胞内钙与蛋白激酶C对人脐静脉内皮细胞组织因子途径抑制物及组织因子表达的影响

为探讨细胞内钙及蛋白激酶C在血管内皮细胞释放组织因子（TF），组织因子途径抑制物（TFPI）中的作用，本文采用钙离子载入剂A23187与蛋白激酶C激动剂佛波脂（PMA）刺激原代培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC），观察各实验组内皮细胞冻融液中TF活性及条件培养液中TFPI活性的变化，以一期凝固法测TF活性，二期生色法测定TFPI活性。结果显示：A23187，PMA及A23187＋PMA组TF活性较对照明显升高（P＜0.001），三组中A23187和A23187＋PMA组活性明显低于PMA组（P＜0．05），但前两组间无显著性差异（P＞0．05）；A23187组TFPI活性与对照无明显差别，但PMA与A23187＋PMA组TFPI活性较对照及A23187组明显升高（P＜0.01）。结果提示：细胞内钙升高及PKC激活促进血管内皮细胞TF的合成，以PKC为强；PKC促进血管内皮细胞释放TFPI，而钙对此无明显作用。

组织因子途径抑制物

组织因子途径抑制物（ＴＥＰＩ）是一种新发现的依赖Ｘａ的Ⅶａ／组织因子复合物的抑制物，属Ｋｕｎｉｔｚ－类型丝氨酸蛋白酶抑制物家族成员。本文就ＴＥＰＩ的组成、结构、基因定位、合成、代谢、分布以及ＴＥＰＩ的作用机理、生理及病理意义等作一评述。

网络资源在生理学教学中的应用

应用Internet 为媒介进行教学活动,是对所有从事生理学教学与科研工作的人员改进知识结构,提高教学效果的一项非常重要的手段,结合几个重要网站,介绍了在生理学教学中使用网络资源及注意事项来促进生理学的教与学.

异氟醚可能通过ERK磷酸化增强肾动脉平滑肌收缩

目的实验观察异氟醚对去内皮肾动脉血管平滑肌收缩增强的作用,并观察肾动脉血管平滑肌细胞在异氟醚的作用下细胞内MAPK通路的激活状态,以探讨异氟醚引发肾动脉血管平滑肌收缩增强的可能信号通路。方法①去内皮肾动脉条,3%皂苷处理使膜通透,咖啡因诱除内质网内贮钙,利用10-6钙离子浓度EGTA缓冲液平衡后,应用接近最大的钙离子浓度的EGTA缓冲液使肾动脉条压缩达平衡,加入不同浓度异氟醚EGTA缓冲溶液,观察动脉条张力变化。②1%、3%、5%异氟醚分别作用于培养的肾动脉血管平滑肌细胞,提取细胞内蛋白,Westenblot检测ERK磷酸化的变化。结果异氟醚能使压缩达平衡的肾动脉环张力进一步增强,且与异氟醚浓度呈剂量依赖性。随异氟醚浓度的增加,培养的肾动脉血管平滑肌细胞内ERK1/2(p44/42)磷酸化逐步增强,并随时间增强,在15min后,逐渐下降。

补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO,vWF,TFPI及表达组织因子的影响

目的 :观察补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO ,vWF ,TFPI和表达TF的影响。方法 :对传代培养的新生牛主动脉内皮细胞 (4～ 8代 )分别给予不同处理 ,取上清液测NO ,vWF ,TFPI;取细胞冻融液测定TF活性。结果 :①凝血酶促进血管内皮细胞表达TF ,较对照组明显增高 (12 .86± 2 .4 3vs 4 .6 9± 0 .83,P<0 .0 1) ,呈剂量依赖性 (r =0 .985 ,P <0 .0 1,0～ 2 0U·ml- 1 ) ,并促进vWF的释放 (18.4 3± 3.2 0vs6 .4 2± 2 .84 ,P <0 .0 1) ,补阳还五汤则抑制TF表达和vWF的释放 (P <0 .0 1) ;②补阳还五汤促进血管内皮细胞释放NO ,较对照组明显升高 (5 .93± 0 .94vs 1.6 3± 0 .2 7,P <0 .0 1) ;③凝血酶能抑制血管内皮释放TFPI (0 .6 2± 0 .38vs 2 .6 4± 0 .93,P <0 .0 1) ,补阳还五汤对凝血酶的这种抑制作用没有明显的影响。结论 :补阳还五汤能抑制凝血酶诱导血管内皮细胞表达TF和释放vWF ,促进血管内皮细胞表达NO。

