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光学相干断层扫描在视网膜中央动脉阻塞的应用
1
作者 林少芬 毛羽翔 《实用医技杂志》 2024年第4期269-270,I0002,共3页
目的研究应用光学相干断层扫描(OCT)和眼底彩照对视网膜动脉阻塞黄斑区变化图的分析。方法应用海德堡激光眼科诊断仪(HRA-OCT)对30例视网膜中央动脉阻塞(CRAO)进行OCT检查和眼底彩照,观察其形态学特征。利用OCT图像分析CRAO的特点。用HR... 目的研究应用光学相干断层扫描(OCT)和眼底彩照对视网膜动脉阻塞黄斑区变化图的分析。方法应用海德堡激光眼科诊断仪(HRA-OCT)对30例视网膜中央动脉阻塞(CRAO)进行OCT检查和眼底彩照,观察其形态学特征。利用OCT图像分析CRAO的特点。用HRA-OCT对19例CRAD患者进行黄斑部水平径线、垂直径线扫描,并眼底照相机眼底照相。13例测量患眼与对侧眼的视网膜中心凹旁鼻,颞侧厚度,SPSS21.0统计软件包,采用配对样本t检验。结果OCT特征:阻塞的视网膜增厚,内层结构分辨不清,神经上皮层部分反光增强,视网膜内层高反射率高。彩照显示后极部视网膜呈乳白色水肿,黄斑区有樱桃红点。比较患眼与健康眼的视网膜中心凹旁鼻侧厚度(t=-80.992,P<0.001);患眼与健康眼的视网膜中心凹旁颞侧厚度(t=-56.623,P<0.001),以及患眼视网膜中心凹旁颞侧与鼻侧的厚度(t=-60.463,,P<0.001),差异比较有统计学意义(P<0.001)。结论HRA-OCT能无创地观察CRAO视网膜组织形态学改变,对临床诊治提供指导性意义。 展开更多
关键词 体层摄影术 光学相干 眼底 视网膜中央动脉阻塞
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光学相干断层扫描在视网膜脱离诊断中的应用
2
作者 林少芬 毛羽翔 《实用医技杂志》 2023年第12期896-898,I0002,共4页
目的研究应用光学相干断层扫描(OCT)对确诊视网膜脱离黄斑区变化图的分析。方法应用海德堡激光眼科诊断仪(HRA-OCT)对42例视网膜脱离患者进行OCT检查,观察其形态学特征,并给予分析。利用OCT图像分析视网膜脱离患者的特点。同时予患者行... 目的研究应用光学相干断层扫描(OCT)对确诊视网膜脱离黄斑区变化图的分析。方法应用海德堡激光眼科诊断仪(HRA-OCT)对42例视网膜脱离患者进行OCT检查,观察其形态学特征,并给予分析。利用OCT图像分析视网膜脱离患者的特点。同时予患者行眼底彩照检查。20例患眼与对侧眼扫描并测量颞侧、鼻侧视网膜中心凹旁的厚度进行统计学分析,采用配对样本t检验。结果视网膜脱离的OCT特征是视网膜神经上皮层与视网膜色素上皮层的分离。眼底彩照显示脱离的视网膜呈灰白色隆起,起伏不平。患眼与对侧眼颞侧、鼻侧视网膜中心凹旁的厚度比较差异均有统计学意义(P<0.05)。高度近视、外力碰撞、用眼过度、精神紧张是本病相关危险因素。结论通过OCT、眼底彩照可以清晰地观察到视网膜脱离的形态学特征,HRA-OCT可以无创观察视网膜脱离的视网膜组织形态学改变,为临床诊治提供指导。 展开更多
关键词 视网膜脱离 体层摄影术 光学相干 黄斑
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改良的人视网膜血管内皮细胞的培养与鉴定方法 被引量:6
3
作者 毛羽翔 林少芬 +2 位作者 曾美珍 田景毅 唐仕波 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期8-12,共5页
背景优化人视网膜血管内皮细胞的培养和鉴定方法在视网膜血管性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功培养了人视网膜血管内皮细胞,但进一步简化其方法并达到获取量大而纯的细胞是基础研究和临床研究的基础。目的探索一种更为简便... 背景优化人视网膜血管内皮细胞的培养和鉴定方法在视网膜血管性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功培养了人视网膜血管内皮细胞,但进一步简化其方法并达到获取量大而纯的细胞是基础研究和临床研究的基础。目的探索一种更为简便快速、收获量大且纯度高的视网膜血管内皮细胞的改良培养方法,并对目标细胞的抗原表达特点进行分析,比较眼科新生血管性疾病研究中常用的两种血管内皮细胞的标志性蛋白表达情况。