Kounis综合征研究进展

Kounis综合征是急性冠状动脉综合征与过敏反应同时并存的一组症候群,临床报道文献较少,多为病例个案报道,缺乏对该病的系统认知,临床易误诊漏诊。为了更好地了解本病,本文拟从Kounis综合征发展史、流行病学特点、发病机制、临床分型与特点及临床诊治等方面作一概述。

猪脱细胞血管基质的制备及其生物学性状检测

背景:目前脱细胞血管基质的制备方法有酶消化法和去污剂法。十二烷基硫酸钠为离子型去垢剂,脱细胞效果强,但易引起较多蛋白纤维损伤,影响血管的结构和力学特性。Triton X-100为柔和的非离子型去垢剂,两者联合应用可减少纤维损伤。目的:采用酶、非离子型和离子型去垢剂联合法制备猪脱细胞血管基质,并检测其生物学性状。设计、时间及地点:对比观察的细胞学实验,于2007-08/2008-05青岛市市立医院心脏中心实验室完成。材料:雄性幼猪1只,取其胸主动脉用于制备脱细胞血管基质。方法:采用含双抗的0.125%胰蛋白酶、1%Triton X-100、1%十二烷基硫酸钠逐步处理猪胸主动脉。主要观察指标:苏木精-伊红染色观察细胞脱除情况。扫描电镜、透射电镜观察细胞脱除情况及胶原纤维和弹性纤维情况。测定脱细胞血管基质中胶原蛋白含量,检测血管脱细胞血管基质的伸长比、极限应力。结果:经该法处理的猪血管内细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好,其胶原蛋白含量和力学性状与新鲜组织无明显差别。结论:酶、非离子型和离子型去垢剂联合法是制备脱细胞血管基质的较好方法,制备获得的脱细胞血管基质生物学性状保持良好。

液氮保存时间对脱细胞血管基质支架材料组织形态及力学特性的影响

背景:血管脱细胞组织基质作为天然生物支架材料的制备与临床应用具有一定的时差,保存条件对其影响逐渐收到人们重视。目的:拟观察不同液氮保存时间对脱细胞血管基质支架材料组织形态及力学特性的影响。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2007-08/2008-05在青岛市市立医院心脏外科实验室完成。材料:健康新西兰兔10只,体质量550~600g,用于制备脱细胞血管基质。方法:采用胰蛋白酶、低渗溶液、化学除垢剂法处理兔胸主动脉制备脱细胞血管基质。根据液氮保存时间的不同将制取的血管随机分为液氮1月组,液氮2月组和液氮3月组;另设新鲜组:未用液氮保存而作为对照。主要观察指标:苏木精-伊红染色、扫描电镜观察各组脱细胞血管基质形态变化,并作力学测试,包括Lagrange应变、Lagrange应力、伸长比和极限应力。结果:苏木精-伊红染色可见新鲜组血管脱细胞组织基质中胶原纤维和弹性纤维保持原来的形态和结构,呈网状排列,细胞已基本去除。液氮保存组光镜下见与新鲜组无明显差异。扫描电镜见新鲜组血管脱细胞组织基质的纤维结构完整,胶原纤维无断裂,为网状和多孔状,孔径为(100~150)×(10~20)μm。液氮保存组胶原纤维结构完整,呈网状排列,胶原纤维无断裂现象,孔径与新鲜组无明显差异。各组力学指标相比,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:不同液氮保存时间对脱细胞血管基质的形态学、组织学以及力学特性方面没有明显影响。

同种异体带瓣主动脉行主动脉根部替换85例随访结果

目的 :随访应用低温保存的同种异体带瓣主动脉行主动脉根部替换术的临床效果。方法 :85例主动脉根部或瓣膜病变的患者行同种异体带瓣主动脉根部替换手术 ,术后随访 1 5～ 91个月观察临床结果。结果 :随访 1 5～ 91( 3 8 9± 13 2 )个月。术后早期病死率 1 2 % ( 1/85 ) ,远期病死率 5 9% ( 5 /85 ) ;与术前比较心功能明显改善 (P <0 0 1) ;术后随访心内膜炎发生率 2 4% ( 2 /85 ) ;生存者中瓣膜无或有轻度反流 84% ( 66/79) ,中度反流16% ( 13 /79)。结论 :同种异体带瓣主动脉根部重建手术效果可靠 ,成功率高且并发症低 ,尤适于治疗心内膜炎造成的瓣膜病。

