蛇毒降纤酶的主要药理作用

蛇毒中 “凝血酶样酶”（ Ｔｈｒｏｍ ｂｉｎｌｉｋｅ Ｅｎｚｙｍ ｅ， Ｔ Ｌ Ｅ） 由中国卫生部定名为降纤酶 （ Ｄｅｆｉｂｒａｓｅ， Ｄｆ）。类同生理凝血酶 （ Ｔｈｒｏｍ ｂｉｎ， Ｔｂ） 能降解血浆纤维蛋白原 （ Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ， Ｆｇ）， 但只解离 Ｆｇ 结构的肽链 Ａ， 而不象生理凝血酶能同时解离肽链 Ａ 和肽链 Ｂ； 经 Ｄｆ降解的 “脱肽链 Ａ 纤维蛋白”是可溶性单体， 不接受血中稳定因子 （第十三因子， ⅩⅢ Ｆ） 的催化交联， 易被血中溶纤酶 （ Ｐｌａｓｍ ｉｎ， Ｐ１） 迅速消溶并被吞噬细胞所消除， 不产生 Ｄ Ｉ Ｃ现象； 蛇毒 Ｄｆ的直接效果是降低血浆纤维蛋白原在血中的含量， 从而降低血液粘度， 得以疏畅血流， 用于防治血液高粘滞伴发的血管闭塞性疾病； 蛇毒 Ｄｆ能激发组织溶纤酶原激活物 （ｔ Ｐ Ａ） 的释放， 促使溶纤酶原转变为有活性的溶纤酶， 能使纤维蛋白降解产物 （ Ｆ Ｄ Ｐ） 得以消除， 使血栓崩解。蛇毒 Ｄｆ能阻抑血小板的聚集从而延缓血栓的形成。

广西眼镜蛇毒细胞毒素的分离及对人鼻咽癌等细胞抑制作用的研究

目的 探讨广西眼镜蛇毒细胞毒素对人鼻咽癌细胞(CNE)等多种癌细胞株的抑制作用。方法 经SephadexG 5 0 ,CM SepharoseCL 6B层析法从广西眼镜蛇毒中分离纯化获得细胞毒素 (CTX) ,采用MTT检测CTX对癌细胞株体外培养抑制作用 ,探索量效时效关系。结果 从广西眼镜蛇毒中分离到一种细胞毒素单一组分 (CTXCM 5 )对体外培养的人鼻咽癌细胞株 (CNE)、淋巴瘤细胞株 (YAC)、人宫颈癌细胞株 (HELA)和卵巢癌细胞株 (Ho8990 )的抑制有明显的剂量依赖关系 ,作用 48h的IC50 分别为 1 84,0 75 ,1 84和 2 5 9mg·L-1;随作用时间的延长 ,CTXCM 5对CNE细胞株作用最为明显 ,作用 3h和 2 4h的IC50 分别为 4 78和1 0 4mg·L-1。结论 CTXCM 5对体外培养的癌细胞株有较强的抑制作用。

α-银环毒素-转铁蛋白偶联物镇痛作用的研究

目的研究α-银环毒素 -转铁蛋白偶联物镇痛作用。方法应用生物素 -亲和素桥联作用 ,使α-银环毒素 (α-BGT)与转铁蛋白 ( transferrin)偶联 ,形成偶联物 ( Tf- α- BGT)。采用小鼠热板法测定 Tf- α- BGT的镇痛作用以及阿托品、甲基阿托品对其镇痛作用的影响。用荧光示踪实验观察其在中枢神经系统 ( CNS)中的结合位点。结果 Tf- α- BGT可通过血脑屏障产生中枢镇痛作用 ,阿托品能部分拮抗其镇痛作用 ,甲基阿托品对其镇痛作用的影响无显著差异。结论 Tf-α- BGT经受体转运透过血脑屏障产生中枢性镇痛作用 ,该镇痛作用可能与 Ach

眼镜蛇神经毒素低分子量水解物的镇痛研究

眼镜蛇神经毒素（αｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ 或 Ｎ Ｔ） 经胃液水解后超滤得分子量＜ ３ ０００ ｕ 低分子量αｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ 胃液水解物 （αｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ ｆｒａｇｍ ｅｎｔ， Ｎ Ｔ Ｆ）。该低分子量产物在小鼠热板及大鼠电尾嘶叫测痛实验， 都显示出明显的镇痛作用，并有剂量—效应关系。 Ｎ Ｔ Ｆ毒性比 Ｎ Ｔ 明显降低， Ｎ Ｔ Ｆ的镇痛显效时间比 Ｎ Ｔ 提前， 维持时间长，不产生耐受现象。

