O_2^-在低水平辐射所致细胞增殖刺激效应中的作用

为研究O- 2 在低水平辐射所致小鼠骨髓细胞增殖刺激效应中的作用。用3 H -TdR参入法测量细胞增殖能力 ;细胞色素C还原法测量培养介质中O- 2 浓度。实验证明 ,在一定浓度范围内 ,O- 2 含量增加 ,细胞增殖能力也增加 ;如果实验性降低O- 2 浓度 ,细胞增殖能力也随之降低。说明O- 2 在低水平辐射所致刺激效应中可能起着重要的作用。

SOD 对受照射犬外周血象的影响

家犬每天经６０Ｃｏγ射线全身照射０．６Ｇｙ，照后１０ｍｉｎ肌肉注射ＳＯＤ，连续５ｄ，观察外源性ＳＯＤ对受照射犬外周血象的影响。结果表明，肌肉注射二倍等效量的ＳＯＤ，对受照犬外周血白细胞有一定的保护作用。

慢性小剂量照射对仔鼠体重净增加的效应

实验用０．０１Ｇｙ／ｄ和０．０５Ｇｙ／ｄ的６０Ｃｏγ射线分别照射仔鼠，均能增加仔鼠的平均体重，且０．０５Ｇｙ／ｄ照射要比０．０１Ｇｙ／ｄ照射使仔鼠平均体重增加更快。

γ辐射对小鼠脾脏及红细胞的氧化损伤

报道２Ｇｙ６０Ｃｏγ射线照射小鼠后２４ｈ，对其脾脏ＳＯＤ活力及ＬＰＯ含量的影响，以及对小鼠外周红细胞的ＳＯＤ活力及其释放Ｏ_２~－能力的影响。

分次γ照射对成年前小鼠肝、肾组织SOD活性及脂质过氧化物含量的影响

报道了低剂量率^(60)Coγ线1 Gy分25次照射仔鼠,以及1 Gy一次性照射出生后五周的成鼠发现前者肝、肾组织LPO含量反而高于后者。说明仔鼠放射敏感性明显高于成年鼠。试验还发现,LPO含量变化与SOD活性变化之间有一定程度的负相关性。

姜黄水溶物对癌细胞离体增殖的影响

目的 研究姜黄水溶物对癌细胞离体增殖的影响。方法 用3 H -TdR参入法和细胞计数法 ,分别观察不同量的姜黄水溶物对急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者外周血T细胞及骨髓细胞合成DNA的能力 (代表增殖能力 )以及对L5178y(小鼠淋巴瘤 )细胞离体增殖的影响。结果 姜黄水溶物对ALL患者外周血T细胞及骨髓细胞合成DNA的能力有明显抑制作用 ;对L5178y癌细胞离体增殖也有明显抑制作用 ,且这种抑制作用随着姜黄水溶物添加量增加而增加。但对正常人T细胞及正常小鼠骨髓细胞无上述抑制作用。结论 姜黄水溶物能明显抑制癌细胞离体增殖。

姜黄素抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关的氧化应激机制

目的:探讨姜黄素抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关的氧化应激机制。方法:用不同浓度(5～40μmol/L)的姜黄素作用于乳腺癌细胞株MCF-7细胞,以MTT法检测在6、12、24、48h的细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA染色流式检测细胞内活性氧(reactive oxygen species ROS)生成变化,黄嘌呤氧化酶法检测氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),可见光分光光度计法检测过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。结果:低浓度(5、10μmol/L)姜黄素作用后MCF-7细胞增殖受抑制(P<0.01),但无凋亡发生;伴随细胞内ROS短暂升高后随时间逐步下降,SOD、CAT先下降后逐步提高。高浓度(20、40μmol/L)姜黄素作用后细胞增殖抑制率明显增加(P<0.01),细胞出现大量凋亡;伴随细胞内ROS即刻明显升高,随时间延长无明显下降;SOD、CAT明显下降(P<0.01)。结论:姜黄素具有剂量依赖的抗氧化与促氧化双重作用,不同浓度的姜黄素通过对乳腺癌细胞内氧化还原状态的调节参与了其抗肿瘤细胞增殖作用的机制。

^(60)Coγ射线照射对AT和GM细胞增殖能力及O_2^(.-)浓度的影响

为探求AT5BIVA细胞辐射敏感性与超氧阴离子自由基O2.-之间的联系,以正常人皮肤成纤维细胞GM0639为对照,用3HTdR掺入法和细胞色素C还原法分别测定正常及照射条件下细胞增殖能力及其培养介质中O2.-浓度(nmol/106细胞)。结果表明,在正常培养条件下,两种细胞的增殖能力和向培养介质中释放O2.-的量均随培养时间的延长而增加。在不同剂量60Coγ射线照射条件下,两种细胞的增殖能力和向培养介质中释放O2.—的量均随剂量增大而减小;两种细胞的增殖能力均与其培养介质中O2.—浓度密切相关,且AT5BIVA细胞的增殖速率大于GM0639细胞。提示AT5BIVA细胞高辐射敏感性与O2.—产生量密切相关。