方法利用正常人角膜移植供体眼球分离视网膜组织,采用质量分数2%胰蛋白酶和质量分数0.133%胶原酶I用二步消化法获取人视网膜血管内皮细胞,在传统培养方法中采用含质量分数10%胎牛血清的人血管内皮细胞培养液的基础上,添加内皮细胞生长因子一B(13-ECGF)和肝素钠,对分离的细胞进行体外培养,培养皿用纤维黏连蛋白(FN)包被以促进培养细胞的贴壁。观察收获的目标细胞的形态特征,采用活体显微镜进行形态学观察、常规组织病理学观察目标细胞的生长状态,免疫组织化学法检测Ⅷ因子、CD31、CD34在细胞中的表达以鉴定目标细胞。结果应用胰蛋白酶、胶原酶二步消化法可成功获取人视网膜血管内皮细胞,原代培养的细胞72h贴壁,第9~10天细胞达到融合状态,呈铺路石样。常规组织学观察显示,细胞核呈鲜亮蓝色,细胞质呈淡红色。培养的细胞对Ⅷ因子、CD31、CD34相关抗原表达呈阳性反应。结果显示培养的血管内皮细胞均有CD31、CD34同时表达,但其阳性染色程度低于Ⅷ因子相关抗原阳性反应,人脐静脉血管内皮细胞(UVECs)与人血管内皮细胞相同。结论在胰蛋白酶、胶原蛋白酶消化法的基础上用含10%优质胎牛血清的人内皮细胞培养基中添加生长因子和肝素钠,并用FN包被培养皿进行体外培养,可达到快速、大量分离和纯化人视网膜血管内皮细胞的目的。 展开更多
关键词 视网膜血管内皮细胞 细胞培养 免疫组织化学 细胞鉴定
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环孢素影响化疗药物对视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用 被引量:5
4
作者 毛羽翔 吴中耀 +2 位作者 杨华胜 郑健 林少芬 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期212-216,共5页
【目的】 评价不同浓度环孢素(cyclosporin, CSA)影响化疗药物卡铂与足叶乙甙抑制视网膜母细胞瘤(retinoblastoma, Rb)细胞的促效作用?【方法】 实验分为卡铂组(G1)?卡铂+0.5 mg/L CSA组(G2)?卡铂+1.0 mg/L CSA组(G3)及足叶乙甙组(G4)?... 【目的】 评价不同浓度环孢素(cyclosporin, CSA)影响化疗药物卡铂与足叶乙甙抑制视网膜母细胞瘤(retinoblastoma, Rb)细胞的促效作用?【方法】 实验分为卡铂组(G1)?卡铂+0.5 mg/L CSA组(G2)?卡铂+1.0 mg/L CSA组(G3)及足叶乙甙组(G4)?足叶乙甙+0.5 mg/L CSA组(G5)?足叶乙甙+1.0 mg/L CSA组(G6),每组各加样5孔?G7组为不同浓度CSA单独作用于Rb细胞?用从0.004至1.00 mg/L倍数增加的9个不同浓度含量化疗药物卡铂和足叶乙甙及加入0.5 mg/L和1.0 mg/L浓度的环孢素作用于体外培养的SO-Rb50细胞?采用MTT法比较各组Rb细胞的生长抑制情况,通过计算Rb细胞抑瘤率?半数细胞抑制所需药物浓度IC50值及倒置显微镜下Rb细胞形态学检查,观察环孢素影响化疗药物抑制Rb细胞的作用?【结果】 卡铂及足叶乙甙加入CSA作用于SO-Rb50细胞,其细胞抑瘤率较单独应用卡铂及足叶乙甙时增高,G1~G6组的IC50值(mg/L)分别为:0.335 ?0.183 ?0.130?0.113?0.099?0.077 ,随着CSA的加用及浓度的增加,IC50值逐渐降低?G1与G2?G3组及G4与G5?G6组的抑瘤率分别作t检验,统计学分析均有显著性差异(P< 0.01)?G1与G2?G3组及G4与G5?G6组IC50的分别作方差分析检验,统计学分析均有显著性差异(P=0.005)?单纯CSA组抑瘤率与药物浓度无相关关系(P >0.1)? 展开更多
关键词 环孢素 化疗药物 视网膜母细胞瘤 肿瘤抑制 细胞形态学
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结膜下注射卡铂和环孢素联合治疗视网膜母细胞瘤的实验研究 被引量:1
5
作者 毛羽翔 吴中耀 +3 位作者 杨华胜 何剑峰 林少芬 黎玮 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期570-574,共5页
