含LacZ重组逆转录病毒的制备及其在NIH_3T_3细胞的表达

构建了含有 3.7kbLacZ的重组逆转录病毒载体 ,转染包装细胞系PA317后 ,经G418筛选 ,得到了G418抗性的产毒细胞系 ,用收获的含有重组逆转录病毒粒子的浓缩病毒上清 ,感染NIH3T3细胞 ,经X_gal染色检测 ,发现表达了LacZ的NIH3T3细胞呈蓝色。

重组逆转录病毒浓缩方法研究

选择含有新霉素磷酸转移酶Ⅱ (Neor)的重组逆转录病毒载体 ,通过包装细胞进行包装 ,得到了含有重组逆转录病毒粒子的病毒溶液 ,该病毒溶液分别采用差速离心和滤膜截留两种方法进行浓缩 ,浓缩前、后的病毒溶液体外感染靶细胞NIH3T3以测定其滴度。结果显示 :差速离心法的浓缩效率要优于滤膜截留法的浓缩效率 ,其浓缩效率能达到 34 5%。

重组逆转录病毒介导的neo^R基因在公鼠生殖系细胞的转移

将感染滴度为 10 6cfu/ m L、携带新霉素磷酸转移酶 (neo R)基因的重组逆转录病毒与台盼蓝、polybrene按一定比例配制成注射液 ,单侧睾丸注入 14～ 16日龄公鼠曲细精管以体内感染精原干细胞 ,进行重组逆转录病毒 -精原干细胞介导的基因转移研究。注射后 45 d,采集公鼠精液 ,进行精液品质与 PCR检测。结果表明 ,在优化的注射条件下 ,曲细精管内注射重组逆转录病毒后 ,不会干扰小鼠精子的正常发育能力 ,并能够将外源基因整合到精子基因组 ,从而首次通过重组逆转录病毒成功地实现了 neo

重组逆转录病毒载体系统的建立及其感染滴度的研究

选择新霉素磷酸转移酶II(NeoR)做为标记基因 ,将重组逆转录病毒载体经包装细胞包装后得到的重组病毒浓缩后 ,应用该重组逆转录病毒载体系统体外感染靶细胞NIH3T3以测定其滴度 ,其滴度可达到 1 0 6。

中药穴位贴敷治疗ICU肠内营养患者腹泻临床观察

目的:探讨中药穴位贴敷治疗ICU肠内营养患者腹泻的临床效果。方法:选择重症监护室(ICU)收治的给予肠内营养并出现腹泻等并发症的患者共186例,根据按入院病历号单双号分为2组各93例,对照组给予鼻饲双歧三联活菌胶囊和蒙脱石散,治疗组在此治疗方案的基础上于天枢、足三里、上脘采用中药(丁香、吴茱萸、细辛)进行穴位贴敷,治疗观察周期为14天。结果:治疗后治疗组总有效率91.4%,对照组82.8%,治疗组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后治疗组血清白蛋白与转铁蛋白含量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组机械通气时间、住ICU时间和住院时间都少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);治疗组在第5、7、14天腹泻程度评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:中药穴位贴敷治疗ICU肠内营养患者腹泻能促进患者的康复,有利于机体营养状况的改善。

小学语文教学中培养学生阅读能力策略探讨

新的教学改革要求提出在小学的教学中教师要注重学生能力的培养,学生是课堂教学的主题,小学教学应该是围绕学生开展的。在小学语文的教学中阅读占有重要的地位,教学要激发学生的阅读兴趣,培养学生的阅读能力,提升学生的文化内涵,拓展文学视野,引导学生自主阅读,营造轻松和谐的课堂氛围,提升阅读教学的质量。