云南省西部地区宿主和媒介感染伯氏疏螺旋体的基因多样性调查与分析

目的了解云南省西部地区宿主动物和媒介蜱感染伯氏疏螺旋体的基因多样性,为进一步掌握该地区莱姆病菌株的特性奠定基础。方法对采用伯氏疏螺旋体5S~23S rRNA间隔区基因筛查阳性的云南西部地区采集的家畜、小型兽类、蜱虫样本,进行伯氏疏螺旋体鞭毛蛋白基因(FLA基因)和16S rRNA基因的检测,综合分析病原体的基因信息,了解当地流行株的生物学特性及流行特征。结果共检测301份样本,共检出7种基因型伯氏疏螺旋体,其中宿主动物共检出5种:B.afzelii(阿弗西尼疏螺旋体)、B.garinii(伽氏疏螺旋体)、B.burgdorferi s.s.(狭义伯氏疏螺旋体)、B.japonica(日本疏螺旋体)、B.valaisiana(法雷斯疏螺旋体);媒介蜱检出7种:B.afzelii(阿弗西尼疏螺旋体)、B.garinii(伽氏疏螺旋体)、B.burgdorferi s.s.(狭义伯氏疏螺旋体)、B.japonica(日本疏螺旋体)、B.valaisiana(法雷斯疏螺旋体)、B.sinica(中华基因型伯氏疏螺旋体)及未定种Borrelia sp.。B.afzelii、B.garinii和B.burgdorferi s.s.为优势流行株,占总阳性的85.04%(256/301)。不同地区、不同来源的相同基因型株基因序列存在种内差异,同一地区的宿主和媒介中检出的相同基因型螺旋体具有较高的同源性和较近的遗传进化关系。结论云南西部地区宿主和媒介感染伯氏疏螺旋体基因型具有较高的多样性特征,存在多种致病基因型,给当地人群的健康造成一定危害,需加强防范。

恙虫病临床诊疗专家共识

恙虫病是由恙虫病东方体感染引起的一种自然疫源性疾病,流行于东亚和东南亚地区,主要表现为发热、焦痂或溃疡、淋巴结肿大及皮疹。恙虫病早期症状不典型,容易误诊和漏诊。中国微生物学会人兽共患病病原学专业委员会和中国医药生物技术协会生物诊断技术分会相关专家,根据领域相关研究进展和诊疗经验,并参考国内外相关文献与指南,结合我国临床实践与咨询论证,形成本共识。

杂草生物防治研究回顾与展望(综述)

阐述了杂草生防的概念、方法以及在农林生态系杂草管理中的地位;综述了杂草生物防治的历史、成就及现状;列举了最近中外杂草管理诸多实例;分析比较了传统杂草生防与现代杂草生防新技术的优缺点、发展前景与方向。

北京市褐家鼠种群遗传多态性及与汉坦病毒分布关系的研究

目的了解北京地区褐家鼠不同地理种群遗传多态性与该地区汉坦病毒(HV)基因变异及其分布可能存在的关联.方法选取北京市不同地区捕获褐家鼠,采用巢式RT-PCR法检测HVM基因片段,获得的阳性标本产物进行直接测序,构建系统发育树.另一方面对不同HV来源的宿主个体和其对应种群内随机选取的其他个体,以及其他一些地区鼠类作为参照,用随机扩增多态DNA(RAPD)技术获得褐家鼠基因组DNA多态性图谱,利用RAPDDIST和PHYLIP软件分析褐家鼠种群多态性,并与对应的北京地区的HV差异和分布进行比较.结果选用50个随机引物进行扩增,有5个引物获得清晰、多态性高的RAPD谱带.不同区域种群RAPD标记不尽相同,北京市褐家鼠地理种群之间存在一定程度的遗传分化,大部分种群遗传距离较为接近,其中采集于某农产品集散地的XFD种群遗传距离相对较大,有特异性标记条带.11个HV代表序列均为汉城型汉坦病毒,基因差异为0.1%～8.0%,可分为2个主要的支系,多数毒株变异类型在不同地域中交叉分布,但BjFT01株变异较大,成一个独立的支系.通过Bootstrap分析和系统树图比较,种群分化较大的XFD种群与该区获得1株亲缘关系相对较远的HV相对应.结论北京市不同区域HV及其褐家鼠DNA多态性均存在一定差异,不同种群尤其是输入性种群对北京HV流行影响程度不同,初步显示一些特定种群与特定的基因性别有一定的关联.XFD种群外源基因交流渗入的可能性较大,进一步证明北京市HV随着鼠类种群迁移输入的可能性极大,但仍有待于选用一些特异性标记基因多态性进行继续研究.