眼镜蛇神经毒素中枢性镇痛作用脑内受体的研究

目的 :探讨纯化的眼镜蛇神经毒素 (α- Cobrotoxin,α- CBT)中枢性镇痛作用的有关受体 ,为研究α- CBT的中枢镇痛作用机理提供依据。方法 :给大鼠腹腔注射阿托品 1m g.kg- 1或纳洛酮 3m g.kg- 1后 ,再向大鼠中脑导水管周围灰质 ( PeriaqueductalGray,PAG)微量注射 2 g/ L的α- CBT生理盐水溶液 0 .5μl (相当于 5μg.kg- 1 ) ,用光辐射甩尾法观察大鼠的痛阈变化。结果 :阿托品能明显拮抗 α- CBT的中枢镇痛作用 ,其痛阈提高抑制率为 91%。纳洛酮仅能轻度降低 α- CBT的中枢镇痛作用 ,痛阈提高抑制率为 18%。结论 :α- CBT的中枢性镇痛作用与中枢乙酰胆碱能系统密切相关 。

广西眼镜蛇蛇毒细胞毒素的抗肿瘤作用

目的 了解广西眼镜蛇毒细胞毒素 (CTX )的抗肿瘤作用。方法 采用MTT法检测CTX对人鼻咽癌细胞株(CNE)、淋巴瘤细胞株 (YAC )、S180 癌细胞株、人宫颈癌细胞株 (HELA )和卵巢癌细胞株 (Ho8990 )体外细胞毒作用 ,同时应用动物移植性肿瘤的体内试验法 ,观察CTX对S180 载瘤小鼠 (S180 )和CNE的抑瘤作用及其生命延长率。结果 CTX对上述体外培养的肿瘤细胞有明显的细胞毒效应 ,作用 2 4h的半数抑制浓度分别为 1.0 4,0 .5 0 ,1.82 ,1.76和 1.0 5 μg/ml ;CTX对小鼠肿瘤有明显的抑制作用 ,抑瘤率为 12 %～ 3 7% ,呈明显量效关系。结论 CTX对体外培养的癌细胞株有较强的抑制作用 。

眼镜蛇神经毒素中枢性镇痛作用的研究

研究眼镜蛇神经毒素 α- Cobrotoxin的中枢性镇痛作用。方法 :给大鼠中脑导水管周围灰质 (Periaqueductal Gray,PAG)注射微量 α- Cobrotoxin,采用热辐射甩尾法观察中枢性镇痛作用。结果 :给予大鼠 PAG分别匀速注射 0 .5、1和 2 g/ L 3个浓度的 α- Cobrotoxin生理盐水溶液各 0 .5 μl(相当于 1.2 5～ 5 μg/ kg) ,出现痛阈明显升高 ,2 0 m in达峰值 (痛阈最大提高2 47.5 %以上 ) ,与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :α- Cobrotoxin具有很强的中枢性镇痛作用。

山莨菪碱作为常规药治疗毒蛇咬伤的研究报告(英文)

山莨菪碱是我国首先从茄科植物唐古特莨菪中分离出的一种生物碱， 是改善微循环衰竭的一种特效药物， 特别是在防治蛇伤 Ｄ Ｉ Ｃ或急性肾衰的病例往往收到意想不到的好结果， 另外， 该药在抢救过程中大剂量 ５００ｍ ｇ／ｄ（是普通剂量１０ｍ ｇ 的 ５０ 倍） 使用而未见明显副作用， 因此， １９８７ 年以来我们常规使用山莨菪碱治疗 （重症者配合抗蛇毒血清） 各种毒蛇咬伤７９７ 例， 均收到明显效果， 认为山莨菪碱是防治蛇伤血液毒引起 Ｄ Ｉ Ｃ 出血、急性肾衰、微循环衰竭、 Ｍ Ｓ Ｏ Ｆ的有效药物， 并可减轻神经毒引起的气道分泌物阻塞、提高血氧分压， 减轻缺氧对大脑的损害，竟争保护胆碱能受体、减轻神经毒性、加快自主呼吸恢复的功能。

