抑制NF-κB对糖尿病大鼠肾组织ICAM-1表达的影响

目的:研究糖尿病大鼠肾组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,以及用吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)抑制核转录因子-κB(NF-κB)对其表达的影响。方法:用Wistar大鼠建立STZ诱导的糖尿病模型,设立正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病PDTC干预组(DP组),8周末用免疫组化方法测定肾组织中ICAM-1含量;体外培养大鼠肾小管成纤维细胞(NRK),葡萄糖孵育下分6组:正常对照组、高糖1组、高糖2组含葡萄糖分别为5.6、15和30mmol/L,干预1～3组在葡萄糖30mmo/L基础上分别加入PDTC5、10、20μmol/L。24h、48h后采用RT-PCR及免疫细胞化学(ICC)法检测各组的ICAM-1表达情况。结果:8周末,DM组肾组织ICAM-1表达较NC组明显增高,DP组较DM组明显下降,但仍高于NC组。各组NRK细胞中,与正常组相比,高糖各组ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且呈剂量时间依赖性;而不同浓度PDTC干预后,ICAM-1mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05),而且与PDTC呈剂量时间依赖性。结论:无论在体内或体外实验中,抑制NF-κB可降低ICAM-1的表达。

利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响

目的:探讨利拉鲁肽对高糖培养的H9c2心肌细胞氧化应激和内质网应激的影响。方法:在H9c2细胞的高糖培养液中加入利拉鲁肽(LIRA)、活性氧簇分子(ROS)清除药N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理24 h,用流式细胞术检测细胞的ROS水平,用Western blot的方法检测H9c2细胞内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达水平。结果:与正常糖对照组比较,高糖组细胞内的ROS含量、GRP78和CHOP的蛋白表达水平显著上升(P<0.01)。与高糖组比较,利拉鲁肽显著抑制了细胞内的ROS产生(P<0.01),降低了GRP78和CHOP的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:利拉鲁肽能抑制高糖培养的H9c2细胞的氧化应激和内质网应激水平。

糖尿病微血管病变

微血管病变是糖尿病的特异性病变，糖尿病微血管并发症包括肾脏病变、视网膜病变、神经宿变和心肌病变。糖尿病肾病是导致西方国家终末期肾病的首要原因，其肾组织早期病理改变为肾小球肥大、细胞外基质聚集、基底膜增厚，晚期出现弥漫性肾小球硬化，导致肾功能衰竭。

PBL联合CBL教学法在糖尿病专科护士临床护理带教中的应用

目的 探索以问题为导向的教学法(problem-based learning,PBL)和以案例为导向的教学法(case-based learning,CBL)两者相结合的教学模式在糖尿病专科护士临床护理带教中的应用效果。方法 选择2020年8月—2021年8月在武汉大学人民医院内分泌科进行糖尿病专科护士培训的60名护士为研究对象,将护士分为两组:对照组采用传统的以授课为导向的学习(lecture-based learning,LBL)教学方式授课,试验组采用PBL联合CBL教学模式授课;两组同时进行理论、技能操作考试,并采用湖北省糖尿病专科护士培训班临床教学基地教学质量满意度调查表调查护士对教学的满意度。结果试验组的理论考试和技能考试成绩均高于对照组,且试验组对教学满意度的评分更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 应用PBL与CBL两者相结合的教学模式能提高糖尿病专科护士的教学质量。

色素上皮衍生因子抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞转化生长因子β1、纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达

随着葡萄糖浓度的增加,人肾小球系膜细胞转化生长因子β1（TGF-β1）、纤连蛋白（FN）和Ⅳ型胶原（ColⅣ）的表达显著增加（P＜0.01）.在30 mmol/L的高糖条件下,40～160 nmol/L的色素上皮衍生因子（PEDF）显著抑制TGF-β1表达,呈剂量依赖性（P＜0.01）;5～40 nmol/L的PEDF也剂量依赖性地抑制FN和ColⅣ的表达（P＜0.01）,提示PEDF可能通过其抗纤维化的作用延缓糖尿病肾病的进程.