黄芪对尾加压素Ⅱ诱导的心脏成纤维细胞胶原合成及分泌转化生长因子-β_1的影响

目的观察黄芪注射液对尾加压素Ⅱ(UⅡ)诱导的心脏成纤维细胞合成胶原及分泌转化生长因子(TGF-β1)的影响。方法体外培养乳鼠心脏成纤维细胞,分成3组:对照组、UⅡ组、UⅡ+黄芪组。作用一定时间后,Real-time RT-PCR法测定各组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1基因表达情况,3H-脯氨酸掺入测定胶原合成情况,双抗体夹心ELISA法测定培养上清TGF-β1分泌情况。结果UⅡ可以促进乳鼠心脏成纤维细胞胶原合成,刺激TGF-β1的分泌,黄芪注射液可明显抑制UⅡ的上述作用。结论黄芪可以通过抑制UⅡ诱导的心脏成纤维细胞胶原合成及TGF-β1分泌,延缓心肌纤维化及心脏重构的进展。

不同细胞浓度种植于脱细胞血管基质上的细胞生长方式(英文)

背景:对于组织工程血管而言,如何在平滑肌细胞层上成功获得致密的内皮细胞层是最为关键的。目的:探索不同细胞种植浓度对构建全生物化组织工程血管的影响。方法:先将不同浓度(5×105,5×107L-1)猪血管平滑肌细胞种植在猪脱细胞血管基质上,培养3d后再将不同浓度(5×105,5×107L-1)内皮祖细胞接种在平滑肌细胞-血管基质复合体上,构建片状全生物化组织工程材料。结果与结论:高浓度与低浓度平滑肌细胞在脱细胞血管基质上的细胞生长曲线相似,并且种植在孔板上和在脱细胞基质上的生长曲线亦相似,但低浓度组增殖较慢,覆盖率较低。细胞覆盖率由高到低的顺序为:高浓度内皮祖细胞+含高浓度平滑肌细胞的脱细胞基质>高浓度内皮祖细胞+含低浓度平滑肌细胞的脱细胞基质>低浓度内皮祖细胞+含高浓度平滑肌细胞的脱细胞基质>低浓度内皮祖细胞+含低浓度平滑肌细胞的脱细胞基质,且高浓度内皮祖细胞在脱细胞基质上可形成较为致密的细胞层,呈现出铺路石样生长方式。说明提高细胞接种浓度有利于其在材料表面快速形成致密的细胞层。

三种不同手术方式行同种异体血管主动脉根部置换的临床效果

目的 比较 3种应用低温保存的同种异体带瓣管道行主动脉根部重建术式的近期和远期效果。 方法 85例主动脉瓣膜疾病患者采用同种异体带瓣管道行主动脉根部重建 ,其中 Freehand手术 16例 ,Miniroot手术 4 4例 ,Total aortic root手术 2 5例。 结果 3种术式患者灌注时间、主动脉阻断时间、呼吸机辅助时间和住 ICU时间差别均无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;随访 38.9± 13.2个月 ,Miniroot手术患者主动脉瓣膜中度反流发生率低于其他 2种术式 (P<0 .0 5 )。 结论 用同种异体带瓣管道行主动脉根部重建术治疗主动脉瓣膜疾病 ,3种手术方式均有效 ,其中Miniroot手术术后瓣膜反流的发生率低于其它 2种术式。

组织工程血管基质的制备及保存

背景:为构建全生物化组织工程血管,制备及保存脱细胞血管基质。目的:制备组织工程血管基质,观察其保存于液氮中的可行性。方法:采用胰蛋白酶、低渗溶液、化学除垢剂法处理兔胸主动脉来制备组织工程血管基质,标本作大体、光镜及扫描电镜、透射电镜观察,并将制备的血管基质放入液氮中保存,3个月后取出作扫描电镜观察。结果与结论:经该法处理的兔血管细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好,液氮保存3个月后扫描电镜观察与新鲜基质无明显差别。提示酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法是制备组织工程血管基质的较好方法,制备的血管基质可放入液氮中进行短期保存。

热休克蛋白70对心脏移植大鼠供心心肌生化指标的影响

目的:观察应激情况下产生的热休克蛋白70对心脏移植大鼠供心心肌相关生化指标的影响。方法:实验于2006-04/09在青岛市市立医院中心实验室完成。①实验动物及分组:取成年SPF级雄性Wistar大鼠18只,按随机数字表法分为2组,每组9只。对照组腹腔注射生理盐水0.5mL,注射后24h取离体心脏,灌注HTK心脏保护液,并置于HTK液4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注K-H液2h。实验组腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1μmol/kg(0.53mg/kg),24h后取离体心脏,余处理步骤同对照组。②实验评估:应用全自动生化分析仪测定心肌肌酸激酶、乳酸脱氢酶含量;计算心肌肌酸激酶(乳酸脱氢酶)10min漏出率、心肌含水量;采用羟胺法测定超氧化物歧化酶活性,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量,采用双缩脲法测定组织蛋白含量;采用免疫组织化学法,以染色阳性面积占视野面积的百分比作为心肌组织热休克蛋白70的表达量。结果:18只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①心肌组织热休克蛋白70含量:实验组高于对照组(t=17.96,P<0.01)。②相关生化指标:实验组大鼠心肌肌酸激酶、乳酸脱氢酶10min漏出率、心肌含水量及丙二醛含量显著均低于对照组(t=4.13～15.81,P<0.01),实验组大鼠心肌超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(t=10.89,P<0.01)。结论:热休克蛋白70的高表达能减少氧自由基对供心心肌的损害,是热休克蛋白70发挥其供心心肌保护作用的可能途径之一。