广西1990年蛇伤流行病学研究

为摸清广西1990年蛇伤发病情况,对广西东、南、西、北、中的5市16个县的13家医院以及18个乡进行了蛇伤流行病学调查。蛇伤人数为993例,其中男性732例(73.7%),女性261例(26.3%),死亡率为2.7%,致残或留有后遗症者73例(7.4%).致伤蛇种按发生率依次为眼镜蛇(30.5%)、竹叶青(20.2%)、烙铁头(13.3%)、银环蛇(11.6%)、五步蛇(6.9%)、蝰蛇(4.9%)、金环蛇(2.9%)、眼镜王蛇(1.4%)、海蛇(0.7%)、以及白头蝰(0.3%)。致死率最高为银环蛇和眼镜王蛇,在27例死亡病例中分别占33.3%和29.6%。经推算结果广西每年有蛇伤3万余例,其中死亡一千多例.伤者绝大多数为青壮年,其中多数是农民,越是偏僻的山区,发病率越高.调查结果提示如何在农村建立有效的蛇伤防治网络,推广使用抗蛇毒血清是摆在我们面前的一大课题。

蛇毒溶栓素对动物凝血功能的影响

本文报道蛇毒溶栓素(ATE)对家犬、猕猴体内外凝血作用的影响.体外实验表明:ATE具有类凝血酶样作用,能使去钙血浆和纤维蛋白原直接凝固,它不激活Ⅻ因子,产生是非交联的纤维蛋白,并且有纤溶酶样作用,能直接溶解纤维蛋白,产生抗凝作用.体内实验表明:ATE显著延长全血凝固时间、凝血酶时间和凝血酶原时间,注射ATE后血浆中纤维蛋白原降低,优球蛋白溶解时间缩短,三P试验阳性,血小板减少.体内外实验表明,ATE具有去纤、纤溶、抗血小板功能和抗凝效应.

蛇毒溶栓素对动物实验性血栓形成和肺动脉栓塞的溶栓作用

本文报道蛇毒溶栓素对猕猴、家犬的Chandler法半体内混合血栓,对家兔的Teruhiko法动脉血栓以及对大鼠的Reyers法静脉血栓均有明显的抑制血栓形成的作用。对家兔的Nowork法肺动脉栓塞有明显的加速栓子的溶栓作用。其作用机理可能与去纤维蛋白原、纤溶、抗血小板聚集和抗凝作用有关。

眼镜蛇毒心脏毒素对心肌电及机械活动的影响(一)

中华眼镜蛇毒心脏毒素(Cardiotoxin,简称CTX)对离体的豚鼠心肌电及机械活动有明显而持久的影响。1mg/L CTX可提高离体的大鼠心房和离体的豚鼠心脏肌张力,减少收缩振幅,ECG的S-T段下降或抬高,T波由正常倒置型全部转为直立,电压增加。离体的大鼠心房ERP、豚鼠心脏P-R及Q-T间期、心率、冠脉流量(CF)不变。反复用生理溶液冲洗标本,不能使CTX抑制了的标本恢复正常。而5mM Ca^(+2)拮抗CTX对心肌电及机械活动的影响。

蛇毒中的降压组分——血管紧张素转化酶抑制剂

蛇毒中的一些多肽能够竞争性的抑制血管紧张素转化酶,起到降血压的作用,这些多肽波称为血管紧张素转化酶抑制剂(Angiotensin ConvertingEnzyme Iinhibitor——ACEI)。有关 ACEI 的研究和应用,是近年来心血管药物的一大进展。

眼镜蛇毒因子对豚鼠-大鼠异种心脏移植的影响

目的 :研究眼镜蛇毒因子 (CVF)对豚鼠 -大鼠非协调性异种心脏移植的影响 ,探讨其应用的可能性。方法 :给受者大鼠进行 CVF (16 0 μg/ kg)、CVF+ CYP(16 0 μg/ kg+ 2 0 m g/ kg)、CYP(2 0 mg/ kg)腹腔注射处理 ,耗竭其体内补体 ,随后对耗竭体内补体的受者大鼠进行颈部豚鼠 -大鼠异种心脏移植。测定移植供心的存活时间。结果 :经 CVF处理后移植供心存活时间获得延长至 (36 .3± 5 .1) m in。加用环磷酰胺 (CYP)延长尤为明显 [(5 3.4± 7.4) m in],CYP对移植供心存活时间也有一定的延长作用 [(31.7± 6 .0 ) min]。结论 :CVF可延长供心的存活时间 ,对非协调性异种心脏移植具有一定的应用价值。

眼镜蛇神经毒素对豚鼠颈上神经节烟碱传递的易化作用(英文)