北京不同生境鼠类及其感染汉坦病毒的调查

目的 了解北京不同生境鼠形动物及其感染汉坦病毒 (HV )的空间分布。方法 选取北京 5个区 (县 ) 9类生态环境 ,于 2 0 0 2年 8月至 2 0 0 3年 11月春、秋季节采用夹夜法捕获以鼠类为主的HV宿主。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测其携带HV的情况。利用SPSS软件分析宿主及其自然感染HV的空间分布特征。结果 共捕获宿主动物 3 87只 ,平均密度 6.67%。 6个调查点 9类生境的鼠形动物群落构成 (多样性、均匀度和优势度 )特征不同、生物分配量不同 ,以褐家鼠在食堂、菜地的生物分配量最高 ,野栖型生境大林姬鼠的生物分配量最大 ,高于黑线姬鼠的生物量。携带的HV均为汉城型 (SEO) ,带病毒宿主主要为褐家鼠、小家鼠 ,分别占 97.2 0 %和 2 .80 %。不同调查点阳性率 :昌平区11.49%、海淀区西北部 7.5 8%、海淀区中南部 6.3 8%、延庆县 3 .5 7% ,门头沟区和怀柔区均为 0。 9种生境的阳性率分别是 :11.88% (养殖场 )、10 .44 % (垃圾场 )、8.82 % (食堂 )、8.16% (工地 )、6.85 % (菜地 )、0 (农梯田、低矮灌木、山林和民房 )。总体家栖性生境和野栖型生境二者之间差异有显著性 (χ2 =4.65 8,P =0 .0 3 1)。结论 北京地区不同生境的鼠类密度、群落构成有不同程度的差异 ;鼠类及其HV感染空间分布广泛 ,尚未?

北京市城区鼠间汉坦病毒感染的流行病学研究

目的了解北京城区中心地带鼠间汉坦病毒(HV)感染状况及其病毒型别差异。方法选取北京城区某方圆约1km两街区之内的食物资源丰富、场所隐蔽的中、小餐饮行业、蔬菜集贸市场及周边垃圾堆、卫生死角等生态环境,从2003年12月至2004年11月每月连续采用夹夜法捕鼠,计算鼠密度和鼠种构成。应用间接ELISA法检测鼠血清IgG抗体;针对汉坦病毒M基因部分片段设计汉城型汉坦病毒(SEOV)特异性引物,应用RTPCR法检测宿主动物携带HV情况,阳性标本直接测序。利用Excel和SPSS软件分析宿主动物HV感染的动态特征。最后用DNASTAR软件对获得序列进行比较分析。结果共捕获啮齿动物229只,平均鼠密度6.41%(229/3570),褐家鼠和小家鼠分别为餐饮业、农贸市场生境的优势鼠种。褐家鼠血清抗体阳性率3.51%(6/171),带病毒率为0.58%(1/171);小家鼠血清抗体阳性率为6.90%(4/58),带病毒率为1.72%(1/58)。病毒检出率以11、12月最高,抗体水平冬春季(1、4月)最高,与春季人群肾综合征出血热(HFRS)流行季节基本一致。2份扩增阳性标本(分别来源于小家鼠和褐家鼠)均为SEOV,差异为5.40%,系统发育分析显示他们位于2个不同的较小分支,但均位于Z37支系。结论北京城区2种主要的HV宿主在一些鼠害重点行业密度仍较高,虽然HV基础感染率不高,但持续存在,为春季人群HFRS发病高峰的重要影响因素。来自2个不同宿主的HV基因有一定的差异。小家鼠的传播作用有所加强,应予重视。

叶蝉鸣声特征及其在分类学上的应用研究进展(综述)