低剂量照射离体血的刺激效应研究

研究受过低剂量照射的离体人血能否对正常血细胞或辐射损伤的血细胞产生刺激效应。将受过10cGy低剂量照射的离体人血,分别与未受照射或受过1000cGy大剂量照射的同一人血,以不同组合方式共培养,72h后收获细胞,测定各实验组的H?TdR掺入值。结果表明,接受低剂量照射的人血能够对受大剂量照射的3人血细胞产生明显的刺激增殖效应。受低剂量照射血的血浆中存在着引起刺激效应的物质。

肾虚与超氧化物歧化酶关系初探

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase 简称 SOD),能清除体内超氧化物自由基,从而保护机体免受其损害,因而 SOD 的活性状态与细胞的生命状态密切相关。为了探讨肾虚的病理机制及其生化改变,笔者对66例肾虚证患者进行了外周血细胞 SOD 活性定量测定,结果发现其 SOD 活性明显降低,与正常对照组相比有非常显著性差异(p<0.01)。对各种肾虚证分组比较,病情愈重 SOD 活性愈低;病程愈长或有夹杂证(如夹瘀、夹湿)则 SOD 活性愈低。

缺氧和γ射线连续照射对小鼠的损伤效应

缺氧以及γ射线连续照射，或者两种因素复合作用，均能使小鼠肝、脾和心组织中ＬＰＯ含量出现不同程度增加。ＳＯＤ活力出现不同程度增高。

支气管哮喘氧自由基损伤的实验研究

目的 探讨氧自由基在支气管哮喘发病中的作用。方法 通过支气管哮喘动物模型复制 ,分别测定哮喘组、β2 受体激动剂治疗组 (美喘清组 )、类固醇激素治疗组 (甲强组 )及正常对照组(对照组 )的小鼠肺组织超氧化物歧化酶 (SOD)和脂质过氧化物 (LPO)含量变化。结果 哮喘组、美喘清组、甲强组SOD分别为 ( 92 86± 9 2 9)U/ml、( 94 73± 10 2 5 )U/ml、( 10 1 78± 10 18)U/ml,前二组明显低于正常对照组的 ( 10 8 3 0± 2 1 67)U/ml,甲强组与对照组相比则无差异。三组LPO分别为 ( 3 81± 0 69)nmol/ gwwt、( 3 78± 0 71)nmol/ gwwt、( 3 0 3± 0 64)nmol/gwwt,前二组明显高于正常对照组的 ( 2 69± 0 5 7)nmol/ gwwt ,甲强组与对照组相比亦无差异。美喘清组与哮喘组SOD、LPO之间无显著差异。甲强组SOD明显高于哮喘组 ,LPO明显低于哮喘组。结论 氧自由基损伤参与了支气管哮喘病理过程 ,类固醇激素可以有效地降低氧自由基的产生 ,β2 受体激动剂无此作用。

电离辐射致急性脑老化大鼠模型的实验研究

目的根据衰老的自由基理论,建立一种简便易行的脑老化模型。方法以60Co照射大鼠建立急性脑老化模型、D-半乳糖注射大鼠建立亚急性脑老化模型,5月龄大鼠作为青年对照组; 通过Y型迷宫测定大鼠的学习与记忆能力;外周血SOD和MDA检测大鼠的抗氧化能力及脂质过氧化情况;通过光镜观察脑组织神经细胞的丢失、坏死及退行性变。结果 Y型迷宫测定表明,两个模型组大鼠的学习和记忆能力比对照组明显下降;与对照组相比,外周血中SOD明显降低,而 MDA则明显升高;光镜下,在模型组不同脑区均能观察到神经元的丢失和坏死,以海马和皮质最明显。结论成功建立了一种简便易行的急性脑老化模型;为脑老化机制的研究提供了新的实验手段。

^(125)I标记SOD氯胺T法和Iodogen法的条件研究

一、前言超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,简称SOD)具有清除过氧自由基的功能,因而可减轻生物的辐射损伤。此外,SOD还有抗氧化、抗炎症和抗衰老的作用,已在临床上得到应用,因而近年来对它的研究受到了普遍重视。

单核细胞促进人外周血淋巴细胞离体增殖的自由基机理

在人外周血淋巴细胞培养体系中加入不同数量的单核细胞共同培养,以~3H-TdR掺入法和细胞色素C还原法分别测定淋巴细胞增殖能力和培养介质中O_2^-浓度;加入NADPH氧化酶抑制剂DPI实验性地下调O_2^-浓度,观察淋巴细胞增殖能力的变化。结果显示加入单核细胞可增加培养介质中O_2^-浓度,进而促进淋巴细胞增殖,提示O_2^-浓度的升高是淋巴细胞和单核细胞共培养体系中淋巴细胞增殖的重要因素。

