基于RAPD的SCAR分子标记技术鉴定虎纹蛙及引进种

为了对引进种泰国虎纹蛙加强种质监测,本文对泰国虎纹蛙和中国虎纹蛙进行了SCAR标记研究。在对2种蛙随机扩增多态DNA(RAPD)标记研究的基础上,选用随机引物OPP5和OPZ19对2种蛙进行扩增,将2个特异性扩增片段OPP5-471bp和OPZ19-512bp回收、克隆和测序,并根据序列信息设计两对SCAR引物SP5和SZ19。利用两对SCAR引物对2种蛙基因组DNA扩增的结果显示:SP5显示了其特异性,在对中国虎纹蛙的扩增中出现了单一SP5-388bp特异片段,而在泰国虎纹蛙中没有扩增产物;SZ19在对2种虎纹蛙的扩增中出均出现了单一条带,但片段大小不同,在中国虎纹蛙中为SZ19-456bp,在泰国虎纹蛙中为SZ19-497bp。3个分子标记都可作为基于RAPD成功转化后的SCAR分子标记对2种虎纹蛙进行鉴定。

不同保存条件下鱼类组织基因组DNA的提取效果分析

对-20℃下冰冻,常温下酒精、甲醛溶液和Bouin氏液等保存条件下的鱼体组织(血液、肌肉、鳞片、鳍条)的DNA提取方法作了比较,并经琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测及RAPD扩增结果验证。结果表明,除鳞片外,新鲜组织、-20℃冰冻组织以常规方法可提取出较高质量的DNA;保存于70%酒精或10%甲醛溶液中的组织,经预处理,亦可得高质量DNA;新鲜、冰冻、70%酒精或短时间10%甲醛固定的鳞片经适当预处理也可提取出较高质量的DNA。