蝎子草醇提浸膏对金黄色葡萄球菌抗菌机制的研究

目的:研究蝎子草醇提浸膏(Girardinia suborbiculata C.J.Chen ethanol extract,GSEE)对金黄色葡萄球菌的抗菌机制.方法:测定蝎子草醇提浸膏对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),通过GSEE对菌体生长曲线、菌体可溶性蛋白的表达和菌体核酸合成等的影响来对GSEE的抗菌机制进行研究.结果:GSEE对金黄色葡萄球菌的MIC为100 mg/mL,可明显抑制金黄色葡萄球菌对数生长期的菌体分裂;SDS-PAGE电泳表明,金黄色葡萄球菌的可溶性蛋白含量在GSEE作用后的条带明显少于对照组;同时,通过DAPI染色显示,GSEE对菌体的核酸合成具有显著抑制作用.结论:GSEE对金黄色葡萄球菌具有较强的抗菌作用,其抗菌机制可能通过抑制菌体可溶性蛋白的表达和菌体核酸的合成等方面来实现抑制金黄色葡萄球菌的生长.

蝎子草抗菌活性成分的研究

目的对蝎子草抗菌活性成分进行研究。方法在蝎子草提取物对金黄色葡萄球菌抑制活性的指导下进行主要抗菌活性成分追踪,应用硅胶柱色谱、薄层色谱、高效液相色谱和高速逆流色谱等方法进行分离纯化,通过波谱学方法进行结构鉴定。结果从蝎子草醋酸乙酯提取物中分离得到两个对金黄色葡萄球菌具有抑制作用的化合物,经鉴定分别为β-谷甾醇(Ⅰ)和对羟基肉桂酸乙酯(Ⅱ),两个化合物对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(MIC)分别为3.4 mg/ml、2.0 mg/ml。结论化合物(Ⅰ)和(Ⅱ)是蝎子草中抗金黄色葡萄球菌的基本活性成分;化合物Ⅱ为首次从该属中分离得到,而且首次发现其对金黄色葡萄球菌具有抑制作用。

PCR-DGGE研究微生物种群中多条带产生原因分析

鸡肠道微生物菌群经PCR-DGGE分析,回收PCR-DGGE分析胶上的一条DNA片段,回收的DNA片段再重复进行2次PCR-DGGE分析,以及分别用PCR反复循环扩增和PCR高保真酶扩增后再进行DGGE分析等方法研究PCR-DGGE分析中多条带产生原因。结果显示PCR-DGGE分析中多条带产生原因可能是作PCR扩增模板的DNA混杂有少量其他DNA片段,多条带现象不易被消除。DGGE分析胶上的DNA片段测序时,将该DNA片段回收、PCR扩增后克隆,提取多个阳性克隆菌的质粒DNA片段,分别与其原目的DNA片段进行DGGE分析,在DGGE分析胶上选取与原目的DNA片段处于同一电泳位置的质粒DNA测序,提高测序的准确性。