正确认识儿童注意缺陷多动障碍

儿童注意缺陷多动障碍(AD-HD)是最常见的儿童精神行为障碍性疾病,约65%的ADHD的症状会持续到成年,患儿在成年后发展为人格障碍、犯罪行为和酗酒、吸毒风险是正常儿童的5~10倍。ADHD患者的学业和职业成就都远远落后于正常儿童。目前对ADHD的病因和发病机理尚未完全清楚,归纳起来主要有以下几点.

miR-155表达与FLT3-ITD^(+)急性髓系白血病细胞系药物敏感性的关系及机制研究

目的:研究miR-155的表达与FLT3-ITD^(+)急性髓系白血病细胞系药物敏感性的关系及潜在的调控机制。方法:通过CRISPR/Cas9基因编辑工具在FLT3-ITD^(+)AML细胞系MV411中实现miR-155编码基因敲除,筛选单克隆细胞,PCR及Sanger测序鉴定单克隆细胞的基因型,实时荧光定量逆转录PCR鉴定成熟miRNA的表达水平。MTT法计算半数抑制率,比较MV411细胞对多柔比星、奎扎替尼以及米哚妥林的药物敏感性。转录组测序分析miR-155敲除后MV411细胞mRNA水平的变化,基因集富集分析获得miR-155敲除后的信号通路的变化水平,Western blot验证信号通路关键分子的表达。结果:通过PCR初筛和Sanger测序获得了4个基因敲除的杂合子和1个基因插入的杂合子。实时荧光定量逆转录PCR结果显示,这些单克隆细胞中成熟miR-155的表达显著低于野生型克隆。MTT结果显示,与野生型相比,miR-155基因敲除后MV411细胞对多种抗FLT3-ITD^(+)AML的药物敏感性有了显著增加。RNA测序显示miR-155敲除后mTOR信号通路和Wnt信号通路受到抑制。Western blot结果显示,信号通路关键分子p-mTOR、Wnt5α、β-catenin的表达下调。结论:miR-155敲除后能显著提升MV411细胞对多柔比星、奎扎替尼和米哚妥林的药物敏感性,这与包括mTOR及Wnt信号通路在内的多条信号通路的抑制有关。

混合教学方法联合同伴互助学习在临床操作技能规范化培训中的应用

目的:探讨混合教学方法联合同伴互助学习在临床操作技能规范化培训中的应用效果。方法:选取本院84名住培医师作为研究对象,随机抽签分成试验组和对照组,每组各42人。对照组接受传统教学方法,试验组接受混合教学方法联合同伴互助学习,比较两组教学成绩及教学反馈。结果:试验组理论考试、技能操作考试成绩均高于对照组(P<0.05),且试验组对教学方法的评价高于对照组(P<0.05)。结论:混合教学方法联合同伴互助学习是一种可行、有效的教学方法,取得较好教学效果,适合在住院医师规范化培训中推广。

宫内感染致脑损伤对仔鼠认知发育和海马神经发生的影响

目的:探讨宫内感染致仔鼠脑损伤后对认知发育和海马神经发生的影响。方法:15只SpragueDawley孕鼠(孕15 d)按随机数字表法分为造模组(8只)和对照组(7只)。繁殖后的2组雄性仔鼠按随机数字表法分为宫内感染组(35只)和对照组(35只),进行大脑解剖学观察、神经细胞凋亡检测、Morris水迷宫实验、神经细胞增殖及存活分析。结果:(1)宫内感染组仔鼠大脑较对照组萎缩,TUNEL阳性细胞数和caspase-3阳性细胞数均较对照组显著增加(P<0.05)。(2)宫内感染组仔鼠近期记忆及远期记忆保持能力均较对照组降低,潜伏期显著延长(P<0.05)。(3)细胞增殖分析显示宫内感染组3、7和14日龄仔鼠Brd U阳性细胞数较对照组显著增加(P<0.05);细胞存活分析显示,28日龄的2组仔鼠Brd U阳性细胞数无显著差异(P>0.05)。结论:宫内感染可致仔鼠脑损伤,海马神经细胞凋亡可能与认知发育障碍密切相关。宫内感染诱导的神经发生可能与脑损伤后神经自身修复有关。

快速眼动睡眠剥夺后大鼠海马CB1受体表达及病理变化

目的:探讨不同时间的快速眼动(REM)睡眠剥夺对大鼠海马大麻素CB1受体表达的影响及其意义,并观察海马的结构改变。方法:42只Sprague-D aw ley大鼠随机分为睡眠剥夺组、环境对照组和空白对照组。其中睡眠剥夺组和环境对照组又分为1 d、3 d和5 d 3个时点,用改良多平台睡眠剥夺法建立REM睡眠剥夺模型。应用RT-PCR方法检测大麻素CB1受体mRNA表达,并观察海马的病理变化。结果:睡眠剥夺1 d组CB1受体mRNA表达较空白对照组、环境对照组、睡眠剥夺3 d及5 d组显著升高(P<0.05),而睡眠剥夺3 d组较睡眠剥夺1 d及5 d组显著降低(P<0.05),睡眠剥夺5 d组较睡眠剥夺3 d组显著升高(P<0.05)。光镜与电镜观察显示睡眠剥夺1 d组神经元轻度固缩,染色质轻度边聚,睡眠剥夺3 d及5 d组有神经元凋亡。结论:REM睡眠剥夺可导致海马神经元凋亡;睡眠剥夺早期CB1受体表达反应性增高而后降低,至晚期出现一定程度恢复。