地昔帕明对小鼠内毒素急性肺损伤的影响

目的探讨地昔帕明(DP)对脂多糖(LPS)引起的急性肺损伤的作用并初步探讨其作用机制。方法昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、地昔帕明对照组(DP组)、模型组(LPS组)及地昔帕明处理组(DP+LPS组)。腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型。造模6h后测定肺湿/干重比值(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数和蛋白含量、肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)水平,同时用ELISA法检测肺匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果LPS可提高小鼠肺W/D、BALF中白细胞数和蛋白含量、肺匀浆MPO活性、MDA和TNF-α含量(P<0.01),DP处理组可有效减轻LPS所引起的上述变化(P<0.05)。结论DP对LPS导致的小鼠急性肺损伤有保护作用,其保护机制可能与抑制肺TNF-α的产生,进而减轻中性粒细胞的肺部扣押和肺组织脂质过氧化损伤的程度有关。

补阳还五汤抗家兔动脉粥样硬化形成及机制

为了观察补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用及机制 ,给予家兔高脂饮食和补阳还五汤 ,用组织学方法观察动脉壁病理形态学改变 ,并测定血清中总胆固醇、甘油三酯、内皮素、一氧化氮及FⅦ促凝活性水平。结果显示 ,与高脂组相比 ,补阳还五汤组血清总胆固醇和甘油三酯明显降低 (P <0 .0 1) ;血浆FⅦ促凝活性和一氧化氮水平明显降低 (P <0 .0 1) ;主动脉、腹主动脉和冠状动脉粥样斑块面积显著减少 (P <0 .0 1)。提示补阳还五汤具有抗动脉粥样硬化形成的作用 。

四种常用的人中性粒细胞分离方法的比较

目的:比较Percoll非连续密度梯度离心法、Ficoll-Hypaque密度梯度离心法、裂解红细胞法和Dextran作用下红细胞自然沉降法四种常用的人中性粒细胞分离方法。方法:取健康人外周静脉血,分别采用以上四种方法进行中性粒细胞分离,对其细胞纯度、回收率、存活率进行比较。结果:Percoll非连续密度梯度离心法与Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离得到的细胞纯度均大于90%,两者间比较无统计学差异(P>0.05);裂解红细胞法和Dextran作用下红细胞自然沉降法分离得到的细胞纯度略低于Percoll非连续密度梯度离心法(P<0.01)与Ficoll-Hypaque密度梯度离心法(P<0.05)。Dextran作用下红细胞自然沉降法的回收率低于Percoll非连续密度梯度离心法(P<0.01)、Ficoll-Hypaque密度梯度离心法(P<0.01)和裂解红细胞法(P<0.05);Percoll非连续密度梯度离心法回收的中性粒细胞存活率明显高于Ficoll-Hypaque密度梯度离心法(P<0.05),裂解红细胞法(P<0.01)和Dextran作用下红细胞自然沉降法(P<0.01)。结论:Percoll非连续密度梯度离心法分离中性粒细胞,纯化程度好,回收率高,是一种简单、高效的中性粒细胞分离方法,适于临床和科研中广泛应用。

