培养模式对重组大肠杆菌高密度培养生产谷胱甘肽的影响

利用生物技术方法生产谷胱甘肽（ＧＳＨ）的研究正方兴未艾。本研究室已对面包酵母生产ＧＳＨ进行了较为深入的研究［１，２］，但距工业化生产尚有一段距离，关键在于高ＧＳＨ含量面包酵母的选育较为困难。近来这一方向的研究重点又转向构建重组大肠杆菌来生产ＧＳＨ。虽...

重组大肠杆菌生产谷胱甘肽发酵条件的研究

研究了重组Ｅ．ｃｏｌｉ产ＧＳＨ的发酵条件，重点考察了添加酵母膏、前体氨基酸和ＡＴＰ的影响。结果发现，前体氨基酸和ＡＴＰ均能促进胞内ＧＳＨ的积累，若在发酵０ｈ和１２ｈ分别加入２０ｇ／ＬＡＴＰ和９ｍｍｏｌ／Ｌ前体氨基酸，则细胞干重和胞内ＧＳＨ含量可分别比对照提高２４％和１４倍。应用正交试验得出的针对细胞干重和ＧＳＨ总量的最佳组合，最大细胞干重和ＧＳＨ总量比原试验中的最好结果分别提高了１０％和２６％。在分析了该菌对葡萄糖利用情况的基础上，对该菌进行了指数流加培养，２５ｈ细胞干重与发酵液内ＧＳＨ总量分别达到８０ｇ／Ｌ和８８０ｍｇ／Ｌ，比摇瓶最好结果分别提高了８３和４６倍。

前体氨基酸和三磷酸腺苷对重组大肠杆菌生产谷胱甘肽的影响

在摇瓶培养中考察了谷胱甘肽的前体氨基酸及三磷酸腺苷对重组大肠杆菌生产谷胱甘肽的影响，发现两者均能显著促进胞内谷胱甘肽的积累。利用正交试验得出了谷胱甘肽产量最大的较优发酵条件组合∶初始ｐＨ６．７；酵母膏８ｇ／Ｌ；混合前体氨基酸５ｍｍｏｌ／Ｌ和三磷酸腺苷２．０ｇ／Ｌ，并进行了实验验证。初步考察了在重组大肠杆菌流加培养中连续流加前体氨基酸、三磷酸腺苷和氨苄青霉素的影响，发现胞内谷胱甘肽含量虽有所提高，但菌体生长却受到明显抑制。