肝组织胰岛素受体底物1表达及其酪氨酸磷酸化与慢性乙型肝炎病毒感染者胰岛素抵抗的关系

目的研究慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者肝脏组织中胰岛素受体底物1(insulinreceptor substste-1,IRS-1)表达及其酪氨酸磷酸化与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的关系。方法共收集36例肝组织,其中来源于健康对照受试者12例,轻度慢性乙型肝炎(mild chronic hepatitis B,MCHB)未合并IR受试者12例,MCHB合并IR受试者12例。测量受试者的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹血胰岛素(fasting blood insulin,FINS)水平、HBV DNA及乙肝病毒标记物。根据稳态模型计算的胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment,HOMA-IR)界定IR。当HOMA-IR值>2.7定义为IR。采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测各组IRS-1蛋白表达及酪氨酸磷酸化水平。结果①MCHB伴IR组FINS、FBG、HOMA-IR、HBV DNA及HBeAg阳性率分别为(19.48±7.97)μU/mL、(5.20±0.62)mmol/L、(4.37±1.34)%、(5.01±1.33)%和75.00%;MCHB未伴IR组FINS、FBG、HOMA-IR、HBV DNA及HBeAg阳性率分别为(8.49±2.78)μU/mL、(5.05±0.54)mmol/L、(1.86±0.58)%、(4.89±1.52)%和58.33%;正常对照组FINS、FBG及HOMA-IR分别为(7.21±2.71)μU/mL、(4.98±0.36)mmol/L和(1.60±0.63)%。MCHB伴IR组的FINS水平和HOMA-IR值显著高于MCHB未伴IR组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);HBeAg阳性率及HBV DNA载量差异无统计学意义(P>0.05)。②MCHB伴IR组肝组织IRS-1蛋白表达水平为(0.33±0.03),明显低于正常对照组(0.68±0.03)和MCHB未伴IR组(0.64±0.01),差异具有统计学意义(P<0.01)。③MCHB伴IR组肝组织IRS-1蛋白酪氨酸磷酸化程度为(0.17±0.02),明显低于正常对照组(0.56±0.03)和MCHB未伴IR组(0.53±0.01),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV在胰岛素抵抗中的作用尚未明确。肝脏组织中IRS-1蛋白表达及其酪氨酸磷酸化程度降低,可能是HBV感染者发生胰岛素抵抗的分子机制之一。

