油菜内生生防菌BY-2在油菜体内的定殖与对油菜菌核病的防治作用

从油菜植株体内分离出的内生细菌BY-2,经过生物学鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。用BY-2回接油菜,重新分离到具有BY-2相同形态特征和抑制病原真菌能力的内生菌株。油菜接种后的第10d,体内的BY-2菌数达(2.24～9.02)×103cfu/g鲜植株,25d仍然保持在(3.13～8.59)×103cfu/g鲜植株。BY-2与油菜核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary]对峙培养可以形成直径为3.1cm的抑菌圈;可使油菜核盘菌菌丝细胞浓缩变短,细胞壁破裂,原生质外溢,从而抑制真菌生长发育;同时还能抑制菌核的萌发,抑制率达60%～70%;在油菜离体叶片试验中,BY-2对菌核病的防治效果达100%。

大豆—根瘤菌的固氮作用

报道了我国主要大豆产区根瘤菌和寄主品种固氮资源的分布、主要类型、固氮作用。我国多年连续种植的大豆的田块 ,根瘤菌菌数每克干土一般超过 10 4 个 ,大部分零星隔年种植和不常种植大豆的田块根瘤菌数每克干土低于 10 4 个。多数根瘤菌土著者能与大豆栽培品种有效结瘤 ,但主要是中、低效固氮者。在自然条件下 ,供试的春大豆中高效固氮者占 31.7% ,供试的夏大豆高效者占 6 4.3% ;人工接种根瘤菌 ( 113 - 2 ) ,春豆中高效固氮者占 40 .9% ,夏豆占 5 3.6 %。我国的栽培大豆是较好的耐高氮共生固氮资源 ,评价出 2个在 5mMNO-3 条件下结瘤的品种。

油菜内生菌BY-2的脂肽类抑菌物质的分子结构鉴定

对油菜内生枯草芽孢杆菌BY-2(Bacillus subtilis)的细胞外分泌型抗菌性纯化物进行双缩脲反应、茚三酮反应、高效液相色谱仪(HPLC)分离、质谱分析和异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生HPLC分析。结果显示:BY-2的胞外分泌型抑菌物质含肽键,具有环状分子结构。在甲醇/水的流动相条件下,1.969min出现1个抑菌成分峰值;在三氟乙酸/甲醇流动相条件下,抑菌成分形成了6个峰值。组成分析结果表明:该抑菌物质由分子量分别为995Da、1009Da、1023Da、1037Da、1051Da和1087Da六种成分构成,其4种氨基酸比例为:天冬氨酸∶谷氨酸∶缬氨酸∶亮氨酸=1∶1∶1∶1.5。该抑菌物质可归类为环脂肽类抗生素(Cycle lipopeptide)中的枯草菌表面活性素(Surfactin),其中的1087Da大分子同系物尚未见报道。

油菜内生枯草芽孢杆菌BY-2抗油菜菌核病菌有效成分的鉴定和分离提纯

油菜内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BY-2产生2种类型的抗真菌物质,一种是挥发性的物质,可以有效地抑制油菜菌核病菌的生长;另一种是分泌到培养液中的物质。重点研究第二类抗菌物质的提取和纯化分析方法。试验证明BY-2产生和积累高效抑制油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum(L ib.)de Bary)生长的细胞外分泌型物质,其发酵上清液与油菜菌核病菌对峙培养形成了2.8 cm的抑菌圈;采用离心收集发酵液上清液、调节酸性条件、甲醇溶解和Sephadex G25葡聚糖凝胶柱层析等方法,可以沉淀、萃取收集和纯化该物质,而且收集率高、活性强、纯度高。

油菜根圈枯草芽孢杆菌Tu-100抗真菌范围和防治作用

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）具有抗胁迫生长和强竞争性等优势，是一种具有应用潜力的农作物病害生防细菌。本研究以来源于油菜根际、具有促生作用的枯草芽孢杆菌Tu-100为材料，研究了其抑制农作物真菌病原菌的作用范围和效果。结果证明：Tu-100对供试的12种真菌均有明显抑制作用。对峙培养试验结果显示：直接用Tu-100的发酵菌液与供试的10种病原真菌形成了明显的抑菌圈，浓缩10倍后对供试的12种真菌均形成直径27-40mm的抑菌圈。离体叶片上防治菌核病（Sclerotinia sclerotiorum）的试验结果显示：Tu-100菌液对油菜、大豆菌核病和玉米小斑病（Bipotam maydis）均有显著防治作用。该菌株防治植物根部病害的进一步研究将具有实际应用意义。

