德宏水牛微卫星标记分析的群体遗传变异

德宏水牛是云南省地方水牛的优良品种之一,为了进一步阐明其群体遗传变异和遗传结构,筛选了分别位于水牛14条染色体上的15对微卫星引物,对德宏水牛81个个体进行了检测分析。共检测到62个等位基因,每个座位等位基因数目从2到6个不等,平均等位基因数为4.13,该水牛群体期望杂合度和多态信息含量分别为0.6520±0.1526和0.5863±0.1789,各座位的遗传分化系数在0～0.0919之间,平均值为0.0202。每个座位的基因流较大,平均12.1502。研究结果表明德宏水牛群体遗传多样性较丰富,亚群间的遗传分化程度低,基因流较大,且很少发生近交。

水牛乳和荷斯坦牛乳中五种常量元素含量的测定

对摩本杂水牛（摩拉水牛×德宏水牛）乳和荷斯坦牛乳中的5种常量元素进行测定。采用火焰光度法测定钾、钠含量,火焰原子吸收分光光度法（FAAS）测定钙、镁含量,磷钼酸比色法测定磷含量。结果表明,水牛乳中钾、钠含量极显著低于荷斯坦牛乳（P〈0.01）,钙、磷含量极显著高于荷斯坦牛乳（P〈0.01）,两种牛乳中镁含量差异不显著（P〉0.05）。元素测定相对标准偏差（RSD）低于5%,平均加标回收率在95.05%～105.18%之间。

12个水牛群体催乳素基因第4外显子遗传特征分析

催乳素对水牛乳腺发育、泌乳和乳蛋白基因的表达有明显的调控作用。该研究采用直接测序并结合PCR-SSCP技术,分析沼泽型水牛和河流型水牛12个群体385个个体的催乳素基因(PRL)第4外显子(exon4)的遗传特征。结果表明:水牛PRLexon4由180个核苷酸组成,在不同物种中具有高度保守性。序列分析发现水牛中该外显子的第109位碱基处有C>T替换,为沉默突变,与泌乳性状之间无显著相关性。在9个沼泽型水牛群体中均检测到该突变位点,其中PBA基因在7个沼泽型水牛群体中为优势基因,PBB基因在德宏和富钟群体中为优势基因,沼泽型水牛群体中PBA基因频率在0.400～0.917之间,群体平均值为0.629±0.049,具有地域分布特征。在3个河流型水牛群体中,第109位核苷酸处均为C,未检测到多态。提示河流型水牛与沼泽型水牛已有较大的遗传分化。

德宏水牛及其不同杂交品种肉质特性研究

选择德宏水牛及其不同杂交品种共15头,即尼本水牛(尼里水牛×德宏水牛)、摩本水牛(摩拉水牛×德宏水牛)的F1代和德宏水牛各5头,进行了肉质化学和物理特性研究。结果显示,尼本水牛(57.73%)和摩本水牛(53.63%)的熟肉率有显著差异(P<0.05);尼本水牛(0.93%)比摩本水牛(1.03%)的粗灰分高10.75%(P=0.04);而其它化学成分和物理特性都没有显著差异。此项试验说明,通过尼里水牛或摩拉水牛与德宏水牛的杂交并没有显著改变德宏水牛肉质的化学和物理特性。

水牛初乳和常乳主要组分的动态变化

试验旨在研究水牛初乳和常乳主要组分的动态变化规律。采用乳品分析仪对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)等含量进行测定,用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用凝胶成像系统进行扫描定量。结果表明,初乳中乳糖含量随泌乳天数的增加逐渐升高;乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)含量呈下降趋势;初乳中乳脂含量变化不规则,出现小幅波动;蛋白质各组分中乳铁蛋白(LF)、血清白蛋白(SA)、免疫球蛋白(Igs)含量第1天最高,以后开始下降;酪蛋白(CN)在乳蛋白百分比含量中占优势,随着泌乳天数的增加逐渐升高;β-乳球蛋白(β-LG)第1天含量低,第5和7天达到最高值;α-乳白蛋白(α-LA)第1天最低,第2天急剧上升,以后变化平稳。常乳中大部分组分含量比较稳定,有时有波动,但各天数之间差异不显著。研究结果显示,水牛乳中大部分组分的含量在初乳中变化较大,初乳的营养价值高于常乳。