本研究用离休豚鼠颈上神经节细胞内生物电记录技术,对眼镜蛇毒神经毒素对交感神经节突触传递影响进行探讨。研究首次表明,眼镜蛇神经毒素对交感神经突触前ACh的释放有易化作用。

蛇毒溶栓素对实验动物血小板功能和环腺苷酸含量的影响

本文报道蛇毒溶栓素对实验动物血小板功能和血浆环腺苷酸含量的影响.(1)对血小板数的影响:给家犬以4 u/kg量静注1小时后,循环血的血小板数由药前130.44×10~9/L±50.02×10~9/L下降至60.20×10~9/L±20.50×10~9/L(P<0.05).(2)对血小板聚集功能的影响:猕猴和家兔分别按4 u/kg、8 u/kg量静注1小时后,对ADP诱导的血小板聚集率分别山药前的62.32±22.05%和43.66±10.60%下降至1.32±0.49%和4.95±1.96%;抑制率分别为97.50±1.75%和88.34±4.31%,与药前组相比均有非常显著的差异(P<0.001).(3)对血小板cAMP含量的影响:猕猴和家兔以蛋白竞争结合法测定血小板内cAMP的含量,药后1小时的含量65.43±31.35pmole/mg,32.25±15.43pmo1e/mg蛋白质,与药前12.02±0.95pmole/mg,4.25±3.13pmole/mg蛋白质相比有明显升高(P<0.001).

眼镜蛇毒心脏毒素的毒性作用及Ca^(+2)对其毒性作用的影响(二)

恒速静脉灌注中华眼镜蛇毒CTX,对在位大鼠心脏有选择性的毒性作用,表现为R波低电压,S-T段下移,T波平坦或倒置,束支传导阻滞,Q-T间期延长,继而出现室性早搏、室速,进而发展为室扑、室颤.预先静脉缓慢灌注15mg/kg CaCl_2,能提高大鼠产生室性心律失常所需的CTX量.预先静脉注射200或300mg/kg葡萄糖酸钙,对CTX中毒的小鼠亦有非常显著的保护作用.

抗青环海蛇毒血清治疗海蛇咬伤4例报告

本文采用日本蛇族学术研究所精制的抗青环海蛇毒抗血清治疗海蛇咬伤中毒病人４例，其中青环海蛇咬伤２例，平颏海蛇咬伤１例，小头海蛇咬伤１例。治疗结果３例痊愈，１例死亡．临床观察表明，抗青环海蛇毒抗血清有对抗多种海蛇咬伤中毒的治疗作用，对危重病人用量要足够。

中华眼镜蛇蛇毒因子(CVF)对补体系统的作用及与人补作C_3和其他蛇毒抗原性关系

中华眼镜蛇蛇毒经DEAE-Sepharose CL-6B。HPLC等多次柱层析分离出有抗补体及溶血活性的眼镜蛇蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF),纯化后的CVF在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈单一区带,分子量为225000—230000,等电点为6.20。用二硫苏糖醇还原经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得三类亚基,其分子量总和为237,000。 体外抗补体及溶血试验表明,CVF的作用是通过补体旁路途经使总补体活力下降。双向免疫电泳鉴定,发现CVF与人血清作用后,其中补体成分C_3分子的抗原性发生改变,则表明CVF的作用是通过激活补体成分C_3而发挥的。给豚鼠腹腔注射CVF(0.15ug/g体重)后,其血清总补体水平下降到正常值的3％以下,7天后回升,13天后恢复到正常水平。 单相免疫电泳表明,CVF与人补体C_3抗血清间无任何交叉免疫反应,但人血清与CVF抗血清间有微弱的免疫沉淀反应。另外,CVF的氨基酸组成与人补体C_3也较为相似。鉴定还表明眼镜蛇科中四种蛇毒与CVF抗血清有强烈的免疫沉淀反应,蝰蛇毒及海蛇毒也有免疫沉淀反应,但只有眼镜蛇毒具有抗补体活性。

鲎凝固蛋白原的纯化及其火箭免疫电泳鲎试验法

亚洲鲎血细胞溶解物先经CM-Sepharose CL-6B分级洗脱,再经Dextran-Sepharose CL-6B亲和层析纯化凝固蛋白原。用此法纯化的凝固蛋白原免疫家兔产生抗血清,并用火箭免疫电泳法测定鲎血细胞溶解物与内毒素反应后的凝固蛋白原残余量,根据残余凝固蛋白原量与参加反应内毒素量呈负相关关系,建立了定量测定内毒素的火箭免疫电泳鲎试验法。