NMDA受体阻断剂美金刚胺对小鼠内毒素急性肺损伤的保护作用

目的:探讨NMDA受体阻断剂美金刚胺对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:健康成年雄性昆明小鼠随机分为正常组、美金刚胺组、ALI组和美金刚胺+ALI组。腹腔注射美金刚胺(10 mg/kg)30 min后腹腔注射LPS(10 mg/kg)制作ALI小鼠模型。各组小鼠处理后6 h测定全肺测定湿/干重比值;采用苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变,采用比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)含量;采用ELISA法检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:美金刚胺预处理可降低LPS诱导的ALI小鼠肺湿/干重比值,减轻其肺组织病理学改变,减少肺组织中MPO和MDA的含量,同时可降低BALF中TNF-α含量以及LDH活性(均P<0.05)。结论:采用美金刚胺阻断NMDA受体可减轻LPS诱导的小鼠ALI,为临床治疗ALI提供了新思路。

细胞电生理虚拟仿真实验的设计与实现

细胞生物电形成机制相关实验在本科教学中难于真实实现。本项目基于实际科学研究的数据,利用虚拟仿真技术,创立虚拟电压钳,在虚拟细胞上完成RP、AP的测定及影响因素分析、Hodgkin电压钳模拟实验3个独立但又层层递进、相互联系的实验。为医学与生物医学相关专业学生学习、理解细胞电生理机制提供了成功的实验范例。

国产抗凝血酶Ⅲ对实验性静脉血栓形成的预防作用观察

目的:观察国产抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)对家兔静脉血栓形成的预防作用。方法:家兔随机分为生理盐水对照组和AT-Ⅲ不同剂量组,以下腔静脉结扎法制备血栓模型,6小时后测形成的血栓长度、湿重和干重。结果:生理盐水对照组下腔静脉内形成的血栓长度为10.20±1.69 mm,湿重为41.43±5.09 mg.干重为10.20±1.69mm;小剂量AT-Ⅲ对静脉血栓形成并无明显作用;但随着AT-Ⅲ剂量的增大,静脉内形成的血栓长度逐渐缩短,血栓湿重与干重逐渐减轻,量-效关系明显(r值分别为-0.957、-0.978和-0.992,P<0.01)。结论:大剂量AT-Ⅲ具有较好的预防静脉血栓形成的作用。

基于ESP系统急性心肌梗塞仿真实验的设计与实现

以临床常见的急性心肌梗塞为主导方向,从临床病例中采集可用于多途径分析的有价值的信息,进行数字化处理与3D建模,利用虚拟现实(VR)技术构建虚拟场景,建立心梗及相关的发生机制学习系统,设立分析反馈评价模块,研发出一个医学机理分析与临床诊治相融合的虚拟仿真实验项目。

抗凝血酶Ⅲ对实验性弥散性血管内凝血防治疗效的观察

目的:观察抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)对家兔弥散性血管内凝血(DIC)的预防和治疗作用。方法:以脂多糖(LPS)和组织凝血活酶静注形成DIC。分别测定纤维蛋白原浓度、凝血酶原时间(PT)、3P试验、血小板计数、谷草转氨酶(ASF)、肌酸磷酸激酶(CK)。结果:AT-Ⅲ对LPS及组织凝血活酶所致的DIC均有防治作用,表现为血小板计数与纤维蛋白原浓度降低程度明显减弱,PT改变与对照组几无差异,3P试验强阳性程度减小,病理切片显示高浓度AT-Ⅲ组心、肝、肺、肾等脏器的炎症反应及病理性损害明显减轻。结论:AT-Ⅲ对LPS和组织凝血活酶所致DIC具有一定的防治作用。

MTT法检测博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞增殖的影响

目的：观察不同浓度和时间的博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞（NIH3T3细胞）增殖的影响。方法：取对数生长期的NIH3T3细胞,用10%胎牛血清培养制成的细胞悬液加入96孔培养板中培养。以NIH3T3细胞为观察对象,分别给予不同浓度（0.1~10 000 mU/mL）博莱霉素处理,于给药后12 h、36 h、48 h后采用4-甲偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖。结果：与空白对照组比较,1~10 mU/mL浓度的博莱霉素,可促进NIH3T3细胞增殖（P〈0.05）。其余浓度博莱霉素对细胞增殖无影响。结论：1~10mU/mL浓度的博莱霉素能够促进NIH3T3细胞的增殖。