德宏水牛及其杂交品种体尺测定

试验对36～39月龄全放牧饲养的15头德宏、摩本、尼本水牛进行了体尺测定研究,此项试验根据水牛品种不同分为三个处理组。结果显示,杂交水牛尼本的鬐甲高、十字部高、坐骨节宽比德宏水牛分别提高5.5%、7.4%、9%,差异显著。杂交水牛摩本的鬐甲高、十字部高、坐骨节宽比德宏水牛提高5.9%、8.0%、11.9%,差异显著。摩本的肢长指数优于尼本,差异显著。此项试验结果表明,用尼里、摩拉与德宏水牛杂交,提高了德宏水牛的体尺与体况。

云南德宏水牛乳中酶活性的研究

对云南德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中淀粉酶、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶、γ-谷氨酰胺转移酶、碱性磷酸酶以及乳过氧化物酶的活性进行测定。结果表明,云南德宏水牛乳中淀粉酶活性极显著高于荷斯坦奶牛乳(P<0.01),γ-谷氨酰胺转移酶、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性显著高于荷斯坦牛乳(P<0.05),荷斯坦牛乳中碱性磷酸酶活性显著高于水牛乳(P<0.05);德宏水牛乳与荷斯坦牛乳中乳过氧化物酶活性无显著性差异(P>0.05)。

德宏奶水牛DGAT1基因多态性及其与产奶性状的相关性分析

探讨德宏奶水牛(摩拉水牛×德宏水牛)DGAT1基因多态性与产奶性状的关系,以期为德宏奶水牛产奶性状标记辅助选择侯选基因的选择提供理论依据。以81头泌乳的德宏奶水牛为研究对象,利用PCR-SSCP方法结合候选基因直接测序法检测DGAT1基因第8外显子及第8内含子区的多态性,并采用最小二乘法分析DGAT1基因多态位点对产奶量、乳脂率及乳蛋白率的影响。结果在德宏奶水牛群体中共检测到CTGG,CCGG和CCGT三种基因型,测序结果显示,在检测的群体中未发现K232A位点的突变,而在DGAT1基因第8内含子的第14位检测到C→T突变,第35位检测到G→T突变。多重比较表明,CCGT基因型对德宏奶水牛的乳脂率有显著影响(P<0.05)。

水牛初乳和常乳中锌、铁、铜含量的动态变化

采用火焰原子吸收分光光度法对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中Zn、Fe、Cu等三种微量元素含量进行测定。结果表明,在第1、2d的初乳中Zn含量显著高于其余几天的初乳和常乳(P<0.05),第3d开始Zn含量接近常乳,在3d至90d之间稍有波动,但差异不显著(P>0.05)。Fe和Cu含量随泌乳进行逐渐降低,其在初乳中的含量均高于常乳,常乳之间差异不显著(P>0.05)。其中第1d初乳中Fe含量显著高于第7d(P<0.05),而与其余几天初乳相比差异不显著(P>0.05),第1、2d初乳中Fe含量均显著或极显著高于常乳(P<0.05);第1d初乳中Cu含量显著高于第3、5d的初乳(P<0.05),与第2、7d相比差异不显著(P>0.05),第1、2d初乳中Cu含量极显著高于常乳(P<0.01)。研究显示水牛初乳中Zn、Fe、Cu等三种微量元素的含量大都高于常乳,反映了乳腺在初乳期矿物质的分泌特点。

