磁共振3D-pcASL成像技术在急性缺血性脑卒中的应用

目的:评价磁共振三维伪连续动脉自旋标记(3D-pc ASL)灌注成像在急性缺血性脑卒中的应用价值。方法:对39例临床拟诊缺血性脑卒中且发病时间在7 d内患者行常规磁共振弥散加权成像(DWI)及3Dpc ASL成像扫描。观察急性脑梗死病灶在3D-pc ASL与常规DWI影像中的表现,同时测量病灶及对侧镜像区域脑组织的脑血流量(CBF)值。结果:39例脑缺血患者经随诊证实脑梗死34例,TIA 5例。34例脑梗死患者中,21例病灶累及灰质区域,3D-pc ASL表现为低灌注,平均CBF值(16.7±12.2)m L·min-1·100 g-1,较对侧镜像区域脑组织的CBF值[(44.8±13.9)m L·min-1·100 g-1]低(P<0.01);另外13例病灶仅累及白质区域,病灶与白质对比不明显,故未测量CBF值。5例TIA患者中,3例ASL表现为低灌注,平均CBF值(37.6±4.4)m L·min-1·100 g-1,对侧CBF(58.8±10.6)m L·min-1·100 g-1。34例脑梗死患者DWI均表现高信号,3D-pc ASL检出21例(病变均累及灰质),其中17例患者ASL图像显示的病灶范围大于DWI。5例TIA患者DWI图像未见异常信号改变。结论:3D-pc ASL可以对累及灰质区域缺血性卒中的患者提供定位、定性、定量诊断,并能部分检出DWI表现阴性的TIA患者,但对白质区域缺血性病变存在较大的局限性。

兔胫骨骨膜去细胞生物支架制备方案的优化

目的探讨制备兔胫骨骨膜去细胞生物支架的最佳方案。方法取健康新西兰大白兔70只，游离双侧胫骨近端内侧骨膜，共获取骨膜标本140个。用以下三种方案处理骨膜：方案1，物理冻融（-80℃，24h），置入含体积分数2％Triton-X100和3．5×10^-3mol／LPMSF的脱细胞混合液中振荡18h，10g／LSDS溶液中振荡12h，酶消化（DNA酶、RNA酶）；方案2，SDS仅振荡6h，其他同方案1；方案3，改10g／LSDS溶液中振荡12h为0．5mol／LNaCl溶液中振荡12h，其他同方案1。三种方案制备的支架及未处理的新鲜骨膜通过HE、DAPI和基因组DNA定量分析测定细胞结构及DNA含量是否小于评价去细胞的标准浓度50ng／mg；以番红“O”染色、Masson染色和羟脯氨酸测定法定性、定量检测骨膜细胞外基质主要成分（胶原、糖胺聚糖）的保留情况；以扫描电镜观察骨膜去细胞生物支架的表面微结构；以异体皮下包埋实验观察支架的炎细胞浸润等免疫排斥反应及组织重构现象。结果经方案1、2和3处理后，HE染色切片光镜下去细胞支架均无残留细胞，DAPI荧光染色未发现细胞核及核碎片存在，DNA定量检测组织去细胞率均达95％以上且含量均小于50ng／mg。方案3与方案1和2相比，骨膜去细胞支架中主要成分[胶原定量（36．94±0．70）μg／mg]保留更加完整，电镜下观察支架的胶原连续无断裂，胶原纤维排列规整，完整性好；异体皮下包埋后炎细胞浸润较少，免疫排斥反应不明显，并出现支架降解及重构现象。结论应用物理冻融（-80℃，24h）、含体积分数2％Triton-X100和3．5×10^-5mol／LPMSF的脱细胞混合液中振荡18h、0．5mol／LNaCl溶液中振荡12h及酶消化（DNA酶、RNA酶）处理后的骨膜生物支架去细胞更彻底，细胞外基质结构和成分保留更完整，且植入体内后免疫排斥反应小，生物相容性好。