NB4和HL-60细胞诱导的脐血T细胞TCR Vβ基因谱系分析

目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族的利用情况,并用基因扫描分析其克隆性特点。结果:诱导前脐血T细胞表达20个TCR Vβ亚家族,诱导后的T细胞所表达的TCR Vβ亚家族随培养时间增加而逐渐减少,且诱导组呈现出克隆趋势或寡克隆增殖特点。两种细胞诱导后10 d均可见Vβ1的克隆增殖出现变化,此外,NB4诱导的T细胞出现Vβ15,而HL-60诱导的T细胞则出现Vβ23的克隆增殖情况。结论:NB4细胞和HL-60细胞可诱导脐血TCR VβT细胞克隆性增殖,此优势表达的克隆性T细胞可能与特异性抗原介导的细胞免疫反应有关。

PML-RARα多肽诱导脐血TCR VβT细胞增殖研究

目的了解PMLRARα多肽诱导脐血T细胞的T细胞受体(TCR)Vβ谱系表达和克隆性情况。方法以不同浓度(16.7μg/mL,33.3μg/mL或50μg/mL)的PMLRARα多肽联合IL2、抗CD3单抗以及抗CD28单抗诱导脐血T细胞增殖,利用RTPCR基因扫描技术分析诱导后第3、6、9、12天后的脐血TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果限制性表达和克隆性增殖TCRVβ亚家族T细胞可见于PMLRARα多肽诱导后脐血T细胞。结论PMLRARα多肽可在体外诱导脐血T细胞呈克隆性增殖,此优势增殖的克隆性T细胞可能具有特异性细胞毒作用。

PML-RARα/pIRES和PML-RARα/pSecTag重组载体的构建和鉴定

目的构建PML-RARα基因重组表达质粒,为发展PML-RARα基因疫苗提供实验依据。方法利用RT-PCR方法从急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞中扩增出465bp的位于PML-RARα融合基因的框内结构的片段,克隆至真核表达载体pIRES和分泌载体pSecTag后,经酶切和序列分析鉴定重组质粒的构建情况。结果经酶切鉴定和序列测定表明,PML-RARα目的基因已正确插入真核表达载体中,构成了目的重组载体。结论成功构建了PML-RARα/pIRES和PML-RARα/pSecTag重组真核表达质粒,可进一步用于PML-RARα基因疫苗的实验研究。

PML-RARα融合基因及其诱导特异性免疫应答

PML-RARα融合基因通过其转录抑制作用而诱发APL已基本得到认可,但其引发APL的机制是错综复杂的,在PML-RARα融合基因的致病过程中,必须有其他因素的共同参与才能导致APL.同时PML-RARα融合蛋白上存在着抗原性,PML-RARα多肽可诱导特异性免疫应答,为免疫治疗的研究提供了可能性.

司美格鲁肽联合胰岛素治疗2型糖尿病的临床疗效及安全性观察

目的 研究司美格鲁肽联合胰岛素治疗2型糖尿病(T2DM)的临床疗效及安全性。方法 选取接受胰岛素注射治疗仍血糖控制较差的100例T2DM患者,随机分为对照组和研究组各50例。对照组采用常规胰岛素治疗,研究组采用司美格鲁肽联合胰岛素治疗。对比两组治疗前后血糖指标[空腹血糖值(FPG)、餐后2 h血糖值(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]水平、血脂指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)]水平、胰岛功能指标[胰岛素分泌指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]水平、生活质量,并对比两组不良反应。结果 治疗后,研究组FPG、2hPG、HbA1c、TC、TG水平均低于对照组,HOMA-β水平高于对照组,HOMA-IR水平低于对照组,生活质量评分高于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生比较,无显著差异(P>0.05)。结论 司美格鲁肽联合胰岛素治疗T2DM可有效降低血糖、血脂,改善患者胰岛功能,提高生活质量,且用药安全性好。