综述了叶蝉的发声和接收机制、记录与分析方法、声学信号的性质和在生物学行为上的作用 ,以及叶蝉鸣声特征行为 (鸣叫节律和音色差异 )在近缘种、疑难种。

褐家鼠不同脏器中汉坦病毒自然感染的差异

为了解野外褐家鼠不同脏器中自然感染汉坦病毒状况和带毒量的差异,选取经检测鼠肺组织中HV-RNA并呈阳性的鼠个体20只,采用巢式RT-PCR检测这些个体心、肝、肺、脾和肾5种共85份脏器中的HV,对阳性标本重复扩增后直接测序,用DNASTAR软件对获得序列进行比较分析。另外,针对汉城型汉坦病毒株Z37-M片段全序列设计定量PCR特异性引物,采用SYBRGreen实时定量PCR法,检测上述85份不同脏器中HV带毒量情况与相对差异。结果显示:RT-PCR对除肺脏之外的其它脏器中HV-RNA的检出率较低(11/65),不同个体肺组织来源的HV-M片段变异较多,其中A→G碱基变异类型占1/3强。从11份除肺之外的脏器中扩增到的HV-M基因序列和其对应同一褐家鼠个体肺脏HV-M片段相比,其碱基差异不大;一肺脏来源的与该个体其他脏器来源的HV-M片段两个位点存在A→G差异,并分别导致两位置氨基酸差异。定量检测结果显示:褐家鼠不同脏器中HV-RNA检出率差异有统计学意义(χ2=16.10,P=0.003),总体阳性率大小为肺>肝>肾>心>脾;肺脏中病毒的分布比其他脏器更为普遍。带毒量也以肺脏中最高,其它脏器之间HV带毒量没有显著性差异(χ2=8.79,P=0.088)。这些结果说明:褐家鼠肺脏是HV侵犯与贮存的主要靶器官,HV基因在该器官中可能更易发生变异。这对进一步了解HV在宿主体内的贮存规律、传播及其在流行病学上的意义将有所裨益。

嗜吞噬细胞无形体研究进展

本文重点阐述了嗜吞噬细胞无形体Anaplasmaphagocytophilum的病原学、生态学方面的研究进展：简要介绍了人群中嗜吞噬细胞无形体感染流行的特征、主要临床特点和治疗要点；概括了嗜吞噬细胞无形体感染的预防控制手段；分析了嗜吞噬细胞无形体相关研究存在的一些不足及其今后的研究方向。

应用巢式RT-PCR结合RFLP、SSCP对山东肾综合征出血热病人血清中HV基因检测和分型研究

目的探讨山东肾综合征出血热重疫区病人血清中HV分子生物学特征,同时寻找准确、简便、迅速的HV检测与分型方法,从而为制定防治决策提供科学根据。方法从山东肾综合征出血热重疫区临沂市费县收集病人早期血清,应用巢式RT-PCR对病人血清中的HV进行基因扩增,采用RFLP、SSCP分型,并进行序列测定与分析。结果48份临床和ELISA检测确诊的HFRS病人血清经巢式RT-PCR扩增后,41份阳性,阳性率85.42%。41份阳性标本巢式RT-PCR产物经HindIII、HinfI酶切后,呈现2种不同的RFLP图谱:33份显示与R22株相似的酶切图谱,应属SEOV型;另外8份显示出与HTN76-118株相似的图谱,属HTNV型,这8份HTNV型标本均为10-12月间收集的病人血清。41份阳性标本巢式RT-PCR产物经SSCP分析,亦呈现2种不同的图谱:33份具有与R22株相似的SSCP图谱,应属SEOV型;而另8份则与HTN76-118株具有相似的SSCP图谱,属HTNV型。对部分扩增产物序列采用系统进化树分析也得出类似的结果:sdp1、sdp2、sdp3与HTN型76-118株亲缘关系相近,属同一簇,而sdp22、sdp37与SEOV型Z37、R22株亲缘关系相近,属另外一簇,这与RFLP和SSCP获得的结果相一致。结论山东肾综合征出血热重疫区病人基因型以SEOV型为主,但在秋冬季节也存在HTNV型。巢式RT-PCR结合RFLP、SSCP法可对HV准确分型,而且简便、迅速,适合于大规模流行病学调查。

