DNA依赖蛋白激酶研究进展

ＤＮＡ依赖蛋白激酶由Ｋｕ 异二聚体和ＤＮＡＰＫｃｓ 组成， 结合Ｋｕ 蛋白后， ＤＮＡＰＫ激酶活性激活， ＤＮＡ依赖蛋白激酶具有多功能性， 参与ＤＮＡ修复、基因重组以及复制、转录等多种细胞学过程．

睫状神经营养因子的cDNA克隆、表达、纯化及其生物活性鉴定

反转录ＰＣＲ扩增人睫状神经营养因子（ｈｕｍａｎｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏＰｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ｈＣＮＴＦ）ｃＤＮＡ后，克隆进ｐＢＶ２２０，在大肠杆菌中实现原核高效表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ观察到分子量约为２４ｋＤ的预期表达产物，薄层扫描确定其表达量为２６％，制备电泳和凝胶过滤纯化后纯度达到９８％，生物活件分析表明，表达产物能刺激１０日龄鸡胚背根神经节细胞的生长，促进ＣＦＵ－ＧＭ的增殖。

辐射敏感细胞ku80基因突变及其DNA结合活性研究

RT PCR克隆辐射敏感细胞及其亲本细胞的ku80基因cDNA ,发现辐射敏感细胞的ku80基因与双链断裂DNA末端相互作用的位置存在基因突变 ,用凝胶阻滞和DNA 蛋白质印迹进一步证实突变ku基因编码蛋白结合双链断裂末端DNA的能力下降 。

细胞周期蛋白D

细胞周期蛋白Ｄ家族在细胞周期中具有极其重要的作用，与肿瘤的转移和恶化有密切关系，本文对细胞周期蛋白Ｄ家族成员的基因结构。

不同剂量、剂量率^(32)P照射下HeLa细胞发生凋亡及其与细胞杀伤效应的关系

研究了放射性核素3 2 P照射HeLa细胞 ,在不同剂量、剂量率条件下凋亡的发生 ,以及凋亡与杀伤效果的关系。用3 2 P放射性贴片照射细胞 ,观察照射后细胞凋亡、增殖能力变化、细胞周期再分布 ,研究不同剂量、剂量率、照射时间时细胞放射响应的特点。用荧光显微镜观察凋亡细胞形态学特点 ,并进行漂浮细胞凋亡定量分析 ;流式细胞仪凋亡定量分析及平行检测细胞周期变化 ;电镜观察凋亡亚细胞形态学特点 ;克隆形成率和细胞群体倍增大小 ,评价肿瘤细胞增殖能力。结果显示 ,在研究剂量范围内 ,HeLa细胞死亡的主要方式为凋亡 ,主要发生在照射后 4 8- 72h ,随G2期阻滞的下降 ,凋亡率逐渐增加。单次照射与分次照射的比较显示 ,前者凋亡率高于分次照射 ,与克隆形成率不一致。提示 ,在不同照射方式下 。

睫状神经营养因子研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）分布于神经系统的非神经细胞，具有广泛的生物学活性，可以提高体内外各种类型外周神经元的存活。ＣＮＴＦ受体在神经系统和骨骼肌中广泛存在，在运动神经系统及与运动系统有关的部位大量表达。其对运动神经元的生理效应为临床应用于肌萎缩性脊髓侧索硬化及帕金森氏症开辟了前景。ＣＮＴＦ与造血生长因子在结构与功能上具有一定的相关性。

高精度碟形弹簧的制造

介绍了反应堆用高精度0Cr15Ni70Ti3AlNb碟形弹簧的制造工艺。阐述了机械加工、精密成型等新工艺、新方法,并经过试验,获取有关机加工;精密成型;热处理;定型处理等工序的经验数据,为今后在此类高精度碟形弹簧的成型、热处理工艺及回弹量控制等方面提供了可靠的设计和制造依据。

膜式壁孔管热拉成形工艺的开发

介绍锅炉膜式壁孔管的热拉成形新工艺.与老工艺(采用在膜式壁管排上开孔、装焊门孔弯管的方法来制造门孔)相比,新工艺的经济效益显著.