热休克蛋白70对离体大鼠供心心肌细胞的保护作用

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）对离体大鼠供心的保护作用,观察其对供心心肌细胞功能及超微结构的影响。方法Wistar大鼠18只,随机分为2组：对照组腹腔注射生理盐水0.5mL,24h后取心脏灌注HTK心脏保护液,4℃保存3h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2h;实验组腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素（溶于生理盐水中）3.1μmol/kg（0.53mg/kg）,24h后取心脏,处理方法同对照组。测定两组心肌肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率以及心肌水含量（MWC）、HSP70、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的水平。观察心肌细胞光镜结构和电镜下的超微结构。结果实验组HSP70、SOD的含量较对照组明显增高（t=17.96,P〈0.01）;实验组MWC、MDA含量、CK、LDH漏出率较对照组明显降低（t=4.13~15.81,P〈0.01）。实验组心肌细胞光镜下以及电镜下超微结构的损伤程度较对照组明显减轻。结论心肌HSP70高表达对离体大鼠供心心肌细胞具有明显的保护效应。

同种异体带瓣主动脉行主动脉根部置换的临床效果

目的 :探讨应用低温保存的同种异体带瓣主动脉行主动脉根部重建手术的临床效果。方法 :85例主动脉瓣膜病变患者行同种主动脉根部置换手术 ,术后随访观察临床结果。结果 :随访 39± 13(1.5～ 91)个月。早期手术死亡率 1% (1/ 85 ) ,远期手术死亡率 6 % (5 / 85 ) ;与术前比较心功能明显改善 (P<0 .0 5 ) ;术后随访心内膜炎发生率占2 % (2 / 85 ) ;生存者中瓣膜无或有轻度返流 84 % (6 6 / 79) ,中度返流 16 % (13/ 79)。结论 :同种异体带瓣主动脉根部重建手术效果可靠 ,且并发症少。

猪主动脉脱细胞血管基质制备及保存

目的探讨脱细胞血管基质的制备和保存方法。方法采用酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法处理猪胸主动脉制备脱细胞血管基质,标本行苏木精-伊红染色,大体、光镜及扫描电镜、透射电镜观察。并将标本放入液氮中保存,于保存1、2、3月分别取标本用20g/L戊二醛固定,扫描电镜观察。结果经该法处理的猪血管细胞全部脱除,胶原纤维、弹性纤维无断裂,细胞外基质保持完好。液氮保存后1、2、3月扫描电镜观察与新鲜标本无明显差别。结论酶、低渗溶液、化学除垢剂联合法是制备脱细胞血管基质的较好方法,制得的脱细胞血管基质可放入液氮中保存。

同种异体带瓣主动脉移植治疗累及主动脉瓣的感染性心内膜炎临床分析

目的:回顾分析30例应用低温保存的同种异体带瓣主动脉对累及主动脉瓣的感染性心内膜炎的治疗结果。 方法:30例主动脉瓣炎或脓肿患者采用低温保存的同种异体带瓣主动脉行主动脉根部置换手术,术后随访5-86个月观察临床结果。 结果:随访5-86(40.8±15.3)个月。术后早期死亡率3.3％(1/30),远期死亡率6.7％(2/30);与术前比较心功能明显改善(P<0.01);术后随访心内膜炎的发生率占6.7％(2/30);生存者中瓣膜无或有轻度反流81.5％(22/27),中度反流18.5％(5/27)。 结论:同种异体带瓣主动脉移植治疗感染性主动脉瓣炎或脓肿具有较好的疗效。