【目的】观察结膜下注射卡铂治疗视网膜母细胞瘤(RB)的疗效和环孢素(CsA)对卡铂治疗RB的增效作用。【方法】40只RB成瘤裸鼠分8组(G1~G8),对照组(G1)结膜下注射生理盐水,全身用药组(G2)腹腔内注射卡铂350μg+环孢素1.0mg,G3~G5组及G6... 【目的】观察结膜下注射卡铂治疗视网膜母细胞瘤(RB)的疗效和环孢素(CsA)对卡铂治疗RB的增效作用。【方法】40只RB成瘤裸鼠分8组(G1~G8),对照组(G1)结膜下注射生理盐水,全身用药组(G2)腹腔内注射卡铂350μg+环孢素1.0mg,G3~G5组及G6~G8组分别结膜下注射卡铂100、200、350μg及卡铂100、200、350μg+CsA1.0mg,每周2次共3周。每天裂隙灯观察前房肿瘤情况并照相,第6周取眼球及结膜、巩膜作病理及图像处理,计算肿瘤面积及肿瘤抑瘤率。【结果】G2、G3、G6组肿瘤生长较G1组减缓,肿瘤未能控制。G4组肿瘤生长延缓,肿瘤控制率为40%。G5及G7组肿瘤无继续增大,部分肿瘤体积减少,肿瘤控制率和治愈率为60%和20%,G8组肿瘤全部控制,肿瘤控制率和治愈率为20%和80%,肿瘤基本消失。结膜下注射部位结膜和巩膜检查未见异常。图像处理及统计学分析显示,G3、G4、G6肿瘤面积和抑瘤率与G2之间无显著性差异(P>0.05),G5、G7、G8组肿瘤面积和抑瘤率与G2之间有显著性差异(P<0.05)。【结论】结膜下注射卡铂能在较低剂量下抑制RB生长,加用CsA能提高卡铂治疗RB疗效。结膜下联合注射卡铂和CsA是一种安全有效的RB化疗方法。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤/化学疗法 卡铂 环孢素A 联合化疗 用药方法
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卡铂兔眼结膜下及全身注射后眼内药物浓度的检测及临床意义 被引量:1
6
作者 毛羽翔 吴中耀 +1 位作者 林少芬 黎纬 《眼科学报》 2004年第2期123-126,共4页
目的:全身静脉注射和眼结膜下注射化疗药物卡铂后检测眼内药物浓度,并比较两者的差别,为临床眼结膜下注射化疗药物卡铂治疗视网膜母细胞瘤提供理论依据。方法:分别用正常新西兰大白兔各4只,按18.7 mg/kg经静脉注射和10 mg/ml 0.5 ml右... 目的:全身静脉注射和眼结膜下注射化疗药物卡铂后检测眼内药物浓度,并比较两者的差别,为临床眼结膜下注射化疗药物卡铂治疗视网膜母细胞瘤提供理论依据。方法:分别用正常新西兰大白兔各4只,按18.7 mg/kg经静脉注射和10 mg/ml 0.5 ml右眼结膜下注射化疗药物卡铂,全身用药剂量是结膜下注射剂量的8倍。注射后1、2、3 h分别抽取房水和玻璃体样本0.2 ml,采用原子吸收光度法,用Z-8000型偏振塞曼原子吸收分光光度计检测房水及玻璃体中卡铂的含量。所得结果采用t检验进行统计分析。结果:全身用药后1、2、3 h房水和玻璃体卡铂含量分别为:140、330、180 ng/ml和20、40、17 ng/ml,结膜下注射后1、2、3 h房水和玻璃体卡铂含量分别为2 650、4 390、2 780 μg/ml和160、250、110 ng/ml。结果显示结膜下注药后眼内房水及玻璃体药物浓度明显高于全身用药后的眼内药物浓度,全身用药和结膜下用药各时段眼内药物含量分别作t检验,P<0.01,各组均有统计学显著性差异。结论:眼结膜下注射卡铂后眼内药物浓度明显高于全身注射后的眼内药物浓度。眼结膜下注射化疗药物这一方式可增加眼内药物浓度,有可能是一种有效的局部化疗方法。 展开更多
关键词 卡铂 眼结膜 全身注射 眼内药物浓度 视网膜
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神经元特异性烯醇化酶检测在眼科的临床意义 被引量:2
7
作者 毛羽翔 杨华胜 《国外医学(眼科学分册)》 1997年第2期120-123,119,共5页
神经元特异性烯醇化酶(Neuron-Specificenolase,NSE)是高特异性存在于神经元及神经内分泌细胞的特殊蛋白质,已被作为很有价值的血清学肿瘤标记物应用于临床上,特别是在神经元和神经内分泌细胞起源的肿瘤如神经母细胞瘤、小细胞肺... 神经元特异性烯醇化酶(Neuron-Specificenolase,NSE)是高特异性存在于神经元及神经内分泌细胞的特殊蛋白质,已被作为很有价值的血清学肿瘤标记物应用于临床上,特别是在神经元和神经内分泌细胞起源的肿瘤如神经母细胞瘤、小细胞肺癌等早期诊断、监测病情发展、评价治疗效果等有特殊的临床意义。近年NSE在眼科的临床应用已有文献报道。本文就NSE的分布、理化特性、检测方法作一简要概述,重点就NSE检测在视网膜母细胞瘤等眼科疾病应用价值作一综述。 展开更多
关键词 视网膜肿瘤 母细胞瘤 神经元 烯醇化酶 生化特性
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卡铂及足叶乙甙对视网膜母细胞瘤细胞体外药物敏感实验研究
8
作者 毛羽翔 吴中耀 +1 位作者 郑健樑 刘桂琴 《实用医学杂志》 CAS 2002年第7期691-693,共3页