蜱媒传染病复合感染研究进展

近年来，新发蜱媒传染病不断发生，对于各种蜱媒传染病的研究有了很大的进展。由于蜱传播的病原体类别多样，包括细菌、病毒、原虫等，动物宿主广泛，流行环节十分复杂，媒介蜱中、宿主动物中、人群中的复合感染现象十分普遍。然而很多蜱媒传染病一直仍被世界卫生组织列为“被忽略的疾病”，人们关于蜱媒传染病复合感染的认识还比较匮乏。为此，本文通过整理、总结目前国内外有关蜱媒传染病复合感染的数据，概述美、欧洲、亚洲等蜱媒传染病多发地区中常见的莱姆病与无形体病复合感染、莱姆病与巴贝西虫病复合感染，三种及其三种以上病原体复合感染的情况，并介绍复合感染的主要临床表现。从而提示人们加强对蜱媒传染病复合感染的认识，加强对临床复合感染病例更多的关注和研究。

中国葛藤叶蝉名录及新种、新记录描述(同翅目:叶蝉科)

本文系统报道我国葛藤上的叶蝉种类 ,共有 11亚科 40属 5 0种 ,其中含 3新种、1中国新记录属、5中国新记录种 ,建立 1新组合种 ,并对折板叶蝉属ParalaevicephalusIshihara的属征进行了厘订。新种模式标本保存在安徽农业大学昆虫标本室。

我国东北部分地区宿主动物感染汉坦病毒的分子流行病学调查

目的了解我国东北部分地区宿主动物携带汉坦病毒状况及其型别。方法采用夹夜法捕鼠，针对不同型别汉坦病毒M片段设计引物，应用RT—PCR检测带毒状况，阳性标本测序，对M片段变异大的标本再进行S片段的扩增测序，获得序列用clustalX（1．83）和Phylip3．63进行分析。结果共捕获鼠类宿主220只，平均阳性率为3．64％，不同鼠种间阳性率差别有统计学意义。其中从棕背鼠平鼠Jilin-54、Jilin-59检测到汉滩型汉坦病毒，从褐家鼠Jilin-99、Ji—lin-106标本中检测到汉城型汉坦病毒。而从大林姬鼠HU-32、Jilin—AP10和HLJ-47中得到的汉坦病毒M片段均与HTNV原型株76-118同源性最高（95．35％～97．42％）；来源吉林（毗邻俄罗斯远东地区）大林姬鼠的Jilin-AP06的汉坦病毒M片段与我国病人分离株B78、H5同源性最高（97.25％～95.33％），与来源俄罗斯远东地区大林姬鼠的Amur类汉坦病毒AP111株同源性为93．48％，与来自吉林大林姬鼠的Jilin93同源性为80．80％，与76-118同源性为80.80％，与朝鲜大林姬鼠分离株Soochong-1同源性为88.24％。Jilin-AP06S片段同其他株的同源性与M片段的结果一致。结论我国东北部分地区宿主动物携带汉坦病毒的型别多样，我国大林姬鼠中存在Amur类病毒感染。

基于空间信息技术的北京市肾综合征出血热宿主动物感染与环境因素关系研究

目的探讨北京市肾综合征出血热(HFRS)宿主动物的感染情况与环境因素之间的关系。方法选择北京市9个区(县)作为研究试验区,设立14个调查点,对HFRS动物宿主感染情况进行调查,应用全球定位系统对调查点进行定位,在ArcGIS软件支持下,建立调查点矢量图层,并与北京市1∶100 000地形图、北京市Landsat-7 TM卫星遥感影像图及北京市高程图进行叠加,分别提取调查点周围2 km缓冲区内的平均海拔,校正植被指数及土地利用信息,导出后在SPSS 13.0中分析宿主感染情况与环境因素的联系。结果不同地区间HFRS动物宿主密度和带毒率的差异具有统计学意义;宿主带毒率和带毒指数与园地、水浇地面积成正相关关系;宿主带毒情况和校正植被指数之间无相关性;褐家鼠带毒率与海拔、水浇地面积之间呈正相关关系。结论北京地区肾综合征出血热动物感染情况与土地利用等地理环境因素有关,提示应根据不同地理环境特点采取有针对性的防控措施。