不同浓度细胞种植脱细胞血管基质上构建组织工程血管

背景:前期研究表明制备的脱细胞血管基质适合平滑肌细胞和内皮祖细胞生长,但是共培养模型中细胞接种密度对血管基质上细胞覆盖率的影响尚不清楚。目的:观察不同浓度度细胞种植在脱细胞血管基质上的生长情况。方法:采用两步法进行细胞种植,先将不同细胞浓度血管平滑肌细胞种植在脱细胞血管基质上,培养3d后再将不同浓度内皮祖细胞接种在平滑肌细胞-血管基质复合体上,构建片状组织工程材料,分别在内皮祖细胞种植后3d、1周时间段获取标本,扫描电镜观察细胞在材料上的生长情况。结果与结论:血管平滑肌细胞和内皮祖细胞在脱细胞基质表面生长良好。不同浓度细胞在基质上的排布不同;提高接种的浓度有利于在材料表面快速形成致密的细胞层。提示采用两步法以合适的浓度种植细胞于脱细胞基质上,可以构建组织工程血管。

隔膜型主动脉瓣下狭窄的外科治疗

1992年3月～1996年8月,我们对6例隔膜型主动脉瓣下狭窄患者采用手术治疗,效果满意。现报告并分析如下。 临床资料:本组男2例,女4例,年龄5～12岁。其中单纯隔膜型主动脉瓣下狭窄4例,合并室间隔缺损2例,均经心脏超声检查确诊,5例术前心功能Ⅰ级,1例Ⅲ级。6例术前胸骨左缘2～4肋间均闻及3～5级粗糙收缩期杂音,4例心电图示电轴左偏。4例术前心脏超声估测跨隔压差8.3～10.3kPa。本组6例均在中度低温麻醉体外循环下行心脏直视手术。

不同心肌保护液对供心移植保护作用的对比研究

目的 研究改良心肌保护液对短暂常温热缺血供心移植后的保护作用。方法 18只家猪随机分为 3组 ,对照组 (C组 ) :不缺血下供心低温灌注St.Thomas液后切取 ,4℃保存 4h后行原位心脏移植 ;热缺血组 (W组 ) :供心灌注低温St.Thomas保护液前常温缺血 5min ,4℃保存 4h后行原位心脏移植 ;改良心肌保护液组 (E组 ) :供心常温缺血 5min后用改良保护液灌注和保存 ,4℃保存 4h后行原位心脏移植。以心脏排出量 (CO)、心肌含水率、丙二醛(MDA)和ATP含量、肌钙蛋白I(cTnI)和心脏超微结构作为观察指标。结果 心肌含水率、MDA含量和cTnI含量E组明显低于W组 (P <0 .0 5 ) ;CO和ATP含量E组明显高于W组 (P <0 .0 5 ) ;E组与C组相比无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;超微结构 ,E组损伤较W组明显减轻。结论 改良心肌保护液可有效改善供心因短暂常温热缺血而造成的结构和功能损害。

大鼠外周血内皮祖细胞体外向内皮细胞诱导分化时的表型变化特征

目的研究大鼠外周血内皮祖细胞（EPC）体外分化为内皮细胞的过程中,干细胞标志物以及内皮细胞表型的变化。方法取SD大鼠外周血,应用Ficoll密度梯度离心的方法获得单个核细胞,体外培养于纤连蛋白处理的培养皿中,同时应用VEGF和bFGF诱导,使之向内皮细胞转化,用免疫组织化学方法检测细胞CD31、CD34、Flk-1、vWF在第1～7天的表达。结果贴壁细胞的CD31、CD34、Flk-1、vWF在不同时段呈不同程度的表达。干细胞的标志物CD31、CD34的表达逐步减弱,第6天时消失。内皮标志物Flk-1和vWF表达逐步增强,第7天时达100%。结论大鼠外周血干细胞向内皮祖细胞分化的过程中,干细胞标志物逐渐消失,内皮细胞的表型逐步显现。

肾缺血预处理对兔未成熟心肌Bcl-2,Bax,Fas蛋白表达的影响

目的:探讨肾缺血预处理(R IP)对兔未成熟心肌细胞凋亡和Bcl-2,Bax,Fas蛋白表达的影响.方法:24只幼兔采用Langendorff离体心脏灌注模型,随机分为正常对照组(C)、心脏缺血/再灌注组(I/R)和肾缺血预处理组(RIP),每组8只,测定各组未成熟心肌细胞凋亡和Bcl-2,Bax,Fas蛋白表达.结果:RIP组与I/R组比较,心肌细胞凋亡率明显减少[(4.19±1.13)%vs(12.30±2.10)%,P<0.01],DNA片段梯光密度明显减少(57 350±1765vs135 200±3370,P<0.01),Bcl-2表达增多(33 525±1026vs12 385±860,P<0.01),Bax(8640±768vs32 472±1128,P<0.01)和Fas(8936±912vs32 100±1260,P<0.01)表达明显减少.结论:RIP可减少缺血再灌注后兔未成熟心肌细胞凋亡和影响Bcl-2,Bax,Fas蛋白的表达.