目的 :为视网膜母细胞瘤临床化疗筛选对肿瘤作用敏感的化疗药物。方法 :采用MTT法 ,用不同类型、不同浓度的化疗药物 (卡铂及足叶乙甙 )作用于体外培养的SO RB5 0细胞系 ,观察其细胞生长的情况 ;观察加用各种化疗药物对视网膜母细胞瘤... 目的 :为视网膜母细胞瘤临床化疗筛选对肿瘤作用敏感的化疗药物。方法 :采用MTT法 ,用不同类型、不同浓度的化疗药物 (卡铂及足叶乙甙 )作用于体外培养的SO RB5 0细胞系 ,观察其细胞生长的情况 ;观察加用各种化疗药物对视网膜母细胞瘤细胞生长抑制的敏感性及作用的有效药物浓度。结果 :SO RB5 0细胞加入不同浓度的化疗药物 (卡铂及足叶乙甙 )后细胞生长受到抑制 ,其肿瘤抑制率与药物浓度呈相关关系。卡铂及足叶乙甙对SO RB5 0细胞系作用 48h的IC50 值分别为 :0 335 μg/ml ,0 113μg/ml。 结论 :SO RB5 0细胞对卡铂及足叶乙甙两种化疗药物均敏感 ,根据其IC50 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 卡铂 鬼臼毒素 微生物敏感性试验
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睫状体恶性髓上皮瘤一例报告
9
作者 毛羽翔 庞友鉴 《眼科研究》 CSCD 1995年第4期285-286,共2页
睫状体恶性髓上皮瘤一例报告毛羽翔,庞友鉴(中山医科大学中山眼科中心,广州510060)睫状体髓上皮瘤是一种临床少见的眼内恶性肿瘤,笔者所见一例结合文献复习报告如下。患者男性,6岁,左眼伤后2年,出现眼球肿物增大3月入... 睫状体恶性髓上皮瘤一例报告毛羽翔,庞友鉴(中山医科大学中山眼科中心,广州510060)睫状体髓上皮瘤是一种临床少见的眼内恶性肿瘤,笔者所见一例结合文献复习报告如下。患者男性,6岁,左眼伤后2年,出现眼球肿物增大3月入院。2年前左眼被竹击伤,当时左眼疼... 展开更多
关键词 睫状体 髓上皮瘤 病例报告
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甲状腺相关眼病患者眼眶前脂肪细胞的培养及分化 被引量:9
10
作者 王莉菲 吴中耀 +3 位作者 杨华胜 颜建华 毛羽翔 陈智聪 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期351-353,共3页
【目的】研究甲状腺相关眼病患者(TAO)眼眶组织中是否存在前脂肪细胞,在一定条件下能否分化为成熟脂肪细胞,探讨脂肪细胞在TAO发病中的作用。【方法】选用TAO患者眼眶中的脂肪颗粒,共8例(8只眼),采用组织块培养法培养细胞,观察细胞形态... 【目的】研究甲状腺相关眼病患者(TAO)眼眶组织中是否存在前脂肪细胞,在一定条件下能否分化为成熟脂肪细胞,探讨脂肪细胞在TAO发病中的作用。【方法】选用TAO患者眼眶中的脂肪颗粒,共8例(8只眼),采用组织块培养法培养细胞,观察细胞形态;细胞免疫组织化学方法检测前脂肪细胞因子鄄1的表达,初步验证前脂肪细胞的存在;诱导细胞向成熟脂肪细胞分化,油红O染色观察细胞形态及细胞内脂滴形成情况;RT鄄PCR检测分化过程中转录因子过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)表达的改变。【结果】原代培养细胞为梭形,增殖旺盛;免疫组化显示前脂肪细胞因子鄄1表达阳性;细胞可分化为成熟脂肪细胞,并伴有PPARγ基因表达的增强。【结论】TAO患者眼眶组织中存在着功能活跃的前脂肪细胞;进一步验证了脂肪细胞数量的增加在TAO发病中的重要作用。 展开更多
关键词 前脂肪细胞 脂肪分化 甲状腺相关眼病 细胞培养 基因表达
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视网膜母细胞瘤317例临床分析 被引量:17
11
作者 郑嵩山 吴中耀 +2 位作者 杨华胜 颜建华 毛羽翔 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第8期627-629,共3页
