金鸡毛草叶总黄酮大孔树脂的富集及抗氧化活性研究

以金鸡毛草叶总黄酮粗提液为原料,用静态吸附试验对7种大孔树脂进行筛选,选取用最佳大孔树脂进行后续吸附考察,采用单因素试验优选总黄酮的最佳纯化工艺,以维生素C(VC)为对照品,考察金鸡毛草叶总黄酮的抗氧化活性。结果表明最佳大孔树脂为AB-8型,经单因素和正交试验,树脂动态吸附最佳纯化工艺为上样浓度4mg/mL、上样体积1.2BV、上样流速1.5BV/h、上样pH6、洗脱水用量3.5BV、洗脱液乙醇的浓度60%,洗脱用量3BV,在此条件下纯化后总黄酮的保留率为61.1%,纯化后样液纯度提高至5.24倍;抗氧化活性方面,在干浸膏浓度20μg/mL^100μg/mL范围内对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率为23.10%~57.76%,在100μg/mL浓度下对羟基自由基(·OH)的清除率为3.76%,在3.6μg/mL^18.2μg/mL浓度范围内对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+·)清除率为33.27%~87.90%,表明金鸡毛草叶总黄酮具有一定的抗氧化活性,可为金鸡毛草的深入开发、产业附加值的提高提供参考依据。

聚酰胺树脂纯化金鸡毛草叶总黄酮及其体外抗氧化作用研究

用单因素试验优化聚酰胺树脂纯化金鸡毛草叶总黄酮工艺,采用单因素试验以维生素C为对照品,考察总黄酮纯化液的抗氧化活性。结果表明:树脂最佳纯化工艺为上样pH 3、洗脱液乙醇的浓度70%、上样体积1.2 BV、上样流速1.5 BV/h,在此条件下纯化后总黄酮的保留率为54.44%,纯化后样液纯度提高至4.52倍;抗氧化活性方面,在干浸膏浓度20~100μg/mL范围内对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)清除率为20.79%~50.66%,在100μg/mL浓度下对羟自由基(OH)的清除率为3.58%,在3.6~18.2μg/mL浓度范围内对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+)清除率为28.71%~82.14%,表明金鸡毛草叶总黄酮具有一定的抗氧化活性。为金鸡毛草的深入开发、产业附加值的提高提供参考依据。

单细胞转录组测序揭示化疗增强乳腺癌细胞亚精胺代谢激活肿瘤免疫

目的探索化疗对癌细胞亚精胺代谢的影响及其对乳腺癌免疫细胞浸润以及效应淋巴细胞激活状态的影响。方法分析MMTV⁃Wnt1小鼠肿瘤细胞移植瘤化疗模型的单细胞测序数据,分析化疗后乳腺癌细胞亚精胺代谢水平改变;同时分析各亚型人乳腺癌单细胞测序,探索亚精胺代谢异质性,比较亚精胺代谢高低两组患者免疫细胞浸润和激活状态的差别。结果MMTV⁃Wnt1小鼠来源肿瘤细胞移植瘤经多柔比星化疗后肿瘤细胞中富集了亚精胺代谢旺盛的亚群,该群细胞高表达亚精胺代谢相关酶ODC1、SMOX;乳腺癌细胞亚精胺代谢旺盛与效应T淋巴细胞浸润增加和CD8T淋巴细胞功能增强呈现正相关。结论化疗促进乳腺癌细胞亚精胺代谢,肿瘤细胞亚精胺代谢活跃激活抗肿瘤免疫,从而促进肿瘤免疫。

碱性脂肪酶的研究开发

本项目以菜市场、乳品厂、油脂厂采集的土样为实验材料,分别进行菌种的初筛培养及Rodamine B筛选法富集培养,并利用摇瓶发酵培养扩增菌种。通过对菌种发酵所产酶的活力进行测定,优选出能高效产碱性脂肪酶的菌种。通过鉴定,获得的菌种为油脂厂采集分离得到的革兰氏阴性菌,产酶活力为60IU/m L,经检测此菌种为Alcaligenes sp。最后对该菌种所产酶添加至清洁剂中的比例进行优选,得出其比例为18%去污效果最佳。