利拉鲁肽通过p38丝裂原活化蛋白激酶和c-Jun氨基末端激酶通路抑制高糖培养的H9e2细胞凋亡

目的探讨利拉鲁肽（LIRA）对高糖诱导的H9c2细胞凋亡的影响。方法在H9c2细胞的高糖培养液中加入LIRA、活性氧簇分子（ROS）清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MARK）抑制剂SB203580和c-Jun氨基末端激酶（JNK）抑制剂SP600125等不同的处理因素作用24h，采用流式细胞术检测细胞的凋亡，采用Westernblot法检测H9c2细胞活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（c-caspase-3）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）家族磷酸化的p38MAPK（p-p38MAPK）和JNK（p-JNK）的蛋白水平。结果正常糖对照组、等渗透压对照组和高糖组（HG组）的细胞凋亡率分别为（1．04-I-0．11）％、（1．27±0．04）％和（28．60±1．08）％。与正常糖对照组比较，等渗透压对照组的细胞凋亡率差异无统计学意义（P〉0．05），而HG组的细胞凋亡率显著增加（P〈0．01）。HG＋LIRA组、HG＋NAC组、HG＋SB203580组和HG＋SP600125组的细胞凋亡率分别为（6．67±0．77）％、（3．65±0．26）％、（4．59±0．48）％和（4．22±0．89）％。与HG组比较，HG＋LIRA组、HG＋NAC组、HG＋SB203580组和HG＋sP600125组的凋亡率均明显下降（P〈0．01）。与正常糖对照组比较，HG组心肌细胞内c-caspase-3、p-p38MAPK和p-JNK的蛋白表达水平明显上升（P〈0．01）。与HG组比较，利拉鲁肽明显抑制了c-caspase-3蛋白水平（P〈0．01），降低了p-p38MAPK和P-JNK的蛋白表达水平（P〈0．05）。结论利拉鲁肽可能通过抑制p38MAPK和JNK的磷酸化抑制高糖培养的H9c2细胞凋亡。

色素上皮衍生因子对高糖诱导人肾小球系膜细胞转化生长因子-β1／Smad信号转导途径的影响

目的观察色素上皮衍生因子（PEDF）对高糖诱导人肾小球系膜细胞（HMCs）转化生长因子-β1（TGF-β1）／Smad信号转导途径的影响。方法体外培养HMCs并将其分为正常对照组（5．6mmol／L葡萄糖）、渗透压对照组（5．6mmol／L葡萄糖＋24．4mmol／L甘露醇）、高糖组（30mmol／L葡萄糖）、干预1组（30mmol／L葡萄糖＋10nmol／LPEDF）、干预2组（30mmol／L葡萄糖＋40nmol／LPEDF）和干预3组（30mmol／L葡萄糖＋100nmol／LPEDF），分别作用24h后收集样本，采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测TGF-β1、纤维连接蛋白（FN）及Smad7 mRNA表达，Western blot检测Smad7蛋白的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测TGF-β1、FN蛋白水平，免疫细胞化学检测p-Smad2／3蛋白的表达。结果与正常对照组比较，高糖组TGF-β1、FN表达明显增加，Smad7表达明显减少（P〈0．05或P〈0．01），p-Smad2／3蛋白表达增加，而渗透压对照组与正常对照组比较无明显改变。与高糖组比较，PEDF干预组TGF-β1、FN表达减少，Smad7表达增加（P〈0．05或P〈0．01），p-Smad2／3蛋白表达呈下降趋势。结论PEDF能抑制高糖诱导的TGF-β1、FN和p-Smad2／3蛋白过度表达及上调Smad7表达。PEDF可能通过影响TGF-β1／Smad信号转导途径达到抗纤维化的作用，延缓糖尿病肾病的进程。

先天性肾上腺皮质增生症——21-羟化酶缺陷症姐妹二例报告

例1，10岁，出生后外生殖器异常，一直以女性身份抚养，无月经来潮。足月顺产，母孕期无明显感染及服用雄激素等药物史。查体：血压100／70mmHg，身高130cm，全身皮肤轻度色素沉着，以乳晕及外阴明显；乳房未发育，无阴毛，阴蒂增大似阴茎长度约4．5cm，阴唇融合似阴囊，外阴及双侧腹股沟区未触及睾丸，阴蒂腹侧根部可见尿生殖窦开口，未见阴道口。

高脂饮食所致胰岛素抵抗小鼠心肌胰岛素受体底物1的改变

目的探讨在高脂饮食导致的外周胰岛素抵抗存在的情况下，心肌胰岛素信号传导通路中的关键信号分子胰岛素受体底物1（IRS1）的改变及其机制。方法将20只雄性昆明小鼠随机分为对照组（ND组）10只及胰岛素抵抗组（IR组）10只，ND组给予普通饲料，IR组给予高脂饲料。16周时称量体质量、检测空腹血糖和空腹胰岛素，计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），用Western blot的方法检测心肌组织磷酸化c-jun氨基末端激酶（p-JNK）及307位丝氨酸磷酸化的IRS1（p-IRS1）的表达，用免疫组织化学染色的方法检测心肌组织活化的核因子-κB（NF—κB）的表达。结果ND组小鼠的体质量、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA—IR分别为（53．45±3．97）g、（5．60±0．63）mmol／L、（8．36±1．66）mU／L、2．06±0．35，IR组小鼠分别为（61．70±4．47）g、（7．44±0．68）mmol／L、（9．61±1．33）mU／L、3．16±0．36，IR组小鼠的体质量、空腹血糖、空腹胰岛素和HOMA—IR均高于ND组（P〈0．05）；ND组小鼠p-IRS1、p-JNK的表达水平和NF—κB的阳性细胞率分别为0．32±0．26、0．17±0．40、（11．17±6．75）％，IR组小鼠分别为0．77±0．23、0．68±0．12、（56．45±4．02）％，与ND组小鼠比较，IR组小鼠心肌p-IRS1蛋白水平明显上升（P〈0．05），IR组心肌活化的NF—κB和p-JNK表达比ND组显著增加（P〈0．01）。结论高脂饮食可成功诱导外周胰岛素抵抗小鼠模型，高脂饮食可能通过JNK和NF—κB通路引起IRS1丝氨酸磷酸化增加，进而导致心肌的胰岛素传导信号通路异常。