目的分析和探讨视网膜母细胞瘤(Rb)临床诊治特点。方法对1996~2005年收治的317例(362眼)Rb患儿临床资料进行回顾性分析。结果Rb患儿初诊症状最常见的是白瞳症,占81.39%,初诊年龄平均为30.18个月,主诉时间平均为117.86d,眼内Rb肿瘤厚度... 目的分析和探讨视网膜母细胞瘤(Rb)临床诊治特点。方法对1996~2005年收治的317例(362眼)Rb患儿临床资料进行回顾性分析。结果Rb患儿初诊症状最常见的是白瞳症,占81.39%,初诊年龄平均为30.18个月,主诉时间平均为117.86d,眼内Rb肿瘤厚度平均为10.71mm。有家族史者占总体的1.89%;单眼为0.37%,双眼为10.42%。Rb分期:眼内期占总体的55.33%,青光眼期为10.00%,眼外期为32.67%,远处播散期为1.00%,自发萎缩者为1.33%。治疗包括传统治疗方法和保守治疗方法,放弃治疗者占总体的9.39%,保守治疗者占治疗患儿的12.50%,眼球摘除者占治疗患儿的91.46%。结论Rb患儿就诊较晚且病情严重,眼内Rb肿瘤体积较大,眼外期患儿所占比例较大。目前Rb保守治疗率较低,眼球摘除率较高。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 临床特点 治疗方法
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甲状腺相关眼病患者眼眶脂肪抵抗素的表达 被引量:5
12
作者 刘红霞 吴中耀 +4 位作者 杨华胜 颜建华 毛羽翔 王莉菲 林征 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期314-317,共4页
目的通过检测抵抗素在甲状腺相关眼病患者及对照组眼眶脂肪组织和脂肪细胞中的表达,为进一步探讨抵抗素与甲状腺相关眼病的相关性打下基础。方法通过体外原代培养获得前脂肪细胞,前脂肪细胞在分化液的作用下转化为成熟脂肪细胞。用RT—... 目的通过检测抵抗素在甲状腺相关眼病患者及对照组眼眶脂肪组织和脂肪细胞中的表达,为进一步探讨抵抗素与甲状腺相关眼病的相关性打下基础。方法通过体外原代培养获得前脂肪细胞,前脂肪细胞在分化液的作用下转化为成熟脂肪细胞。用RT—PCR法检测眶脂肪组织、前脂肪细胞及成熟脂肪细胞中抵抗素mRNA的表达,并进行免疫组化检测抵抗素蛋白的表达。结果前脂肪细胞中无抵抗素mRNA及蛋白的表达。成熟脂肪细胞及眶脂肪组织中有抵抗素mRNA及蛋白的表达。免疫组化结果显示抵抗素蛋白位于成熟脂肪细胞胞浆中。结论甲状腺相关眼病患者眶脂肪中抵抗素mRNA及蛋白表达丰富,说明甲状腺相关眼病患者眶脂肪增多是因成熟脂肪细胞所占比例增加、脂肪细胞分化增强所致。 展开更多
关键词 甲状腺相关眼病 脂肪 抵抗素 前脂肪细胞
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MDCT与MRI诊断视网膜脱离的价值 被引量:3
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作者 陈芳妮 范淼 +1 位作者 毛羽翔 李华雨 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1043-1046,共4页
目的探讨多排CT(multi-detectorrow CT,MDCT)和MRI对视网膜脱离的诊断价值及临床意义。方法回顾性分析2007年5月2010年10月期间,中山大学中山眼科中心送至我院检查及中山大学附属第一医院检查的45例(47只眼)视网膜脱离患者的MDCT或... 目的探讨多排CT(multi-detectorrow CT,MDCT)和MRI对视网膜脱离的诊断价值及临床意义。方法回顾性分析2007年5月2010年10月期间,中山大学中山眼科中心送至我院检查及中山大学附属第一医院检查的45例(47只眼)视网膜脱离患者的MDCT或MRI图像,其中16例(17只眼)经MDCT诊断,29例(30只眼)经MR诊断;45例(47只眼)视网膜脱离患者中的32例(33只眼)经手术证实,13例(14只眼)经其它临床相关检查得到验证。结果 MDCT或MRI图像上可见到脱离的视网膜与眼球后壁之间的积液征象。在所有视网膜脱离的患者中,单纯视网膜脱离21只眼;伴有其它相关征象的26只眼。伴出血者20只眼、伴钙化者6只眼。其中,脉络膜骨瘤3只眼、脉络膜黑色素瘤5只眼。结论 MDCT成像速度快、对钙化病灶显示敏感;MR无辐射,软组织分辨力高,对出血及小范围视网膜脱离显示敏感;二者对视网膜脱离均有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 视网膜脱离 体层摄影术 X线计算机 磁共振
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兔眼前房视网膜母细胞瘤动物模型的建立 被引量:3
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作者 郑嵩山 吴中耀 +2 位作者 杨华胜 颜建华 毛羽翔 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第1期35-38,共4页
