地制定相关政策提供一定依据。