高效液相色谱-质谱联用法研究丹酚酸B的大鼠小肠吸收

目的使用高效液相色谱-质谱联用技术,研究丹酚酸B的大鼠小肠吸收。方法分别在大鼠外翻空肠中加入丹酚酸B溶液和丹参提取液,比较两种给药方式丹酚酸B的吸收,同时观察加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米后对丹酚酸B吸收的影响。结果丹酚酸B在单体形式下吸收较好,维拉帕米对丹酚酸B的吸收未见显著影响。结论丹参提取液中的其他成分抑制了丹酚酸B的吸收,丹酚酸B不是P-糖蛋白的底物。

高效液相色谱-质谱联用法研究芍药苷的大鼠小肠吸收

目的 研究芍药苷的大鼠小肠吸收,探讨芍药苷的吸收机制及其影响因素。方法使用高效液相色谱-质谱联用技术,采用肠外翻模型,测定不同质量浓度芍药苷溶液在大鼠空肠和回肠的吸收,同时观察加入聚山梨醇酯-80和P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对芍药苷吸收的影响。结果在20-120mg·L^-1内,芍药苷吸收未饱和,呈线性吸收,在低质量浓度下空肠与回肠吸收速率无明显差异,中、高质量浓度时回肠吸收速率要高于空肠,2g·L^-1的聚山梨醇-80对空肠吸收有促进作用,维拉帕米对芍药苷吸收有显著促进作用。结论芍药苷在小肠外翻模型中吸收遵循一级动力学,芍药苷在不同肠段的吸收有差异,芍药苷是P-糖蛋白的底物,聚山梨醇-80有利于提高芍药苷的吸收。

HPLC测定双丹颗粒中丹酚酸B和芍药苷的含量

目的：建立双丹颗粒中丹酚酸B和芍药苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法，Zorbax SB-C18色谱柱，流动相A0．05％的磷酸水溶液，B含0．05％磷酸的4％乙腈甲醇溶液，梯度洗脱，流速1mL·min^-1，柱温25℃，检测波长230nm。结果：丹酚酸B在0．710～22．7μg（r=0．9999），芍药苷在0．103～3．30μg（r=0．9999）有良好的线性关系，测定了3个批次双丹颗粒中丹酚酸B和芍药苷的含量，其中丹酚酸B的含量范围为6．46～11．6mg·g^-1，芍药苷的含量范围为1．44～1．78mg·g^-1。结论：该方法准确度好、重复性好、稳定可靠，可以作为双丹颗粒质量控制的方法。

大肠杆菌T蛋白PDH结构域的高效表达纯化与活性测定

目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料。方法利用pGEX高效融合表达系统将PDH与谷光甘肽疏基转移酶(GST)编码序列在表达宿主BL21实现高效表达,并利用对GST具有亲和作用的GlutathioneSepharose4B琼脂糖珠进行亲和层析以对其分离纯化。结果表达产物达菌体总蛋白的40%,可溶性目的产物得量为240mg·L-1,利用亲和层析法纯化后纯度达92.5%,GSTPDH融合蛋白的PDH的比活为38U·mg-1。结论本法成功构建高效表达PDH菌株,表达量高,纯化度高,GSTPDH酶活性正常,为进一步研究奠定基础。

RP-HPLC法测定气滞胃痛颗粒中4种成分的含量

目的：建立同时测定气滞胃痛颗粒中白芍药苷、芍药苷、柚皮苷和甘草酸含量的高效液相色谱法。方法：采用Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30 ℃；流动相为水（0.2%醋酸）-乙腈（0.2%醋酸），线性梯度洗脱，流速为1.0 mL·min-1；检测波长为230 nm（0-15 min），284 nm（15-20 min），254 nm（20-35 min）。结果：白芍药苷、芍药苷、柚皮苷、甘草酸浓度分别在15.1-226 μg·mL-1（r=0.9998），25.6-383 μg·mL-1（r=0.9998），27.7-277 μg·mL-1（r=0.9998），9.43-47.2 μg·mL-1（r=0.9998）范围内线性关系良好。低、中、高3个浓度的平均加样回收率分别为97.4%-101%（RSD为0.8%-1.7%），96.8%-99.7%（RSD为1.4%-2.6%），97.3%-100%（RSD为1.9%-2.4%）。结论：本方法简便、准确，重复性好，可以为气滞胃痛颗粒的质量控制提供依据。

枳壳提取物的制备工艺研究

目的:研究枳壳提取物的工艺。方法:以柚皮苷为指标,考察了提取条件、树脂类型选择,并优化了径高比、上样量、上样流速,洗脱溶媒的浓度、用量及速度,树脂重复使用次数等。结果:提取条件pH 11的NaOH溶液作为提取溶媒,提取3次,每次1 h;选择D101型大孔吸附树脂,上样量为树脂质量-生药1∶0.8,上样流速2 BV.h-1,4倍柱体积的50%乙醇洗脱。结论:本工艺所得提纯物中柚皮苷含量能达到30%以上,简单易行。