人硫氧还蛋白基因分子克隆及真核表达载体的构建

目的克隆人硫氧还蛋白(hTRX)cDNA序列并进行真核表达载体的构建。方法应用RT-PCR技术,以胎肝组织细胞总RNA为模板,扩增出hTRX成熟蛋白的cDNA基因,并克隆至pUCm-T载体中;经PCR和测序鉴定正确后,再构建重组真核表达载体pcDNA3.0-hTRX,采用PCR、双酶切和基因测序鉴定。结果将所得序列与GenBank(J04026)提供的序列比较,其酶活性中心(Trp-Cys-Gly-Pro-Cys)和基序与已知序列一致;PCR、酶切及测序鉴定表明真核表达载体构建正确。结论成功克隆编码hTRX成熟蛋白的cDNA基因,并构建其真核表达载体pcDNA3.0-hTRX。

急性脑老化模型大鼠脑神经元中衰老基因p21^(WAF-1)的表达

目的探讨急性脑老化模型脑组织中衰老基因p21^(WAF-1)的表达,为研究脑老化的发生机制及临床防治提供理论依据。方法以^(60)Co照射SD大鼠建立急性脑老化模型(简称模型组),5月龄SD大鼠作为对照组；通过Y型迷宫测定大鼠的学习与记忆能力,检测大鼠外周血超氧化物岐化酶SOD(抗氧化能力)和丙二醛MDA(脂质过氧化能力)来评判建模是否成功；通过原位核酸杂交检测鼠脑各部位神经元p21^(WAF-1)的表达。结果Y型迷宫测定表明,模型组大鼠的学习和记忆能力明显下降,与对照组相比差异显著；模型组外周血中SOD明显降低,而MDA则显著升高；模型组大鼠脑内p21^(WAF-1)的表达以海马、皮质表达最高,其次是下丘脑和纹状体,小脑表达最低；而正常对照组神经细胞p21的表达在小脑呈阴性,其他脑区有表达,但阳性率及强度较弱,与模型组相比有显著差异。结论脑组织海马和皮质等神经元对自由基攻击非常敏感,神经元中p21^(WAF-1)的表达增高,可能是参与神经元的DNA的损伤修复,并抑制神经元的凋亡。

免疫功能受损的T淋巴细胞低剂量辐射效应

目的观察低剂量辐射对免疫功能受损的T淋巴细胞的影响。方法用同位素掺入法观察免疫功能受损的小鼠和营养不良患儿T淋巴细胞DNA、蛋白质合成及其低剂量辐射效应。结果2.5 Gy全身照射和环磷酰胺(CTX)腹腔注射小鼠外周血WBC分别在第4 d和第6 d下降最为明显,WBC分别从4850×106/L降至1078×106/L,4878×106/L降至1400×106/L。T淋巴细胞3H-TdR(3H-胸腺嘧啶核苷)掺入明显下降,每分钟放射性计数(CPM)分别从6075降至4099,5764降至3715。与0 cGy组相比,经5 cGy辐射后3H-TdR掺入明显增加,CPM分别从4099升至5639,3715升至5404。5 cGy辐射还可以明显增加营养不良患儿T淋巴细胞14C-TdR(14C-胸腺嘧啶核苷)和3H-Tyr(3H-酪氨酸)的掺入,CPM分别从5179升至6201,1393升至2371。结论适宜的低剂量辐射对免疫功能受损的T淋巴细胞DNA、蛋白质合成有刺激效应。

茶多酚对铅染毒小鼠体内SOD活性、铅含量的影响

目的 观察绿茶提取物茶多酚对铅染毒小鼠体内SOD活性、铅含量的影响。方法 将小鼠随机分为正常对照组、醋酸铅染毒组和茶多酚实验组 ,采用肾上腺素自氧化法测定SOD活性 ,采用AAS无火焰法测定铅含量。结果 铅染毒可导致小鼠红细胞SOD活性下降 ,而茶多酚能显著增高小鼠红细胞SOD活性 ,但亦使小鼠血、肝、股骨中铅含量显著增高。结论 灌服茶多酚对铅中毒引起的机体过氧化损伤有一定的保护作用 。

实验性自身免疫性脑脊髓炎神经细胞内钙离子的变化及其意义

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE)发病初期及高峰期活体脑片内Ca2+荧光强度的变化,明确神经细胞内Ca2+的变化与病情演变的关系。方法采用激光共聚焦扫描显微镜(laserscanconfocalmicroscope,LSCM)对荧光探剂fluo3/AM负载的活体脑片进行观察,比较EAE发病初期组、高峰期组及正常对照组小鼠脑片的皮层、实质区域Ca2+的相对荧光强度。结果EAE发病初期组及空白对照组小鼠大脑皮层的Ca2+荧光强度均明显高于脑实质部位(P<0.05)、EAE高峰期组大脑皮层及脑内局灶区域的Ca2+相对荧光强度高于EAE初发病组(P<0.05)。结论EAE小鼠大脑皮层及脑内局灶区域均存在着神经细胞内的Ca2+内流,这种改变随着EAE病情的进展而增强。