目的建立一种稳定的视网膜母细胞瘤(Rb)动物模型。方法38只新西兰大白兔,根据兔眼前房Rb细胞注入量及免疫抑制因素随机分为10组,除正常组(A组)2只(4只眼)外,其余B~J9组每组各4只(8只眼),兔眼前房注入Rb细胞后每天观察兔眼前房内Rb肿物... 目的建立一种稳定的视网膜母细胞瘤(Rb)动物模型。方法38只新西兰大白兔,根据兔眼前房Rb细胞注入量及免疫抑制因素随机分为10组,除正常组(A组)2只(4只眼)外,其余B~J9组每组各4只(8只眼),兔眼前房注入Rb细胞后每天观察兔眼前房内Rb肿物的生长情况,30d后处死动物,行组织病理学及免疫组织化学检查,并分析其成瘤率及维持时间等。结果C、D、F、G、H、I、J组动物前房内均有不同程度的Rb肿物生长,成瘤率为100%;C组与D、F、G组3组和H、I、J组3组之间前房维持时间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Rb胞浆神经元特异性烯醇酶(NSE)表达较强,S100表达较弱。结论兔眼前房内注入Rb细胞的密度大于4×107个/mL时会有不同程度的肿物生长;单独应用环孢素A(CsA)滴眼液、环磷酰胺(CTX),或二者联合应用,均能使兔眼前房内肿物在30d内稳定生长。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 成瘤率 动物模型 环磷酰胺 环孢素A
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改良的人视网膜Muller细胞的原代培养方法与鉴定 被引量:2
15
作者 林少芬 毛羽翔 +1 位作者 谢满云 唐仕波 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期22-25,共4页
背景视网膜Muller细胞是视网膜重要的胶质细胞,也是视网膜干细胞的来源之一,研究Muller细胞的生物学行为对研究视网膜的各种生理病理过程和视网膜干细胞治疗研究具有重要意义,而建立稳定的视网膜Muller细胞培养体系是相关研究的基础... 背景视网膜Muller细胞是视网膜重要的胶质细胞,也是视网膜干细胞的来源之一,研究Muller细胞的生物学行为对研究视网膜的各种生理病理过程和视网膜干细胞治疗研究具有重要意义,而建立稳定的视网膜Muller细胞培养体系是相关研究的基础。目的优化分离培养和纯化人视网膜Muller细胞的方法,为相关的实验研究提供良好优质的Muller细胞来源。方法分离人供体眼视网膜组织,然后将剪碎的视网膜组织置入质量分数0.25%胰蛋白酶+100U透明质酸酶混合溶液中进行消化,添加含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养液1~2ml终止消化,然后加入含体积分数20%胎牛血清的RPMI1640培养液培养72h,行半量换液,再以含10%胎牛血清的培养液进行传代。光学显微镜下根据细胞的形态特征进行细胞鉴定,并分别采用免疫荧光技术和免疫组织化学法检测胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Muller细胞特异性标志物谷氨酰胺合成酶(GS)的表达,对培养的细胞进行鉴定。结果应用0.25%胰蛋白酶+100U(商品单位)透明质酸酶的混合酶消化法可成功获取人视网膜Muller细胞,原代培养后24h细胞贴壁,培养后9—10d细胞融合。培养的细胞胞体呈长圆形,细胞质丰富,部分细胞体两端锥状长突起,末端膨隆,细胞核大。传代后的细胞胞体大,呈扁平多角形,符合Muller细胞的形态。细胞免疫组织化学和免疫荧光技术检测显示95%以上的细胞中GFAP呈阳性表达,90%以上的细胞中GS呈强阳性表达。结论应用透明质酸酶和胰蛋白酶混合液消化法可以成功分离人视网膜Muller细胞,分别用含20%胎牛血清和含10%胎牛血清的RPM11640培养液培养和传代的人视网膜Muller细胞产量高且纯度好。 展开更多
关键词 视网膜/细胞学 神经胶质细胞 细胞培养 MÜLLER细胞
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视网膜母细胞瘤眼内化学疗法的研究 被引量:2
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作者 郑嵩山 吴中耀 +2 位作者 杨华胜 颜建华 毛羽翔 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第6期421-424,共4页