CML患者CD4^+和CD8^+ T细胞的TCR Vβ基因谱系和克隆性分析

目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4+和CD8+T细胞中TCRVβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4+和CD8+细胞TCRVβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步经基因扫描分析其克隆性。结果:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞分别表达部分(1～21个)Vβ亚家族,均以Vβ13的表达率最高,其次为Vβ9,多数患者的一些Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖,主要出现于CD8+细胞中,分别以Vβ21(CD4+)和Vβ11(CD8+)亚家族的克隆性增殖多见。结论:CML患者外周血CD4+和CD8+细胞的TCRVβ谱系均存在限制性分布,患者存在的克隆性增殖CD4+和CD8+T细胞可能与宿主抗CML抗原反应有关,它们可能在抗CML效应中起主要作用。

PML-RARα和hGM-CSF双基因表达载体的构建

目的:构建急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα基因与人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因真核双表达载体,为利用DNA疫苗治疗APL奠定基础。方法:利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段,通过PCR从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,并分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点(MCS)A和B中,构建真核双表达载体。利用酶切和序列分析方法验证所构建载体的正确性。结果:NheI/M luI和XbaI/SalI双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hGM-CSF基因,且序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。结论:成功构建了含有PML-RARα基因及hGM-CSF基因的真核双表达载体。

PML-RARα多肽和NB4细胞体外诱导CTL细胞杀伤活性分析

目的了解PML-RARα多肽和NB4细胞体外诱导体外诱导增殖的T细胞的特异性细胞毒作用.方法采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,经丝裂霉素C处理的NB4细胞或PML-RARα多肽(LSSCITQGKAI-ETQSSSSEE)作为刺激原体外诱导脐血单个核细胞增殖.利用LDH方法检测诱导后T细胞的细胞毒性.结果PML-RARα多肽诱导组第10d和第15d T细胞对NB4细胞的杀伤活性为:49.65±6.7%(p<0.01)和73.13±8.42%(p<0.01),NB4细胞诱导组第10d和第15d T细胞对NB4细胞的杀伤活性为:53.33±8.82%(p<0.01)和74.46±9.57%(p<0.01),而无诱导组的第10d和第15d T细胞对NB4细胞的杀伤活性为:15.93±9.25%和38.19±10.54%,前两组T细胞对NB4细胞的杀伤作用均明显高于对照组.结论PML-RARα多肽和NB4细胞体外可诱导出特异性T细胞,他们对表达PML-RARα的NB4细胞具有选择性杀伤作用.

外周血NLR、PLR在2型糖尿病周围神经病变辅助诊断中应用价值

目的探讨外周血NLR、PLR在2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)患者中的辅助诊断价值。方法回顾性分析自2021年3月至2022年3月我院内分泌科收治的130例T2DM患者(根据患者是否并发DPN将其分为DPN组65例和DM组65例)和体检中心的65例健康体检者(对照组)的临床资料。测定三组患者外周血常规并计算出中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹胰岛素(FINS)水平,进行NLR、PLR与HbA1c、FPG、2 h PG、FINS相关性分析,绘制ROC曲线,评价NLR、PLR指标在2型糖尿病周围神经病变辅助诊断中的价值。结果DPN组和DM组HbA1c、FPG、2 h PG均高于对照组,FINS低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);DPN组NLR、PLR高于DM组和对照组,DM组NLR、PLR高于对照组,P<0.05为差异有统计学意义;DPN组和DM组NLR、PLR水平与FINS无相关性(P>0.05),而NLR、PLR与HbA1c、FPG、2 h PG呈正相关(P<0.05)。NLR、PLR诊断2型糖尿病周围神经病变患者的受试者工作特征曲线下面积分别为0.712、0.631,最佳临界值分别为1.795、89.245。结论NLR、PLR对2型糖尿病周围神经病变早期具有辅助诊断价值,且可作为2型糖尿病周围神经病变发生、进展、预后的监测指标。

