巨大浆膜下子宫肌瘤黏液样变性1例

患者，41岁，因腹胀4年余，加重1周于2012年11月5日入院。平素月经规则，5～7／30天，量中等，无痛经。患者自2007年底自觉下腹胀，集中在脐周，但食欲及消化功能良好；近3年自觉腹围增大，自认为发胖，未重视。1周前腹胀加重，于10月31日就诊于外院普外科，超声检查提示巨大腹腔实质性占位，以腹腔包块性质待查收治入院，盆腔超声检查提示多发性子宫肌瘤，CT检查提示腹腔内巨大团块样软组织影，上至胃窦区水平，下至子宫上方，边缘光滑，其内密度不均，CT值约10～27Hu；

倒L切割法经腹微创子宫肌瘤切除术46例临床体会

目的探讨经腹部微创切除子宫肌瘤的可行性和有效性。方法回顾性分析安徽医科大学第二附属医院2011年6月~2013年6月我院开展的倒L切割法经腹微创切除子宫肌瘤46例的临床资料。结果46例患者均顺利切除子宫肌瘤,切口大小2.5~4cm,肌瘤个数5~19个,最大肌瘤直径4cm^9.5cm,平均手术时间68min,术中平均失血量83ml,术后排气时间26~37h,疼痛反应轻;术后住院天数2~5d,切口均I期愈合,美观,患者满意度良好。结论倒L切割法经腹微创切除子宫肌瘤方法安全可行,只要注意操作技巧,该术式易于掌握,微创且经济,值得在临床应用。

少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN的表达及其与eNOS的相关性研究

目的通过测定少弱精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide syn-thase traffic inducer,NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的表达,探讨其与少弱精子症发病的相关性。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例严重少弱精子症患者(病例组)和7例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN mRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物NO2-/NO3-水平。结果病例组患者睾丸组织中NOSTRIN mRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.73±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增强(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为(48.56±8.49)μmol/L,较正常组(25.37±9.61)μmol/L显著升高(P<0.01);病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01)。结论少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO2-/NO3-水平升高,可能与少弱精子症的发生有着相关性。

孕妇外周血胎儿有核红细胞计数变化及其在不良妊娠结局预测中的应用

目的观察孕妇外周血胎儿有核红细胞计数的变化,探讨其在妊娠不良结局预测中的应用价值。方法收集87例孕12～18周孕妇的外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,采用PE-GPA/FITC-CD71单克隆抗体双色标记胎儿有核红细胞后进行流式细胞分析,追踪妊娠结局并进行分析。结果妊娠结局正常者外周血中胎儿有核红细胞百分比为0.89%±0.81%,妊娠结局不良者为3.25%±2.98%,两者相比,P〈0.05。以胎儿有核红细胞百分比〉3.79%作为截断值,预测妊娠不良结局的敏感度为76.9%、特异度为64.3%。结论与妊娠结局正常的孕妇相比,妊娠结局不良孕妇孕12～18周时外周血胎儿有核红细胞增多;对孕12～18周孕妇外周血胎儿有核红细胞进行计数有助于不良妊娠结局的预测,其敏感度及特异度均较高。

微小RNA-375通过靶向PAX6对宫颈癌HeLa细胞顺铂敏感性的影响

目的探讨微小RNA-375(miR-375)和人类配对盒基因6(PAX6)在宫颈癌顺铂耐药株HeLa cisR中的表达及耐药逆转作用并初步探讨可能机制。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测28例正常宫颈组织、30例宫颈癌组织(14例顺铂敏感和16例顺铂不敏感)和不同顺铂敏感性细胞HeLa、HeLa cisR中miR-375、PAX6 mRNA水平,采用脂质体法向HeLa和HeLa cisR细胞转染含miR-375模拟物(mimics)的寡核苷酸探针(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以不行任何转染的为空白对照组。采用QPCR检测转染后HeLa和HeLa cisR细胞中miR-375和PAX6 mRNA水平,采用MTT法检测不同浓度顺铂(1、3、10、30、100μmol/L)处理后的增殖情况并计算半数抑制浓度(IC_(50))以评价顺铂敏感性,Western blotting检测PAX6蛋白水平,双荧光素酶报告基因试验评价miR-375对PAX6的靶向调控作用。结果宫颈癌组织中的miR-375水平低于正常宫颈组织(0.714±0.341 vs.1.006±0.299),PAX6 mRNA水平高于正常宫颈组织(1.855±0.928 vs.1.011±0.257),miR-375水平与PAX6 mRNA水平呈负相关(r=-0.416,P<0.05)。与化疗敏感组相比,化疗不敏感组的miR-375水平降低,而PAX6 mRNA水平升高(P<0.05)。HeLa cisR细胞的miR-375水平低于HeLa细胞(0.365±0.098 vs.1.032±0.135),而PAX6 mRNA水平高于HeLa细胞(3.154±0.957 vs.1.067±0.168),差异均有统计学意义(P<0.05)。与其余两组相比,过表达组转染后的miR-375水平升高,PAX6蛋白和mRNA水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-375过表达可降低顺铂IC_(50)(P<0.05),先转染miR-375 mimics 24 h后再转染过表达PAX6的pCMV-PAX6质粒后细胞的IC_(50)与未转染细胞的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-375通过靶向PAX6参与了宫颈癌细胞的顺铂耐药,miR-375有望成为逆转宫颈癌顺铂耐药的靶点。