油脂微藻的研究进展

本文简述了油脂微藻的种类、含油量和脂肪酸成分以及主要用途,介绍了微藻的油脂代谢调控和改良技术研究进展,分析了目前大规模生产中存在的主要问题以及今后发展重点。

土壤中大豆根瘤菌优势类群以及与寄主共生关系的多样性

我国大豆种植区使用人工选育制成的根瘤菌剂接种效果不稳定。研究指出南方、北方和黄淮流域的6个省土壤中分布的主要Bradrhizobium japonicum是DH444、USDA110、LL120、005和C224血清型的菌株,主要的Rhizobium fredii是2048、USDA217、DE1611、2120和2077血清型的菌株。它们占每个取样地点分离物总数的60.3-81.6％。植物感染结瘤法测得大豆种植地点土著根瘤菌菌数在10~4/克土以上。盆栽试验表明大豆根瘤菌与大豆品种共生时有较强的亲和选择性和共生效应的多样性,其有效结瘤和固氮效率与根瘤菌个体菌株和大豆品种极相关。大多数土著大豆根瘤菌是低或中效固氮的菌株,因而认为选育抗土著根瘤菌而有利于人工接种菌株结瘤的大豆品种和强竞争性的高效菌株仍是提高我国大豆生产的有效途径。

PCR产物的RFLP分析在大豆根瘤菌研究中的应用

采用ＰＣＲ扩增１６—２３ｓｒＲＮＡ基因间序列和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）法，分析了２７株属于快生、慢生二个类型的大豆根瘤菌。慢生大豆根瘤菌都产生了一条约１９０４ｐｂ大小的ＤＮＡ产物带。用ＨａｅⅢ、ＭｓｐⅠ和ＣｏｆⅠ限制性酶处理２７株菌株ＰＣＲ扩增产物，除ＤＨ４４４和ＬＬ１６外，其余菌株３种酶处理的结果一致，可以分成９种遗传模式组。９种遗传模式组与菌株的地理起源相关，但与细菌的血清学分组无直接关系。利用大豆根瘤菌１６—２３ｓｒＲＮＡ基因序列间的多态性特性，采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ法分组，比血清学更能反映根瘤菌的遗传进化关系。

月见草内生真菌产γ-亚麻酸(GLA)菌株的研究初报

通过内生真菌的分离鉴定和回接植物宿主鉴定,获得12株不同形态特征的月见草内生真菌。月见草真菌油脂含量在17.73%～35.22%,部分菌株与宿主相同,可以产稀有的γ-亚麻酸(γ-linolenicacid,GLA)。YF6是一株高产GLA的月见草内生真菌,油脂的GLA含量达22.08%,并具有生长速度快、营养要求简单等特点。

花生根瘤菌指示植物—Siratro试管结瘤技术

本文对Siratro试管结瘤技术鉴定花生根瘤菌和测定花生根瘤菌数进行了验证。结果证明Siratro与花生对14株不同类型的花生根瘤菌有相同的结瘤反应;Siratro试管结瘤与平板稀释2种方法测定的036和97—1培养液细胞含量的结果一致;Siratro试管结瘤与花生水培结瘤二种方法测定土著根瘤菌数的结果极相同,估计值都在“最大可能数”置信范围的下限。

大豆等豆科植物快生型根瘤菌的分离比例、质粒类型及共生反应

本文对大豆、野大豆、花生、大翼豆等寄主植物的根瘤菌进行分离鉴定。结果表明,从几种寄主根瘤中分离出的快、慢生型菌株大约各占一半。在供试寄主植物上表现有效共生的菌株比例,慢生菌大于快生菌。大豆快生型菌株的质粒类型具多样性,按质粒图可分为26组。10种不同质粒类型代表菌株与太兴黑豆(与慢生菌广谱有效共生)有选择性地有效结瘤固氮,而与矮脚早(与慢生菌特异性有效共生)非选择性地有效结瘤固氮。

高含γ-亚麻酸根霉的发酵和提取工艺

介绍了高含γ-亚麻酸根霉的发酵和提取工艺,指出了本项技术的特点和先进性,分析了GLA的市场需求及其经济效益。

木质素降解菌的筛选及混合菌发酵降解秸秆的研究

农作物秸秆是农业生产的副产品,也是一项重要的生物资源。其成分结构的特殊性所导致的难降解问题,一直是转化利用秸秆的难题。利用混合菌将秸秆纤维素转化为蛋白质、乙醇、乙酸、乳酸等研究是目前热点。通过马铃薯琼脂平板培养、马铃薯液体摇瓶培养和稻草秸秆固态发酵,从6株常见的食用白腐菌中筛选出了生长优势较强、产漆酶酶活高的平菇HF。为了让秸秆得到更好的降解和利用,采用平菇和康氏木霉二步混合发酵法;通过不同的组合方式,发现H6-T10组合得出的降解效果最好,其木质素降解率达到44.77%,纤维素降解率达到41.48%。

多不饱和脂肪酸的研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFAs)对人体有重要的生理功能。它能调节人体的脂质代谢,治疗和预防心脑血管疾病,促进生长发育,此外对抗癌、免疫调节、延缓衰老、减肥、美容等方面均具有重要的生理作用。因此,PUFAs的食品资源开发正成为功能食品研究的热点领域之一,许多PUFAs已在保健食品和医学研究中得到应用。主要阐述了多不饱和脂肪酸的分类、命名、来源、生物学特性以及最新的研究动态,并对其在食品、医药、日用品方面的应用及应注意的问题、研究进展进行了综述。

