miR-491-5p靶向CCL22对舌鳞状细胞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的研究miR-491-5p对舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法RT-qPCR检测人正常口腔角质细胞培养NHOK、人舌癌细胞TCA8113、UM1、SCC1中miR-491-5p、趋化因子配体(CCL)22的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-491-5p组(转染miR-491-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-491-5p组(转染anti-miR-491-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-CCL22组(转染si-CCL22)、miR-491-5p+pc DNA组(共转染miR-491-5p mimics和pc DNA)、miR-491-5p+pc DNA-CCL22组(共转染miR-491-5p mimics和pc DNA-CCL22),用脂质体法转染至TCA8113细胞;Western印迹检测细胞中CCL22的蛋白表达;噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;双荧光素酶报告实验检测细胞中miR-491-5p与CCL22的结合力;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长。结果与NHOK组相比,TCA8113组、UM1组、SCC1组舌鳞状细胞癌细胞中miR-491-5p mRNA表达明显降低,CCL22 mRNA表达和蛋白表达均明显升高(P<0.05)。其中TCA8113细胞的变化最大,故选用该细胞用于后续研究。与miR-NC组相比,miR-491-5p组TCA8113细胞miR-491-5p mRNA表达显著升高,在48、72 h时,细胞增殖显著降低,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05)。miR-491-5p的5′UTR端存在7个与CCL22的3′UTR端互补的核苷酸序列。与miR-NC组相比,miR-491-5p组WT-CCL22细胞的荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。与anti-miR-NC组CCL22蛋白(0.99±0.04)相比,anti-miR-491-5p组(2.01±0.14)显著升高,与miR-NC组CCL22蛋白(1.00±0.66)相比,miR-491-5p组(0.38±0.01)显著降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-CCL22组TCA8113细胞CCL22蛋白表达明显降低,在48、72 h时,细胞增殖明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-CCL22组肿瘤组织CCL22蛋白表达明显降低,肿瘤质量和体积也均明显降低(P<0.05)。与miR-491-5p+pc DNA组相比,miR-491-5p+pc DNA-CCL22组TCA8113细胞中miR-491-5p mRNA表达明显降低,在48、72 h时,细胞增殖明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。结论miR-491-5p可调控舌鳞状细胞癌细胞的增殖和凋亡。

论创新性金融产品和服务的金融监管

要实现金融体系的稳健性,就必须对金融业实施有效监管。金融监管的历史表明,贸然实施自由化必然招致金融风险和危机,审慎监管才是永恒主题和"固定规则"。中国金融监管当局坚持审慎监管的立场,从而为经济社会发展营造了良好的金融生态环境。有效遏制银行理财和P2P网络借贷的违规操作行为以及违法犯罪活动,是目前中国金融监管的重要现实任务。

创设问题情境,构建高中数学高效课堂

问题既是驱使学生展开一切学习与探索活动的源泉和动力,同时也是联系师生双边情感的最佳纽带。在高中数学教学中,教师 可以通过问题情境的创设,使学生产生认知上的冲突,引发学生的学习兴趣与探究欲望,从而推动接下来教学活动的顺利开展。下面,笔 者就立足自身教学实践与感悟,对高中数学教学中问题情境的创设方法作以分析探讨,旨在进一步激活数学教学活力,推动数学高效课堂 的构建与形成。