新型吴茱萸碱衍生物抗小细胞肺癌活性效应的初步评价

目的研究吴茱萸碱(evodiamine, EVO)的两种衍生物:硝基吴茱萸碱衍生物(10-nitro evodiamine derivatives, END)与氨基吴茱萸碱衍生物(10-amino evodiamine derivatives, EAD)对小细胞肺癌细胞株H1688的抗癌活性及机制。方法 H1688细胞分别用不同浓度的吴茱萸碱EVO、END、EAD处理24、48、72 h后用MTT法检测其存活率;10μmol/L的EVO、END、EAD处理H1688细胞24 h后,流式细胞术检测其凋亡与周期;同样浓度处理48 h后提取总蛋白,Western blot检测Caspase 12、Caspase 9、Caspase 3、细胞色素C(cytochome C, Cyt C)的表达。结果 MTT结果显示,0.625μmol/L的END或EAD处理24 h后,即可观察到药物对H1688的抑制作用,20μmol/L EVO、END和EAD处理24、48、72 h后,与0μmol/L组存活率相比显著降低。END和EAD处理组H1688存活率分别为16.45%和61.20%(P_(END)=0.000,P_(EAD)=0.046, 24 h)、9.10%和43.37%(P_(END)=0.000,P_(EAD)=0.000, 48 h)、5.24%和29.55%(P_(END)=0.000,P_(EAD)=0.000, 72 h);而EVO处理组存活率为60.81%(P=0.038,24 h)、21.99%(P=0.000,48 h)、18.51%(P=0.000,72 h),其中20μmol/L END对H1688抑制效果最好。10μmol/L的END、EAD处理H1688 24 h后,细胞凋亡率明显升高,凋亡率分别为54.98%(P=0.000)和19.73%(P=0.029),且分别有79.78%(P=0.001)和77.72%(P=0.001)的细胞被阻滞在G_2/M期。END、EAD处理48 h后,与Control组相比,H1688细胞中Caspase 9(P_(END)=0.011,P_(EAD)=0.026)、Caspase 12(P_(END)=0.031,P_(EAD)=0.018)、Caspase 3(P_(END)=0.002,P_(EAD)=0.043)、Cyt C(P_(END)=0.023,P_(EAD)=0.028)等凋亡相关蛋白均上调。与EVO相比,END对Caspase 3(P=0.026)和Cyt C(P=0.002)作用都明显强于EVO,而EAD对Caspase家族与Cyt C的作用则与EVO类似。结论 EVO的两种衍生物END、EAD都对小细胞肺癌细胞株H1688有体外抗肿瘤作用,这种作用呈时间、浓度依赖性,END体外抗肿瘤效果更好。

白果粉对小鼠抗疲劳和抗衰老作用研究

目的:观察白果粉对小鼠运动性疲劳的缓解和延缓衰老的作用。方法:用雄性昆明小鼠研究白果粉抗小鼠运动性疲劳的作用,将小鼠随机分为正常对照组、3个不同剂量(2、4、6 g/kg)白果粉灌胃组,每组10只小鼠。白果粉各灌胃组分别用相应剂量的蒸馏水配制的白果粉混悬液灌胃,正常对照组用蒸馏水灌胃,每天1次,连续给药28天。然后记录小鼠爬杆和力竭游泳的时间,并检测小鼠在不负重情况下游泳后的血中乳酸及尿素氮含量和肝(肌)糖原的水平。用60只10月龄和10只4周龄昆明小鼠研究白果粉延缓衰老的作用,衰老模型通过1000 mg/kg D-半乳糖皮下注射建立,每日1次,共28天。10月龄小鼠被随机分为模型组,白果粉2 g/kg、4 g/kg、6 g/kg3个剂量组,维生素E组,衰老对照组,每组10只;4周龄小鼠作为年轻对照组,各组在造模同时灌胃给药。评价小鼠在空间位置学习后的记忆保持能力,检测血和组织的生化指标,计算胸腺、脾脏指数。结果:白果粉使小鼠爬杆时间和力竭游泳时间明显延长,使血乳酸水平下降,增加肝(肌)糖原含量。白果粉改善了小鼠在Morris水迷宫测试中对空间位置记忆的保持能力。白果粉使血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性升高,血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平降低,脑单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活力下降。白果粉延缓了胸腺、脾脏指数的减小。结论:白果粉具有抗疲劳和抗衰老的作用。