金针菇漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达研究

综合运用cDNA末端快速扩增 (RapidAmplificationofcDNAEnds ,RACE )和基因组步行等技术克隆到一个金针菇 (Flammulinavelutipes)的漆酶结构基因和其对应的全长cDNA ,经测序和BLAST比对分析表明该基因属于多铜氧化酶基因家族 ,与已发表的漆酶基因 (AF176 2 30 )的同源性最高 ,在氨基酸水平为 72 %。该结构基因命名为gl ccFv,cDNA命名为lccFv ,其序列提交GenBank ,登录号分别为AY4 85 82 6和AY4 5 0 4 0 6。将lccFv的开放阅读框克隆到毕赤酵母表达载体pHBM90 6 ,转化毕赤酵母GS115且实现了分泌表达。将重组毕赤酵母GS115 (pHBM5 6 5 )诱导产酶 ,在培养温度 2 0℃、甲醇流加量为 1 0 % (V V)的情况下 ,其分泌表达的LCCFv的最高酶活为 0 10 70U mL ,最适反应温度为 4 5℃ ,最适反应pH值为 3 9。

大豆幼苗根系性状的QTL分析

为研究大豆幼苗期根系性状的遗传规律,以中豆29和中豆32构建的RIL群体为材料,在V2期测定水培幼苗根系性状(主根长、侧根数、根重、根体积和根冠比等)及相关性状(株重、茎叶重和下胚轴重等),以方差分析方法估算遗传参数,并采用复合区间作图法对大豆幼苗期根系等性状进行QTL定位。结果表明,在8个染色体上检测到20个根系及相关性状QTL,其中9个主效QTL位于第11和第14染色体,表型贡献率在10.5%～26.1%之间。在第11和第14染色体上,部分根系性状QTL与地上部性状QTL处于同一位置,其QTL的共位性与形态性状表型相关分析结果一致,反映了根系性状与地上部性状存在一定的关联。

基于主成分分析法的芝麻油香气质量评价模型的构建

采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用(HS-SPME-GC-MS)测定了9种芝麻油的挥发性成分。对萃取条件进行了优化,共鉴定了164种化合物,确认了其中16种芝麻油重要香气成分,并以16种香气物质的相对含量为变量,利用主成分分析法建立了芝麻油香气质量评价模型,并应用该模型对9种芝麻油香气质量进行了评价;通过感官评价法进一步对模型评价结果进行了检验,结果显示两种方法具有很好的一致性,表明所建立的方法是可行的。

巨大芽孢杆菌在油菜根部定殖和促生作用的研究

采用基因标记技术和常规方法跟踪巨大芽孢杆菌A6 (gusA)在缩影系统油菜根际的定殖情况。A6 (gusA)菌在油菜不同根段部位的定殖密度表现从上到下逐渐递减的现象。随着接种后时间的延长而逐渐下降。在根段 8cm以外的根区几乎检测不到接种菌。在油菜播种后 3d ,定殖密度可达最高水平 (8 7×10 5cfug-1根 ) ,然后急速下降 ,30d后保持相对稳定的较低水平 (2 2× 10 2 cfug-1根 )。在促生试验中 ,表现在不同程度上增加植株干重、全氮。

光强和温度对球等鞭金藻(Isochrysis sphaerica)生长及其脂肪酸的影响

本研究测定了光照强度为16～58μmol/(m2.s)和15～30℃条件下球等鞭金藻(Isochrysis sphaerica)的生长曲线以及脂肪酸组成和含量。结果表明,在设置的光照强度范围内,光照强度越强,微藻的生长速度越快。光强对各种脂肪酸的含量影响有差异,过低和过高都不利于藻体内多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acids,PU-FAs)的积累。当光强为24μmol/(m2.s)时二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA,C22∶6 n-3)的积累量最高,占总脂肪酸的11.77%。球等鞭金藻的最适生长温度在20～25℃之间,低温条件有利于不饱和脂肪酸的积累。光强20μmol/(m2.s)、温度20℃条件下总不饱和脂肪酸(Total Unsaturated Fatty Acids,TUFAs)含量最高,达64.99%;同样的光强,温度15℃条件下DHA占总脂肪酸的12.19%。可见适宜的光强和温度是利用球等鞭金藻收获PUFAs的关键。

多菌种混合发酵转化秸秆技术的研究及应用进展

农作物秸秆是农业生产的副产品,也是一项重要的生物资源。利用微生物的广泛适应性和多功能性来转化秸秆已日益受到国内外科学研究者重视,特别是多菌种混合发酵是将秸秆纤维素转化为蛋白质、乙醇、乙酸等最具发展前景的方法。文章通过混合菌降解秸秆纤维,转化利用秸秆制蛋白饲料、燃料酒精、农用沼气等方面,对混合菌发酵转化秸秆技术的研究进展进行阐述。混合菌发酵转化秸秆已成为农业综合开发领域的一个亮点,正在朝着多元化,深层次的方向发展。