探讨高表达肿瘤抗原基因OVA66对WISH细胞生物学特征的影响

目的分析转染OVA66基因WISH细胞的生物学特征变化,探讨该基因的功能。方法采用脂质体方法将重组真核表达载体pcDNA3.1-OVA66转染正常人羊膜细胞系WISH,经G418稳定筛选、克隆和扩增。采用RT-PCR、Western blotting和免疫荧光等方法检测目的基因及其蛋白的表达,通过电镜分析细胞超微结构,体外侵袭实验检测细胞生长特性和侵袭能力,软琼脂克隆形成实验检测细胞的克隆性生长能力,并应用基因芯片技术检测相关基因差异表达。结果RT-PCR检测显示,转染pcDNA3.1-OVA66细胞OVA66基因呈高表达;Western bloting显示OVA66蛋白处出现明显的条带;电镜检测表明该基因可明显增强WISH细胞增殖能力;体外侵袭实验显示,该基因可增强WISH细胞的侵袭转移能力;软琼脂克隆形成实验表明OVA66基因可以促进单克隆性生长能力;基因芯片提示,该基因高表达影响某些基因的异常表达。结论提示OVA66基因高表达可促进细胞的增殖,利于肿瘤的侵袭和转移。

卵巢癌基因治疗的研究现状及进展

随着分子生物学、免疫学以及相关学科的发展,基因治疗可望成为治疗恶性肿瘤的重要方法,目前基因治疗应用于卵巢癌的临床前实验研究已取得较大进展,给卵巢癌特别是晚期患者的治疗带来新的希望。卵巢癌基因治疗的方法主要有基因增补法、基因矫正法、抗血管形成基因治疗、RNA干扰基因治疗等。现综述近几年卵巢癌基因治疗的研究进展。

人角膜缘干细胞初步建系研究

目的 :探讨建立人角膜缘干细胞系 ,为组织工程研究提供足够的细胞储备。方法 :取健康人角膜缘深部色素区组织块 ,经消化后 ,在含有RPMI- 1 6 4 0、2 0 %胎牛血清的培养瓶和以羊膜细胞外基质为培养载体的培养皿中分别进行体外培养 ,并对连续传代的细胞行光镜、扫描电镜观察 ,比较细胞形态的变化并进行细胞计数与冻存处理。结果 :人角膜缘干细胞具有人上皮细胞培养的特性 ,在培养液中传 33代后 ,细胞仍然保持旺盛的分化、增殖能力 ,并且更适宜在羊膜细胞外基质上生长 ;目前我们冻存细胞的复苏率为 82 .2 %。结论 :将人角膜缘干细胞经体外培养 33代并逐代冻存后初步建立了人角膜缘干细胞系。