癫癎诱发后CB1受体在睡眠剥夺大鼠海马表达的研究

目的探讨癫癎诱发后大麻素CB1受体在睡眠剥夺大鼠海马的表达变化及其意义。方法50只Sprague-Dawley大鼠随机分为癫癎诱发前和癫疴诱发后2组,每组25只。每组大鼠又随机分为空白对照组(CC),环境对照组(TC)和睡眠剥夺1 d、3 d、5 d组(SD1d、SD3d、SD5d)。用改良多平台睡眠剥夺法建立快速眼球运动(REM)睡眠剥夺模型,戊四氮诱发癫癎。应用RT-PCR方法检测癫癎诱发前后大麻素CB1受体mRNA表达,并电镜观察其海马的超微结构改变。结果SD1d组神经元轻度固缩,染色质轻度边聚,SD3d组神经元凋亡,SD5d组超微结构改变基本同SD3d组。癫癎诱发后发现CC组与TC组大鼠无抽搐,CB1受体tuRNA表达较癫癎诱发前明显升高(P<0．01)。SD1d、SD3d、SD5d组大鼠抽搐严重,CB1受体mRNA表达与癫癎诱发前相比差异无统计学意义(P>0．05)。结论睡眠剥夺能够造成神经元凋亡,影响大麻素CB1受体mRNA表达。大麻素CB1受体表达增高可能是一种自身稳定调节的保护机制,能抑制癫癎发作。

隐球菌性脑膜炎预后的相关因素

目的探讨影响隐球菌性脑膜炎预后的相关因素.方法对1986～2004年确诊为隐球菌性脑膜炎13例患儿进行回顾性分析.结果在疗效成功的8例中,两性霉素B(Amp B)联用氟胞嘧啶(5-FC)和(或)氟康唑治疗效果肯定,其中6例联合鞘内注射给药,1例经Ommaya囊侧脑室放液给药术.5例死亡,影响预后的因素主要有诊断延误,病情进展快,早期未合理使用抗真菌药物,未及时鞘注和施行Ommaya囊侧脑室放液给药术.结论早期诊断,早期合理使用抗真菌药物,早期采用鞘内注射给药和经Ommaya囊侧脑室放液给药,可显著改善本病预后.

浙江省儿科住院医师规范化培训效果评价

目的:评价浙江省儿科住培效果。方法:以2015年—2020年本院住培学生为研究对象,对考核成绩及问卷调查进行分析。结果:学生年度考核均合格,在医学知识、医患沟通技能方面显著提高,文献阅读及文章撰写能力有待提升。结论:本院住培基地培训效果总体满意,在教学、科研培训方面应进一步完善。

孟鲁司特钠联合糠酸莫米松鼻喷雾剂治疗过敏性鼻炎的疗效观察

目的:探讨孟鲁司特钠与糠酸莫米松联合治疗过敏性鼻炎患儿的临床疗效及其安全性。方法:过敏性鼻炎门诊患儿91例随机分为观察组46例和对照组45例。对照组采用糠酸莫米松喷雾剂治疗,观察组在对照组基础上加用孟鲁司特钠治疗。两组疗程均为2周。比较两组患儿治疗前后鼻塞、喷嚏、鼻痒、流涕等症状积分,以及血清IL-4、IL-12、Ig E水平变化;评价两组疗效及药品不良反应。结果:观察组总有效率为93.48%,高于对照组的75.56%(P<0.05)。治疗后,两组鼻塞、喷嚏、鼻痒、流涕积分均较治疗前降低(P<0.05);且观察组各项症状积分均低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患儿血清IL-4、Ig E水平较治疗前降低,IL-12水平较前增加(P<0.05);观察组患儿上述指标明显优于对照组(P<0.05)。两组患儿均未发生药品不良反应。结论:孟鲁司特钠联合糠酸莫米松喷雾剂治疗过敏性鼻炎疗效显著,安全性好。

13例早发型腓骨肌萎缩症的基因分型研究

目的探讨早发型腓骨肌萎缩症(CMT)的临床特征及遗传变异分析.方法以临床诊断为早发型CMT的患儿为研究对象,收集相关临床资料,进行肌电图及CMT相关基因检测并分析.结果早发型CMT病例共13例,男9例(69%),女4例(31%),平均就诊年龄4.0±2.1岁,其中12例(92%)患儿起病年龄<2岁.9例(69%)诊断为CMT1型(其中Dejerine-Sottas综合征6人),1例(8%)为中间型,3例(23%)为CMT2型.13例患儿的基因检测结果显示6例(46%)患儿存在外周髓鞘蛋白22(PMP22)基因重复突变、3例(23%)髓鞘蛋白零(MPZ)基因插入突变及点突变、3例(23%)线粒体融合蛋白2(MFN2)基因点突变、1例(8%)人轻肽神经丝蛋白(NEFL)基因点突变,其中11例(85%)为已知致病突变,2例(15%)为新变异.MPZ基因新变异c.394C>G(p.P132A)评级为"可能致病的"及MFN2基因新变异c.326A>G(p.K109R)评级为"致病的".结论早发型CMT以PMP22基因重复突变及MPZ基因突变为主,临床分型以CMT1型为主,其中Dejerine-Sottas综合征占有相当比例.