驻石某部肾综合征出血热流行病学调查

目的探讨某部肾综合征出血热(HFRS)的流行状况、啮齿动物间汉坦病毒(HV)感染特点及HV基因型,为HFRS的预防控制提供科学依据。方法夹夜法捕鼠,计算鼠密度,确定鼠种构成。针对HV基因M片段部分序列设计2种型特异性引物,应用RTPCR法检测宿主动物带病毒情况。结果共捕获宿主动物14只,血清抗体阳性率为21.43%,RTPCR扩增检测出阳性标本1份,为褐家鼠,分型为汉城型阳性标本。密切接触人群血清抗体阳性率为3.64%。结论该地区存在汉城型HV感染,提示应加强疫情监测,防止疫情的扩大蔓延。

恙虫病实验室检测规范专家共识

恙虫病,又名丛林斑疹伤寒,是主要经恙螨幼虫叮咬传播,由恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi)感染引起的,并以发热、焦痂或溃疡、淋巴结肿大及皮疹为主要临床特征的一种自然疫源性疾病,主要流行于东亚和东南亚地区。恙虫病的临床症状不典型,很容易被误诊和漏诊。中国医药生物技术协会生物诊断技术分会和中国微生物学会人兽共患病病原学专业委员会的专家学者参考国际相关指南,梳理国内外恙虫病精确、快速实验室检测相关进展,总结经验,形成了本共识。旨在明确实验室检测在恙虫病确诊方面的作用,为恙虫病的早期精准和快速实验室诊断提供支持,从而为临床医生及时使用有效抗生素干预治疗和预防并发症提供有益帮助。

云南西部地区家畜动物感染巴贝虫的分子流行病学调查

目的了解云南省西部地区家畜动物感染巴贝虫的状况,为制定防治措施提供依据。方法在云南省西部地区12个县(市)采集家畜动物抗凝血液1 073份(牛血274份、羊血395份、犬血354份,马血33份,驴血17份)。提取基因组DNA,运用PCR检测巴贝虫18SrRNA 1 600bp长片段,通过基因序列比对及系统进化分析进行巴贝虫定种。结果共检出巴贝虫阳性样本50份,分属5种巴贝虫,总阳性率4.66%。其中牛血中检出11份阳性(4.01%),4份为牛巴贝虫(B.bovis),7份为双芽巴贝虫(B.bigemina)。羊血中检出38份阳性(9.62%),37份为奥氏巴贝虫样寄生虫(B.odocoilei-like parasites),1份为狍巴贝虫样寄生虫(B.capreoli-like parasites);犬血中检出阳性1份(0.28%),为韦氏巴贝虫(B.vogelli)。马和驴未检出阳性。结论云南省西部部分县市的家畜动物存在多种巴贝虫感染,给当地畜牧业的发展和人类的健康造成一定的危害,需加强防范,当地人群感染情况值得进一步调查。

蜱虫叮咬所致红肉过敏

蜱虫叮咬致病报道增多,已引起医务工作者重视。目前,大多数医务工作者关注蜱虫叮咬所引起的感染性疾病,而对蜱虫叮咬所致红肉过敏关注甚少,本文从蜱虫叮咬与红肉过敏的相关性,以及蜱虫叮咬所致红肉过敏的发病机制、诊断与鉴别诊断、治疗及预后等方面综述蜱虫叮咬所致红肉过敏的研究进展,以期为临床提供参考。

PCR-RAPD分子生物学技术及其在植物抗病性研究中的应用

PCR-RAPD技术是一种高效的基因组DNA多态性分析技术,能够在对生物细胞或组织中DNA遗传多样性、亲缘关系及系统进化分子标记检测的同时进行基因定位与遗传作图。本文综述了PCR-RAPD技术的基本原理和应用范围,以及近年来在植物抗感病品种(品系)间亲缘远近关系分析、植物抗病性遗传基因的DNA分子标记与检测、植物抗病基因的标记和定位、植物抗病基因的分离与克隆、植物抗病育种的分子标记辅助选择与检测等植物抗病性分子机制研究方面的应用,并对该技术所存在的问题及应用前景进行了探讨。

葛藤雌雄蕊发育的研究

通过光学显微镜和扫描电镜对葛藤的雌雄蕊发育进行观察 ,结果表明 :葛藤雌雄蕊的发育及结构基本上符合蝶形花科的胚胎学特征 ,其花粉粒为 2—细胞型 。