目的探讨视网膜母细胞瘤(Rb)眼内化学疗法的效果。方法88只荷瘤兔眼,按兔眼前房内Rb肿物大小及眼内化学疗法剂量和途径随机分为11组(包括对照、前房注射、结膜下注射及全身注射组),每组8只眼,眼内化学疗法后每天观察兔眼局部及全身情况,... 目的探讨视网膜母细胞瘤(Rb)眼内化学疗法的效果。方法88只荷瘤兔眼,按兔眼前房内Rb肿物大小及眼内化学疗法剂量和途径随机分为11组(包括对照、前房注射、结膜下注射及全身注射组),每组8只眼,眼内化学疗法后每天观察兔眼局部及全身情况,30d处死动物,做常规病理学检查,并分析前房内肿物治愈率或控制率及治愈时间等。结果眼内化学疗法组兔眼前房内肿物治愈率均为100%。前房内肿物消失时间、肿物高度相同而化学疗法剂量不同的各组之间,以及化学疗法剂量相同而肿物高度不同的各组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结膜下注射组及全身注射组兔眼前房内肿物治愈率均为0%,只有不同程度的前房内肿物控制。结论眼内化学疗法与结膜下注射及静脉注射化学疗法相比治愈率较高;眼内化学疗法的效果与肿物的大小及化学疗法时所采用的药物质量浓度有关。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 眼内化学疗法 环磷酰胺 环孢素 前房注射 足叶乙苷
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正常人眼眶脂肪及眼外肌中抵抗素的表达 被引量:2
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作者 刘红霞 吴中耀 +4 位作者 颜建华 杨华胜 毛羽翔 王莉菲 陈智聪 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第3期175-177,共3页
目的了解抵抗素在人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中mRNA及蛋白表达情况。方法RT-PCR法检测人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中抵抗素mRNA的表达情况;免疫组织化学法检测抵抗素蛋白在人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中的表达。结果PCR产物电泳结果示... 目的了解抵抗素在人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中mRNA及蛋白表达情况。方法RT-PCR法检测人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中抵抗素mRNA的表达情况;免疫组织化学法检测抵抗素蛋白在人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中的表达。结果PCR产物电泳结果示抵抗素产物片段约500bp,脂肪组织中含量高于眼外肌组织。抵抗素蛋白表达位于胞浆,免疫组织化学显示人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中有抵抗素蛋白存在。结论在人眼眶脂肪组织及眼外肌组织中可检测到抵抗素mRNA及蛋白的表达,抵抗素可能与眼眶炎性疾病,如Graves眼病、炎性假瘤等有一定的关系。 展开更多
关键词 抵抗素 眼眶脂肪 眼外肌
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眼眶骨纤维异常增生症的多排CT诊断 被引量:2
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作者 陈芳妮 范淼 +1 位作者 罗小梅 毛羽翔 《Eye Science》 CAS 2010年第1期34-37,共4页
目的:探讨多排CT对眼眶骨纤维异常增生症(FD)的诊断价值及临床意义。方法:回顾性分析2002年4月至2009年8月的该院(6例)及中山大学中山眼科中心(12例)收治的18例眼眶FD患的多排CT表现,7例取病变组织经病理证实,5例经手术后病理证实,6例... 目的:探讨多排CT对眼眶骨纤维异常增生症(FD)的诊断价值及临床意义。方法:回顾性分析2002年4月至2009年8月的该院(6例)及中山大学中山眼科中心(12例)收治的18例眼眶FD患的多排CT表现,7例取病变组织经病理证实,5例经手术后病理证实,6例具有典型的CT表现。结果:本组眼眶FD可单发(5例)、单骨多发(1例)或多骨(12例)发病,其中额骨12例,蝶骨5例,筛骨2例,颞骨7例。结论:多排CT能在轴位、冠状位、矢状位上显示本病的病变特征及范围,有助于本病的早期诊断及指导临床制定合理的治疗方案。 展开更多