PEDF对人肾小球系膜细胞VEGF表达及活性氧簇产生的影响

观察不同浓度高糖培养下及人重组色素上皮衍生因子（PEDF）干预后人肾小球系膜细胞活性氧簇水平、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和蛋白的改变.结果 显示活性氧簇水平、VEGF mRNA和蛋白的表达随糖浓度的升高而增加;PEDF干预后,高糖环境下活性氧簇水平及VEGF的表达明显下降,且呈浓度依赖性.提示PEDF可能通过改善血管通透性和抑制氧化应激延缓糖尿病肾病的进展.

单纯男性化型21-羟化酶缺乏症五例临床分析

对5例单纯男性化型21-羟化酶缺乏症女性患者的就诊过程、临床表现及实验室检查结果进行分析。5例来我院就诊时平均年龄17岁（10～26岁）；出生时均有外生殖器男性化畸形；青春期第二性征不发育，无月经来潮；终身高明显受损。染色体检查核型均为46，XX；肾上腺CT平扫示双侧。肾上腺增大；中剂量地塞米松抑制试验前、后的血睾酮水平分别为（665±334）汕g／L和（81±25）μg/L，促肾上腺皮质激素水平分别为123（范围57～563）ng／L和〈5ng/L。以上均支持21-羟化酶缺乏症的诊断。提高对本病的认识、减少误诊、力争早期诊断早期治疗尤为重要。

2型糖尿病患者脂溶性维生素水平变化及其与血脂的相关性研究

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者脂溶性维生素A、D、E的变化及与其血脂的相关性。方法纳入74例T2DM患者作为病例组，选取同期健康体检者59例为对照组，采用液相色谱一串联质量光谱法技术检测两组研究对象的血清脂溶性维生素A、D、E水平并进行比较，分析T2DM患者血清脂溶性维生素水平变化及其与血脂的相关性。结果与对照组比较，病例组患者维生素A、D、E水平明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。血清维生素A、D、E缺乏诊断T2DM的受试者工作特征（ROC）曲线下面积分别为0．643、0．667和0．732（P〈0．01），且维生素A、E均与糖化血红蛋白（HbAlc）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）呈正相关，与高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）呈负相关（P〈0．05）；调整季节因素后，维生素D与上述两种脂溶性维生素表现出一致的相关性。结论T2DM患者血清脂溶性维生素水平明显降低，维生素A、D、E缺乏对T2DM的辅助诊断具有一定意义，并且与HbA1c、TG、LDL-C、HDL—C均有相关性。

武汉大学人民医院住院2型糖尿病患者骨密度及其影响因素

目的探索住院2型糖尿病(T2DM)患者骨密度(BMD)情况及合并骨质疏松症(OP)的相关影响因素。方法选取2014年3月—2017年3月在武汉大学人民医院住院的460例2型糖尿病患者,使用双能X线照射法(DEXA)测定患者的BMD,根据T值不同分为骨量正常组、骨量减少组、OP组;比较3组之间各临床指标的差异并进行相关性分析。结果 (1)住院T2DM患者中骨量异常的检出率达40%以上,其中女性患者的检出率大于男性,差异有统计学意义(P<0.05);(2)3组患者在年龄、体质指数(BMI)、BMD、血红蛋白(Hb)、碱性磷酸酶(ALP)、促甲状腺激素(TSH)、血肌酐(Cr)、肾小球滤过率(eGFR)、尿酸(UA)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹C肽(FCP)及2hC肽(2hCP)中比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)Pearson相关性分析显示,T2DM患者的BMD与BMI、Hb、AST(天冬氨酸转氨酶)、ALT(丙氨酸转氨酶)、尿素氮(Urea)、Cr、eGFR、UA、TG、FCP、2hCP成正相关,与年龄、ALP、HDL-C呈负相关;(4)多元逐步回归分析显示,骨密度与BMI、Hb、ALP、Cr、eGFR、UA、HDL-C独立相关。结论女性、低体重、贫血、高ALP、低UA、高HDL-C及肾功能异常更易患糖尿病性骨质疏松症(DOP)。