火焰原子吸收光谱法测定水牛和荷斯坦牛乳中锌、铁、铜含量

研究采用火焰原子吸收分光光度法（FAAS法）测定水牛和荷斯坦牛乳中锌、铁、铜含量。结果表明,锌、铁、铜含量在水牛乳中分别为15.520μg/mL、4.267μg/mL、0.586μg/mL,在荷斯坦牛乳中分别为4.374μg/mL、2.756μg/mL、0.866μg/mL。水牛乳中锌、铁含量极显著高于荷斯坦牛乳（P〈0.01）,铜含量极显著低于荷斯坦牛乳（P〈0.01）。三种元素的回收率范围为96.000%~104.333%,相对标准偏差为2.467%~7.857%。该方法精密度和准确度高,可适用于批量牛乳样品中微量矿物元素的分析。

德宏水牛及其不同杂交组合品种屠宰性能研究

选择两个不同杂交品种水牛和德宏水牛共15头,即尼本水牛(尼里水牛×德宏水牛)、摩本水牛(摩拉水牛×德宏水牛)的F1代和德宏水牛各5头,研究德宏水牛及其不同杂交组合品种的屠宰特性。结果显示,尼本与德宏水牛的宰前活重(433.00kg,339.09kg)、胴体重(271.84kg,197.37kg)、屠宰率(62.78%,58.26%)、净肉重(237.85kg,165.88kg)、净肉率(54.93%,48.96%)、胴体产肉率(87.48%,84.04%)、肉骨比(7.06:1,5.27:1)存在显著差异(P<0.05)。试验结果说明,通过尼里、摩拉水牛与德宏水牛杂交后显著提高了德宏水牛的屠宰性能,而且尼里水牛比摩拉水牛的杂交效果好。

云南德宏水牛乳基本组分的研究

本实验采用乳品分析仪对云南德宏奶水牛与荷斯坦牛乳中乳糖、乳脂、乳蛋白、总固形物、非脂固形物等含量进行测定。同时采用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用凝胶成像系统进行扫描定量。结果表明,德宏奶水牛乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物、非脂固形物含量都极显著高于荷斯坦牛乳(P<0.01)。酪蛋白百分含量在两个品种乳蛋白中占优势。德宏奶水牛乳蛋白中α-乳白蛋白含量显著高于荷斯坦牛乳(P<0.05),而β-乳球蛋白含量显著低于荷斯坦牛乳(P<0.05),血清白蛋白和酪蛋白则差异不显著(P>0.05)。

德宏水牛和摩拉水牛及杂交后代的遗传差异分析

为了解德宏水牛、摩拉水牛及二者杂交后代之间的遗传差异,本研究采用随机扩增多态性DNA标记技术,从70个随机引物中筛选出11个多态性丰富的引物对德宏水牛、摩拉水牛及二者杂交后代共80个个体进行了遗传变异检测,结果11条引物共产生89种扩增片段,多态片段73条,多态率82.02%。两亲本群体相对遗传距离为0.2203,杂交后代群体与德宏水牛、摩拉水牛群体的相对遗传距离分别为0.1017和0.1353,表明杂交后代群体与两亲本群体间的遗传差异小于两亲本群体间的遗传差异,杂交后代群体与德宏水牛群体遗传关系更接近。

德宏水牛及其杂交品种分割肉的研究

试验对36￣39月龄全放牧饲养的15头德宏、摩本、尼本水牛进行了胴体分割肉测定研究,试验根据水牛品种不同分为3个处理组。试验结果显示尼本水牛与德宏水牛相比胴体重、净肉重、优质肉重均有显著提高,差异显著。尤其表现在嫩肩肉、腰肉、臀肉、膝圆、大米龙、小米龙、腱子肉这几块分割肉上。摩本水牛与德宏水牛相比胴体重、净肉重、优质肉重有显著提高,但分割肉块在重量上无显著差异。尼本水牛与摩本水牛的分割肉块重无显著差异。用尼里、摩拉与德宏水牛杂交后,提高了德宏水牛的产肉性能。