人脐静脉内皮细胞中肿瘤坏死因子-α诱导NOSTRIN基因表达上调的实验研究

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(NOSTRIN)基因表达的诱导作用以及二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对此诱导作用的抑制。方法:将培养的内皮细胞分为3组:第1组为无任何处理的HUVEC,第2组为子痫前期(PE)患者血清作用的HUVEC,第3组为正常晚孕妇女血清作用的HUVEC。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测3组细胞中NOSTRIN mR-NA的表达。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测PE患者和正常孕妇血清中TNF-α含量。用1,3,5ng/ml3种浓度的TNF-α分别作用3组细胞6h,以及用浓度3ng/ml的TNF-α作用3组细胞分别达6h、12h、24h,RT-PCR检测NOSTRIN mRNA的表达;将PDTC(5mmol/ml)与TNF-α(3ng/ml)同时作用以及TNF-α(3ng/ml)单独作用3组细胞6h,RT-PCR检测NOSTRIN基因mRNA的表达。结果:3组细胞中都有NOSTRIN表达,第2组表达量显著高于第1组和第3组(P<0.01)。ELISA结果显示,PE患者血清中TNF-α含量显著高于正常晚孕妇女(P<0.01)。TNF-α作用HUVEC细胞后NOSTRIN显著高表达,呈时间和剂量依赖关系(P<0.01)。PDTC和TNF-α同时作用的HUVEC与TNF-α单独作用的HUVEC相比,其NOSTRIN表达显著降低(P<0.01)。结论:TNF-α可上调NOSTRIN在HUVEC中的表达。

宫颈息肉摘除术后应用保妇康栓的临床疗效分析

目的:观察宫颈息肉摘除术后联合保妇康栓治疗对降低宫颈息肉复发率的疗效。方法:82例病例随机分为两组,研究组41例,对照组41例。研究组患者在宫颈息肉摘除术后于阴道内放置保妇康栓,对照组未放置任何药物。观察两组患者术后宫颈息肉复发情况。结果:研究组术后不良反应明显低于对照组,宫颈息肉复发率明显低于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈息肉摘除术后联合保妇康栓治疗,是提高宫颈息肉治疗效果、预防宫颈息肉复发的较为理想的方法。

腹腔镜监视下宫腔镜子宫纵隔切开术治疗子宫纵隔110例临床分析

目的 探讨宫腹腔镜联合手术治疗纵隔子宫的临床疗效及其应用价值。方法 选取该院2010年1月—2014年1月入院手术治疗的有生育要求的纵隔子宫患者110例,行腹腔镜监视下宫腔镜子宫纵隔切开术,腹腔镜处理同时存在的盆腔疾病,跟踪随访术后妊娠结局。结果 所有病例手术均一次性成功,纵隔切除时间8-25 min,术中出血（20±7）m L,无严重手术并发症发生;术后3个月宫腔镜检查子宫形态均接近正常;随访时间12-60个月,90例在术后获妊娠1-4次,其中足月产80例,流产41例,早产6例,妊娠率82%。结论 宫腹腔镜联合手术是治疗纵隔子宫最安全、最有效的方法,也是治疗纵隔子宫合并盆腔病变的首选方法,可提高患者妊娠率及改善生育结局。

氨肽酶N干扰腺病毒感染的子宫内膜间质细胞子宫内膜容受性因子表达情况观察

目的观察氨肽酶N(ANPEP)干扰腺病毒感染人类子宫内膜间质细胞(hmESCs)后,细胞中子宫内膜容受性(ER)相关因子的表达变化。方法用刮匙轻刮取得正常妇女子宫腔内膜组织,分离培养hmESCs。将细胞分为干扰组和空载病毒组,分别加入ANPEP干扰腺病毒和空载腺病毒。感染48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测两组ANPEPmRNA以及ER相关因子同源框基因A10(HOXA10)、整合素β3、白血病抑制因子(LIF)、白细胞介素1(IL-1)mRNA表达。结果与空载病毒组比较,干扰组ANPEPmRNA表达下调,HOXA10、整合素β3、LIFmRNA表达下降(P均<0.05),IL-1 mRNA表达无明显变化(P>0.05)。结论干扰hmESCs中ANPEP表达可影响ER因子表达,这可能是ANPEP参与调节ER的机制之一。