乙型肝炎病毒对肝脂肪变患者肝细胞固醇调节元件结合蛋白表达的影响

目的探讨HBV对肝脂肪变患者肝细胞固醇调节元件结合蛋白（SREBPs）表达的影响。方法收集我院感染科诊断为CHB合并肝脂肪变的患者55例，根据患者外周血清HBV DNA载量的不同分为3组：A组：HBVDNA≤10^3拷贝／ml的患者（15例）；B组：10^3拷贝／ml〈HBV DNA〈10^5拷贝／ml的患者（18例）；C组：HBVDNA≥10^5拷贝／ml的患者（22例）。将C组抗病毒治疗后HBV DNA≤10^3拷贝／ml的10例患者分为C1组（治疗前）和C2组（治疗后）；将C组抗病毒治疗后HBV DNA≥10^5拷贝／ml的12例患者分为C3组（治疗前）和C4组（治疗后）。用油红O染色观察肝组织脂滴的变化；实时荧光定量PCR检测SREBP-1c及SREBP-2 mRNA的表达；免疫组织化学法检测SREBP-1c及SREBP-2蛋白的表达。多组间比较用单因素方差分析及口检验，配对样本t检验进行抗病毒前后两组间数据的比较。结果（1）A、B、C组脂滴表达的红色积分吸光度值分别为1004．27±218．63、1937．01±401．47、4133．79±389．28，各组间油红O红染程度不同（F=385．69，P〈0．01）；C1、C2、C3、C4组脂滴表达的红色积分吸光度值分别为4020．84±326．64、1012．02±244．89、4189．18±329．21、4121．76±304．09，与C1组比较，C2组油红O红染程度下调，t=22．55，P〈0．01，差异有统计学意义；C4组与C3组比较，差异无统计学意义。（2）与A组比较，B组与C组SREBP-1c mRNA分别上调（1．218±0．130）倍、（1．798±0．118）倍，A、B、C组SREBP-1c mRNA表达水平比较，F=297．47，JP〈0．01，差异有统计学意义。与A组比较，B组与C组SREBP-2 mRNA分别下调95．6％±11．8％、97．2%±15．3％，A、B、C组间SREBP-2mRNA表达水平比较，差异无统计学意义。与C1组比较，C2组SREBP—1cmRNA表达水平下调71．4％±8．1％，t=11．224，P〈0．01，差异有统计学意义；与C1组比较，C2组SREBP-2mRNA表达水平上调（1．034±0．155）倍，差异无统计学意义。与C3组比较，C4组SREBP-1cmRNA表达水平上调（1．012±0．206）倍，差异无统计学意义；与C3组比较，C4组SREBP-2mRNA表达水平下调99．8％±18．3％，差异无统计学意义。（3）A、B、C组SREBP—1c蛋白表达量分别为36257．21±5709．79、50413．47±4989．28、71025．83±6047．13，3组SREBP-1c蛋白比较，F=178．26，P〈0．01，差异有统计学意义；A、B、C组SREBP-2蛋白表达量分别为32913．52±3951．21、32625．91±4025．06、34173．44±5316．25，3组比较，差异无统计学意义。C1、C2、C3、C4组SREBP-1c蛋白表达量分别为69832．16±4941．36、48735．47±5471．41、70871．69±5083．14、68913．32±5343．22，C1组与C2组比较，t=10．260，P〈0．01，差异有统计学意义；C3与C4组比较，差异无统计学意义。C1、C2、C3、C4组SREBP-2蛋白表达量分别为33980．21±4081．80、34011．50±3859．27、33610．12±4761．10、32915．66±5023．61，C1组与C2组比较，差异无统计学意义，C3组与C4组比较，差异无统计学意义。结论HBVDNA可能通过干扰SREBP-1c的表达而参与了肝细胞脂肪变性的形成。

慢性乙型肝炎病毒感染与胰岛素抵抗的相关性

目的探讨慢性HBV感染与胰岛素抵抗（IR）的关系。方法纳入68例慢性乙型肝炎轻度（MCHB）患者为病例组，选择同期无肝炎病毒感染且肝功正常者67例为对照组。采用稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）判定IR，根据HOMA—IR将MCHB组分为伴IR组（HOMA—IR〉2．7）和未伴IR组（HOMA-IR≤2．7）。检测患者肝功能生物化学指标、糖代谢与脂代谢指标、人体质量指数（BMI）、HBV标志物、HBV DNA载量、肿瘤坏死因子α等，并在两组间进行比较。两组间计量资料比较采用独立样本t检验或Mann—Whitney秩和检验，对率的比较采用χ^2检验；采用Spearman秩相关或点双序列相关分析MCHB患者IR的相关因素；采用二元logistic回归法分析MCHB患者IR的危险因素。结果MCHB组患者存在高血清胰岛素血症、高ALT和高HOMA-IR值，分别为11．10（2．90～53．24）μU／ml、46（9～126）U／L和2．44（0．55～11．93），分别高于对照组的7．10（1．20～16．60）μU／ml、13（5～36）U／L和1．61（0．23～3．43），Z值分别为-5．451、-8．211和-5．631，P值均〈0．01。MCHB患者有30例（44．12％）存在IR，伴IR组的ALT和BMI值分别为（66．40±32．85）U／L和（22．16±1．03）kg／m^2，高于未伴IR组的（47．47±32．87）U／L和（21．58±1．24）kg／m^2，t值分别为-2．358和-3．566，P值均〈0．05。在MCHB组中，BMI和ALT与IR呈正相关，相关系数，分别为0．374和0．282，P值均〈0．05。HBV DNA载量与IR无相关性（r-=0．015，P〉0．05）。二元logistic回归分析提示BMI和ALT是MCHB患者IR的独立危险因素，[Exp（B）：1．85，P〈0．01；Exp（B）：1．022，P〈0．05]。结论在慢性HBV感染诱导的轻度肝脏炎症者中IR发生率高，可能与肝功能损害和BMI相关，但与HBV DNA载量无关。