小鼠乳腺癌辐射敏感细胞SX-9的ku基因突变与辐射敏感性研究

目的 研究辐射敏感小鼠乳腺癌细胞SX 9的ku70、ku80基因型 ,初步探讨ku基因突变对其辐射敏感性的影响。方法 RT PCR克隆并鉴定ku70 /ku80全长基因 ,并对其全长进行全自动测序。脂质体转染正常人全长ku80cDNA至SX 9细胞 ,克隆形成比较转染了正常ku80基因的SX 9与SX 9以及SR 1细胞存活率。结果 SX 9细胞ku70基因正常 ,而其ku80存在基因突变 ,转染了正常人全长ku80cDNA的SX 9细胞能部分重建其对γ射线的存活率。结论 SX 9细胞ku基因发生突变 。

人睫状神经营养因子的克隆与原核表达

目的：克隆人睫状神经营养因子基因ｃＤＮＡ，并探索其在大肠杆菌中高效表达。方法：提取总ＲＮＡ，逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），序列测定正确后原核表达并用制备电泳纯化。结果：克隆了人睫状神经营养因子基因ｃＤＮＡ，实现了其在大肠杆菌中的高效表达，表达量至少达到２６％，制备电泳纯化后，重组蛋白纯度达到９５％。结论：从胎儿坐骨神经组织中克隆到人睫状神经营养因子基因ｃＤＮＡ。

CIP-KIP细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子家族

细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子(CKI)是细胞周期调控网络的主要成员之一,在周期调控中具有重要的地位,CIP-KIP是CKI两个家族之一,与细胞生长分化和肿瘤发生方面有极其重要的关系。本文对CIP-KIP家族的细胞周期调控、基因敲除以及促CDK/CychnD装配功能的最新进展进行综述。

睫状神经营养因子受体研究进展

本文综述了睫状神经营养因子(CNTF)受体各个亚基的分子和基因结构,对CNTF受体信号转导机理进行概括,并探讨了CNTF与造血生长因子在信号转导上的相似性,以阐明CNTF对于造血系统的可能作用。

人睫状神经营养因子的原核表达及其初步纯化

目的：优化条件实现人睫状神经营养因子（ｈｕｍａｎｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ｈＣＮＴＦ）ｃＤＮＡ在大肠杆菌中的高效表达。方法：ＣＮＴＦ克隆进ｐＢＶ２２０后，表达，凝胶过滤纯化，１０日龄鸡背根神经节（Ｅ１０ＤＲＧｓ）测定其生物活性。结果：ＣＮＴＦ在ＨＢ１０１中高效表达，并具有生物活性。结论：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ观察到相对分子质量约为２４×１０３的预期表达产物，优化表达条件后发现其在ＨＢ１０１中的表达状况最好。

鼠乳腺癌细胞SX-9放射敏感性与细胞周期研究

通过对小鼠乳腺癌放射敏感细胞SX 9照射前、后细胞周期分布及其 p5 3基因状态等研究 ,初步探讨其放射敏感性与照射后细胞周期阻滞的关系。方法 利用克隆形成法比较SX 9与SR 1细胞照射后细胞存活份数及流式细胞术研究其细胞周期分布的差异 ;RT PCR克隆并鉴定p5 3基因 ;DNA电泳、流式细胞术和苔盼蓝染色研究细胞死亡方式。 结果 SX 9细胞对γ射线高度敏感 ,照射后G1 期阻滞消失 ,但仍存在G2 期阻滞 ;其 p5 3基因第 5外显子存在突变 ,DNA电泳检测不到DNAladder;苔盼蓝染色检测到的细胞死亡比例与对照组无显著差异。结论 γ射线照射放射敏感细胞SX 9细胞周期改变与其亲本细胞SR 1明显不同。SX 9亲本细胞SR 1细胞存在G1 ,G2 期阻滞。DNA电泳及苔盼蓝染色检测结果与SX 9细胞相同。结果表明SX 9细胞对放射敏感不是由于照射后细胞凋亡所致 ,而是由于其失去增殖能力引起增殖死亡的结果。

HT1080R细胞的辐射抗性与细胞周期关系初步研究

目的 研究HT10 80R的辐射抗性及其照射前后细胞周期分布 ,探讨其辐射抗性的分子机理。方法 克隆形成比较HT10 80与HT10 80R照射后细胞存活率 ,流式细胞术研究细胞周期分布 ,PCR SSCP和Western杂交测定 p5 3外显子的基因状态及其表达状况。 结果 HT10 80R的辐射敏感性降低 ,具有明显的辐射抗性。照射后具有G2 期阻滞现象 ,而其p5 3基因 5个外显子正常。结论 经γ射线照射HT10 80R细胞周期改变与其亲本细胞明显不同 ,出现明显的G2 期阻滞 ,提示HT10 80R辐射抗性的获得可能与其细胞周期G2 期阻滞有关 ,PCR SSCP和Western杂交研究表明HT10 80R细胞辐射抗性不是由于 p5 3基因功能异常所致。