关键词 眼眶 骨纤维异常增生症 多排探测器 断层摄影术 X线计算机
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人视网膜胶质细胞的原代培养与鉴定方法 被引量:1
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作者 林少芬 毛羽翔 +5 位作者 李斌 张平 郑健樑 罗燕 胡洁 唐仕波 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期17-19,共3页
背景人视网膜胶质细胞在视网膜增生性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功地培养了人视网膜胶质细胞,但方法学有待进一步改进以达到细胞收获量更大的目的。目的建立快速、收获量大且纯度高的视网膜胶质细胞的培养方法,对目标细... 背景人视网膜胶质细胞在视网膜增生性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功地培养了人视网膜胶质细胞,但方法学有待进一步改进以达到细胞收获量更大的目的。目的建立快速、收获量大且纯度高的视网膜胶质细胞的培养方法,对目标细胞的抗原表达特点进行分析。方法取正常人角膜移植供体眼球分离视网膜组织,采用质量分数2%胰蛋白酶和质量分数0.133%胶原酶Ⅵ用二步法消化获取人视网膜胶质细胞,用含质量分数10%胎牛血清的人内皮细胞培养液,其中添加内皮细胞生长因子(β-ECGF)和肝素钠,对分离的细胞进行体外培养,培养皿用纤维黏连蛋白(FN)包被以促进人视网膜胶质细胞贴壁。观察收获的目标细胞的形态特征,采用活体显微镜下形态学观察、常规组织学观察法观察目标细胞的生长,同时采用免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(Vimentin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100、CD34、Ⅷ因子在细胞中的表达以鉴定目标细胞。结果应用胰蛋白酶、胶原酶二步消化法可成功获取人视网膜胶质细胞,原代培养的细胞72h贴壁,第9~10天细胞达到融合状态呈花瓣状;常规组织学观察显示细胞核呈鲜亮蓝色,细胞质(盘膜)呈淡红色,培养细胞GFAP、Vimentin呈强阳性表达,NSE、S100、CD34、Ⅷ因子相关抗原表达呈阴性反应。结论应用胰蛋白酶、胶原蛋白酶消化法以及利用10%胎牛血清的人内皮细胞培养基,添加生长因子和肝素钠,并用FN包被培养皿进行体外培养可达到快速、大量分离和纯化人视网膜胶质细胞的目的,鉴定结果提示培养的目标细胞为人视网膜胶质细胞,其形态与以往报道的有所不同,具体特点尚需进一步研究。 展开更多
关键词 视网膜胶质细胞 细胞培养 鉴定
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Graves’眼病患者眼眶前脂肪细胞抵抗素诱导的表达 被引量:3
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作者 刘红霞 吴中耀 +3 位作者 杨华胜 颜建华 毛羽翔 王莉菲 《眼视光学杂志》 2006年第3期170-172,共3页
目的通过检测抵抗素在Graves’眼病患者眼眶前脂肪细胞培养分化过程中的表达,进一步研究前脂肪细胞的分化过程。方法在体外通过组织块培养法获取前脂肪细胞,前脂肪细胞在分化液的作用下转化为成熟脂肪细胞。利用RT-PCR法检测前脂肪细胞... 目的通过检测抵抗素在Graves’眼病患者眼眶前脂肪细胞培养分化过程中的表达,进一步研究前脂肪细胞的分化过程。方法在体外通过组织块培养法获取前脂肪细胞,前脂肪细胞在分化液的作用下转化为成熟脂肪细胞。利用RT-PCR法检测前脂肪细胞及成熟脂肪细胞中抵抗素mRNA的表达情况,对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞进行免疫组化检测抵抗素蛋白的表达情况。结果前脂肪细胞中无抵抗素mRNA及蛋白的表达。成熟脂肪细胞中有抵抗素mRNA及蛋白的表达。免疫组化结果显示抵抗素蛋白位于成熟脂肪细胞胞浆中。结论Graves’眼病患者眼眶组织中存在功能活跃的前脂肪细胞,能够在体外分化为脂肪细胞。抵抗素是脂肪细胞分泌的一种脂肪细胞因子,仅存在于成熟脂肪细胞中,可作为脂肪细胞分化的标记物。 展开更多
关键词 Graves'眼病 抵抗素 前脂肪细胞 脂肪细胞
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