国家级实验教学示范中心示范辐射方式的探索和研究

探索一种可供推广和切实可行的示范辐射可测量性的评价依据,并以"学术思想和教学理念辐射、教学素材和教学方法辐射、教学场地、技术、设备区域共享"等方式积极发挥示范辐射作用。使优质实验教学资源共享,发挥更大的社会效益。

枣杞合剂拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的效应观察

目的 观察枣杞合剂对小鼠是否具有拮抗环磷酰胺毒副作用的效应 ,为临床提供有效的化疗辅助药物。方法 对小鼠行大剂量环磷酰胺 (CY)腹腔注射 ,并用枣杞合剂灌胃预防 ,以观察枣杞合剂对CY毒副作用的影响。结果 注射CY后 ,CY组小鼠外周血中红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白计数明显降低 ,碳粒清除率明显下降 ,至实验第 1 8d全部死亡 ;而枣杞合剂能明显延长小鼠的存活时间 ,增加单核 -吞噬细胞系统的碳粒廓清率 ,升高外周血中红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白计数 ,与CY组相比 ,P <0 .0 1。

IL-10与急性肺损伤

肺损伤是临床常见的一种炎症损伤,主要表现为促炎-抗炎因素失衡导致的炎症反应的发生与发展。而IL-10被认为是体内主要的抗炎细胞因子,能够抑制多种细胞炎症介质的生成而减轻炎症反应,对炎症反应的调控起重要作用。本文就IL-10与肺损伤的关系作一综述。

肝脏疾病患者血浆未γ-羧基化蛋白C水平及其临床意义

目的 观察肝脏疾病患者血浆未 γ-羧基化蛋白 C(DCPC)水平及蛋白 C活性 (PC:C)、抗原 (PC:Ag)含量的变化 ,探讨血浆未 γ-羧基化蛋白 C和蛋白 C活性、抗原的检测对肝脏疾病的临床意义。 方法 PC:C测定采用发色底物法 ;PC:Ag采用 EL ISA法 ;DCPC亦采用 EL ISA法检测。 结果 与正常对照组相比 :1肝癌 (原发性 )、肝硬化患者血浆 PC:C和 PC:Ag均明显降低 (P<0 .0 5 ,) ;急性黄疸型乙型肝炎患者血浆 PC:Ag含量降低 (P<0 .0 1) ,而 PC:C的差异无显著意义 (P>0 .0 5 )。 2 DCPC水平在肝癌组明显升高 (P<0 .0 5 ) ,大于总 PC:Ag的 5 0 % ;而急性黄疸型乙型肝炎组 DCPC差异无显著意义 (P>0 .0 5 )。 结论 1)肝癌、肝硬化患者血浆 PC:C、PC:Ag水平均降低。 2 )由于高水平的DCPC。

“金教鞭”教学质量评价工程体系的构建与实践

教师授课的好坏是决定教学质量高低的关键性指标。“金教鞭”工程就是基于授课质量评估,将好的教学方法、教学艺术进行示范性传授,以培养年轻教师的手段。文章旨在探索一种以学生受益效果为主要指标的授课质量监管评价体系,以促进教学质量提高。

脂多糖对RAW264.7细胞IL-10分泌及mRNA表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对RAW264.7细胞白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)分泌及mRNA表达的影响。方法采用体外培养巨噬细胞株RAW264.7细胞,实验分为正常对照组、LPS组。采用ELISA法、逆转录PCR(RT-PCR)技术检测IL-10分泌及mRNA表达的变化。结果 LPS刺激RAW264.7细胞后IL-10的分泌及mRNA表达较对照组增加(P<0.05),并具有时间依赖性。结论 LPS可刺激RAW264.7细胞IL-10分泌及mRNA表达的增加。