泛福舒对小儿反复呼吸道感染免疫机制、炎症机制影响研究及疗效观察

小儿反复呼吸道感染是常见的一种疾病,近年来流行病学调查研究发现其发病率呈不断增加趋势,使小儿身心健康受到严重影响且小儿反复呼吸道感染病因较为复杂,若不能采取及时有效的治疗方法,会导致小儿反复发作或迁延不愈。近年来研究报道显示,免疫功能和炎症机制与小儿反复呼吸道感染密切相关,且参与其发生、发展。

瞬时受体电位M2型离子通道在神经系统疾病中的作用研究进展

瞬时受体电位M2型(TRPM2)离子通道是可渗透钙离子的非选择性阳离子通道,在神经炎症、缺血再灌注脑损伤、神经退行性病变、神经病理性疼痛、癫痫等多种神经系统疾病中发挥重要作用。在缺血再灌注脑损伤中,TRPM2通过调节谷氨酸离子N-甲基-D-天冬氨酸受体不同亚基、响应钙离子/锌离子信号,介导神经元死亡。在阿尔茨海默病中,TRPM2被β-淀粉样肽生成的活性氧激活形成恶性正反馈循环诱导神经元死亡,并在胶质细胞中通过促进炎症反应和氧化应激参与其病理过程。在癫痫中,TRPM2基因敲除通过抑制自噬和凋亡相关蛋白,减轻癫痫引起的神经元变性。本文总结了近年来TRPM2通道在多种中枢神经系统疾病发病机制中的作用及其潜在的药物研发和临床应用前景。

瞬时感受器电位M2在中枢神经系统疾病炎症通路调控中作用机制的研究进展

神经炎症反应是阿尔兹海默病、缺血性脑损伤、多发性硬化等中枢神经系统(CNS)疾病共有且突出的病理特征之一。瞬时感受器电位M2(TRPM2)通道是一种新发现的非选择性钙离子通道,在CNS中广泛分布。研究发现TRPM2在多种CNS疾病炎症通路中起重要作用,但其相关分子机制尚未完全阐明,本文围绕TRPM2在CNS疾病模型中的作用、调控炎症通路的分子机制以及TRPM2抑制剂的相关研究进展作一综述。

双sgRNA介导的miR-155基因敲除对FLT3-ITD^(+)AML细胞系的药物敏感性的影响

目的:在CRISPR/Cas9基因编辑系统中引入两条不同结合位点的sgRNA共转染FLT3-ITD;AML细胞系MV411获得miR-155基因敲除的MV411细胞,比较单sgRNA转染与双sgRNA转染法进行的miR-155基因敲除的效率及对细胞相关表型的影响。方法:以慢病毒为载体分别构建单转染与双转染的基因敲除细胞,PCR检测基因编辑效率。实时荧光定量PCR法检测miR-155-5p的表达水平。CCK-8法检测细胞增殖能力,并计算细胞对阿霉素与奎扎替尼的药物敏感性。Annexin V-APC/7-AAD双染色检测经阿霉素与奎扎替尼诱导的细胞凋亡水平。结果:CRISPR/Cas9可对miR-155的编码基因进行有效编辑,双sgRNA转染细胞可见明显DNA剪接条带。与单sgRNA转染相比,双sgRNA转染中miR-155-5p的表达水平更低,对阿霉素与奎扎替尼具有更低的IC_(50),更高的药物诱导的细胞凋亡率。结论:双sgRNA转染对miR-155的基因表达的抑制率要高于单sgRNA转染。由双转染基因敲除所引起的细胞抑制增殖、逆转耐药、诱导凋亡等表型更为显著。与单一sgRNA转染相比,双转染sgRNA是一种高效的基因编辑方案。

RNA测序联合CRISPR/Cas9基因编辑技术鉴定调控维甲酸诱导分化功能的miRNA

目的:研究miRNA的敲除对全反式维甲酸(ATRA)介导的急性早幼粒细胞白血病髓系分化的影响,并鉴定下调的miRNA若干,设计合成针对miRNA前体基因序列的sgRNA,通过CRISPR/Cas9技术实现miRNA在编码基因水平上的敲除。实时荧光定量PCR验证miRNA水平的变化和流式细胞术检测miRNA敲除后对细胞分化水平的影55种成熟miRNA下调。应用CRISPR/Cas9进行基因敲除后,PCR及Surveyor assay检测可见明显的DNA剪切条带,后,细胞的髓系分化受到明显抑制,而敲除miR-155后髓系分化水平则有所上调。结论:应用CRISPR/Cas9可进行针对平的影响,其具体机制是通过对分化相关靶基因的综合调控。