不同拮抗剂在PCOS不孕症患者IVF/ICSI-ET拮抗剂方案助孕中的疗效

目的:比较多囊卵巢综合症(PCOS)不孕患者在拮抗剂(GnRH-ant)方案体外受精胚胎移植(IVF/ICSI-ET)周期中使用不同拮抗剂药物的临床疗效。方法:回顾分析安徽省立医院生殖中心年龄≤35岁的应用GnRH-ant方案助孕的PCOS不孕患者182周期相关资料,根据使用GnRH-ant的药物不同分为西曲瑞克组115周期和国产仿制药加尼瑞克组67周期,比较两组患者基本资料、促排卵过程及临床妊娠结局。结果:国产仿制药加尼瑞克组优胚率、囊胚形成率高于西曲瑞克组(P<0.05)。两组患者基本资料、其他促排卵过程及助孕结局相关指标差异均无统计学意义(P>0.05)。在进行鲜胚移植Day3分裂胚(D3)的43个周期中,两组种植率、临床妊娠率、多胎妊娠率、早期流产率、活产率差异均无统计学意义(P>0.05)。西曲瑞克与国产仿制药加尼瑞克在PCOS伴胰岛素抵抗患者中促排卵过程及助孕结局差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在拮抗剂方案中使用国产仿制药加尼瑞克与西曲瑞克具有相似临床效果,HCG日LH升高发生率无显著差异,国产仿制药加尼瑞克组优胚率和囊胚形成率略高于西曲瑞克组,但两组均获得良好的临床妊娠结局。

利用母血中胎儿有核红细胞结合血清筛查和三维超声无创性产前诊断唐氏综合征

目的:利用母外周血中胎儿有核红细胞结合血清三联筛查及三维超声,建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式。方法:早、中期孕妇共670例,采取血清三联筛查结合三维超声和病史选取唐氏高危孕妇,抽取高危孕妇的外周血,流式细胞术富集母血中的胎儿有核红细胞(Fetal Nucleated Red Blood Cells,FNRBCs);次日进行多重引物原位杂交(muti-primed in situ labeling,multi-PRINS)检测胎儿细胞21号染色体与Y染色体。结果:通过血清三联筛查和三维超声结合病史筛选出高危孕妇24例,高危孕妇在两日内即可确诊,24例中诊断23例染色体正常胎儿,包括男胎12例、女胎11例;诊断1例男性唐氏综合征胎儿。24例标本检测结果和实际胎儿核型符合。结论:血清三联筛查、超声检查结合病史筛选出高危孕妇,然后利用母血中胎儿有核红细胞进行多重引物原位杂交检测细胞染色体,可作为快速、无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式,并可为其他胎儿染色体基因异常或者宫内感染的无创性产前诊断提供参考。

输注胰岛抗原特异性Treg细胞延长同系NOD小鼠移植胰岛的存活时间

目的探讨输注胰岛抗原特异性调节性T淋巴细胞（Treg细胞）对非肥胖糖尿病（NOD）小鼠同系胰岛移植物存活时间的影响。方法n以未成熟树突状细胞（imDc）联合谷氨酸脱羧酶一65在体外诱导童贞T淋巴细胞分化成胰岛抗原特异性Treg细胞。以已发生糖尿病的NOD小鼠为受者，将分离得到的尚未进展为糖尿病的NOD小鼠的胰岛（500胰岛当量）移植至受者的肾包膜下，对照组不行移植，只观察血糖变化；单纯胰岛移植组只进行胰岛移植，不输注胰岛抗原特异性Treg细胞；实验组于术前1d静脉输注1×10^6个胰岛抗原特异性Treg细胞，然后进行胰岛移植。术后检测受者的血糖，以判断移植胰岛的存活时间，观察胰岛移植物的病理学变化。结果对照组血糖持续高于11．1m01／L；单纯胰岛移植组小鼠的血糖于术后1～2d降至正常，到7～17d时开始陆续升高，并维持在术前水平，移植物存活时间为（12．2±2．6）d；实验组小鼠的血糖于术后1～2d降至正常，至第27天开始有小鼠血糖升高超过11．1mmol／L第43天时，所有小鼠的血糖均超过11．1mmol／L，移植物的存活时间为（35．2±4．3）d，明显长于单纯胰岛移植组（P〈0．01）。单纯胰岛移植组的移植胰岛有明显的淋巴细胞浸润，并伴有胰岛细胞严重破坏，胰岛素染色未见完整的胰岛存在，仅有极少量残存的分泌胰岛素的胰岛细胞；实验组第15天时移植胰岛形态完整，仅有少量淋巴细胞浸润，分泌胰岛素的胰岛大量存在。结论体外诱导产生的胰岛抗原特异性Treg细胞可以延缓自身免疫系统对移植胰岛的破坏，明显延长NOD小鼠移植胰岛的存活时间。

快速无创性产前诊断唐氏综合征的初步研究

目的建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效诊断模式。方法从98名孕妇中筛选出12名高度怀疑唐氏妊娠者,当日流式细胞术分选母血中的胎儿有核红细胞(Fetal nucleated red blood cells,FNRBCs),制备滴片后,次日进行多重引物原位杂交(muti-primed in situ labeling,multi-PRINS)检测胎儿细胞21号、Y染色体。结果均可在两日内得到诊断结论 ,诊断10例正常胎儿和两例男性唐氏综合征胎儿,与实际胎儿核型完全一致。结论流式分选母血中胎儿有核红细胞后多重PRINS技术检测细胞染色体可作为快速无创性产前诊断的有效模式,并可为其他非整倍体异常和单基因病的快速无创性产前诊断提供有效参考。