水牛初乳和常乳中五种酶活性的动态变化

对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中AMS、γ-GT、NAGase、ALP以及LP的活性进行测定。结果表明,初乳中5种酶的活性大多显著或极显著高于常乳(P<0.05或P<0.01),而常乳之间差异均不显著(P>0.05)。初乳中AMS活性第1、2、3天差异不显著(P>0.05),第1、2天极显著高于第5、7天(P<0.01)。γ-GT活性第1天显著高于第7天(P<0.05),但与第2、3、5天相比差异不显著(P>0.05)。NAGase活性第1、2天极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。ALP活性第1、2、3、5天之间差异不显著(P>0.05),但第1天极显著高于第7天(P<0.01)。LP活性第1、2天之间差异显著(P<0.05),且均极显著高于第3、5、7天(P<0.01)。

云南省水牛奶体细胞数及其与DHI其他指标的相关性分析

为了解云南省水牛奶体细胞数(SCC)及其与DHI其他指标的相关性,本研究对2009～2011年德宏州、大理州和保山市2532份水牛奶的DHI测定指标进行了分析。结果表明,SCC低于5万/mL的占43%,低于20万/mL的占80%,高于100万/mL的仅有4%,平均SCC为24.90万/mL;SCC低于20万/mL的奶牛,其平均日产奶量高于4kg;SCC高于20万/mL的奶牛,其平均日产奶量低于4kg。尿素氮低于40mg/dL或SCC低于40万/mL时,尿素氮与SCC的相关性不明显;但是尿素氮超过40mg/dL或SCC高于40万/mL时,两者呈正相关。乳蛋白率在4%～6%时,SCC较低;此范围外,乳蛋白率升高或是降低,SCC则升高。SCC与乳脂率相关性不明显。乳糖含量为5%～6%时,SCC较低;SCC高于30万/mL时,乳糖含量明显下降。结果提示,云南省水牛奶品质较高,SCC及其与DHI其他指标的相关性可为指导奶水牛生产提供参考依据。

德宏高峰牛血清碱性磷酸酶以及钙、磷的测定

本试验以德宏高峰牛公牛及该品种阉牛各15头为研究对象,对其血清中Ca、P含量以及ALP活性进行测定。结果表明,德宏高峰牛公牛血清中ALP活性极显著高于阉牛(P<0.01);Ca、P含量均低于阉牛,但差异不显著(P>0.05)。

德宏高峰牛血清基本生化指标的测定

本文以德宏高峰牛公牛及该品种阉牛各15头为研究对象,对其血清基本生化指标进行了测定。结果表明,德宏高峰牛公牛血清中BUN含量极显著高于阉牛(P<0.01),UA含量显著高于阉牛(P<0.05),TC显著低于阉牛(P<0.05),TP、ALB、TG、TBIL含量低于阉牛,Crea含量高于阉牛,但差异均不显著(P>0.05)。

德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中上皮粘蛋白的遗传多态性

本文采用SDS-PAGE对56头云南德宏水牛和47头中国荷斯坦牛的乳上皮粘蛋白MUC1进行了基因分型。结果表明:德宏水牛乳和荷斯坦牛乳中的MUC1均呈现多态性。德宏水牛乳中共发现3种分子量分别为208,185,168 kD的电泳谱带,命名为A,B和C等位基因;荷斯坦牛乳中共发现5种分子量分别为196,191,188,176,159 kD的电泳谱带,命名为D,E,F,G和H等位基因。德宏水牛乳MUC1基因座A,B,C3个等位基因频率分别为0.223 2,0.330 4和0.446 4,群体期望杂合度为0.647 5;荷斯坦牛乳MUC1基因座D,E,F,G,H 5个等位基因频率分别为0.468 1,0.010 6,0.212 8,0.255 3和0.053 2,群体期望杂合度为0.674 7。结果揭示德宏水牛乳MUC1蛋白与荷斯坦牛乳MUC1蛋白遗传组成存在显著差异,该座位遗传多态性较丰富。