外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值与2型糖尿病肾病患者肾损伤相关性及早期诊断效能研究

目的:探究外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值与2型糖尿病肾病(T2DN)患者肾损伤相关性及早期诊断效能。方法:研究对象选取于2021年6月-2022年3月在赣州市赣县区人民医院内分泌科住院的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者70例及T2DN患者130例。将T2DM患者纳入C组,根据尿白蛋白/肌酐比值(urine albumin creatine ratio,UACR)水平将T2DN患者分为A组、B组,各65例,同期在本院体检健康者105例作为D组。观察四组中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、肌酐(creatinine,Cr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿酸(uric acid,UA)、胱抑素C(cystatin C,Cys C)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)表达情况,并分析NLR与其他指标的相关性及对T2DN的早期诊断效能。结果:各组NLR、HbA1c、Hcy比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且A组、B组、C组NLR、HbA1c、Hcy、Cr、BUN、UA显著高于D组,A组、B组Cys C、Hcy显著高于C组,A组NLR显著高于B组、C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组Cr、BUN、UA比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且A组、B组Cr、BUN、UA显著高于C组,A组Cr、BUN、UA显著高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,NLR与CR、BUN、UA呈强相关,与Cys C有一定相关性(P<0.05)。ROC曲线显示,当NLR取值为2.625时其取得最大曲线下面积(AUC),敏感度=88.50%,特异度=84.30%,AUC=0.590。结论:T2DM患者NLR呈现升高趋势,合并DN患者,随着其病情进展NLR表达持续升高,且与肾功能相关指标呈现相关性,NLR在T2DN患者辅助诊断及预后中表现出一定价值。

跨过十五岁的门槛

当你与一个人四日相对时．你会有什么反应?心动7恶心?亦或是逃避？

甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗甲亢的效果观察

目的 观察甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗甲亢的临床疗效。方法 以2017年4月~2019年3月我院接收的甲亢患者92例为研究对象,随机分为对照组和研究组各46例。对照组给予甲巯咪唑治疗,研究组给予甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗。比较两组治疗效果、甲状腺激素指标和不良反应。结果 对照组治疗总有效率明显低于研究组(P<0.05);对照组治疗后甲状腺激素指标明显高于研究组(P<0.05);对照组治疗后不良反应发生率高于研究组(P<0.05)。结论 甲巯咪唑联合普萘洛尔治疗甲亢疗效显著,可有效改善患者病情,减少不良反应,临床价值显著。

APL患者外周血TCR V_βT细胞克隆性增生特点

目的了解急性早幼粒细胞白血病(APL)患者TCRVβ亚家族T细胞的分布及其克隆性.方法利用RT-PCR和基因扫描技术分析21例APL患者外周血单个核细胞的TCRVβ24个亚家族基因的CDR3长度,10例正常人作为对照.结果 21例患者外周血T细胞所表达的Vβ亚家族数量差别很大,2～21个Vβ亚家族不等,其中,以Vβ2(71.4%),Vβ15(61.9%)和Vβ5(57.1%)出现频率较高,而Vβ10和Vβ14出现频率最低(14.3%).除2例外,患者外周血均可检测到某些Vβ亚家族的克隆性T细胞,主要为Vβ12,Vβ21和Vβ23克隆性T细胞.结论 APL患者外周血Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布特点,并存在克隆性增生的T细胞,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性免疫反应.

正清风痛宁经皮透药联合片剂治疗痛风性关节炎的临床研究

目的:探究正清风痛宁经皮透药联合片剂治疗痛风性关节炎的临床效果。方法:选取我院2021-08~2023-01月就诊的痛风性关节炎患者60例,经Excel建立随机数字表法分为联合组(n=30)和对照组(n=30),联合组采用正清风痛宁注射经皮透药+正清风痛宁缓释片治疗,对照组采用常规西药治疗,比较两组患者临床疗效、中医症状评分、生化指标[血尿酸(UA),血沉(ESR),超敏C反应蛋白(hs-CRP),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)]和不良反应情况。结果:治疗后联合组临床总有效率96.67%高于对照组73.33%(P<0.05);治疗后两组关节肿胀、关节疼痛、活动受限、压痛、肤色暗紫等中医症候积分均下降,且联合组低于对照组(P<0.05);治疗后两组血尿酸(UA),血沉(ESR),超敏C反应蛋白(hs-CRP),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)均下降,且联合组低于对照组(P<0.05);治疗期间两组患者发生胃肠道症状、发热、皮疹、肝肾功能异常等总不良反应概率比较无明显差异(P>0.05)。结论:正清风痛宁经皮透药联合片剂治疗痛风性关节炎能减少尿酸的产生,降低炎症反应强度,有效缓解临床症状,是一种较为安全有效的治疗方法。