重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究

为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL; TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0. 47μg/mL和1. 88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。

探讨水电站机械设备运行管理的重要性

随着我国近年来经济的不断发展,我国社会对于水利水电的需求量也在不断增加,我国政府相关部门也在加大对于水利水电工程建设的资金投入。水电站对于我国国民经济的增长来说,有极强的促进作用,而水利工程的建设不仅能够有助于整治水资源,还能使水资源得到有效的开发与利用,同时对于防洪、供水、灌溉等多种目标服务均能起到良好的效果。而水电站在运用过程中,不仅需要做好日常的工程保障,还需要做好水利水电设备的有效维护,这也是保证其正常运行的关键。本文中简单讲述了水利水电机械设备运行管理的重要性,并探讨了强化水电站机械设备运行管理的主要策略。

大规格铸带式炉热处理机组的研制

本文介绍了目前国内首先研制成功的最大规格、机电一体化、保护气氛铸带式炉热处理机组。其结构性能及工艺，经过现场测试及连续运行证明，其各项性能指标均达到了国际上同类产品八十年代末的先进水平．

高压真空气淬炉

多年来工具行业，热处理都沿用盐浴法，但这种方法，在产品的质量，变形、寿命、能源以及环境保护等方面都存在一定问题，为满足工具行业处理技术发展的需要，在引进设备安装调试，吸收了国外同类产品先进技术的基础上，结合国内实际，自行设计开发了ＧＺＣ１３－４５×６０×３７型真空高压气淬炉，其性能结构作介绍。

嵌合蛋白P128的表达、纯化与抗牛源葡萄球菌活性研究

将抗葡萄球菌嵌合蛋白P128编码序列优化成大肠埃希菌偏爱密码子序列,插入脑膜炎奈瑟氏菌FrpC蛋白自加工元件(SPM)与类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,将重组载体pP128-SPM-ELP转化大肠埃希菌进行诱导表达,利用ELP的温度敏感可逆相变循环(ITC)进行融合蛋白纯化,利用SPM自切割活性进行融合蛋白切割和目的蛋白回收;以牛源金黄葡萄球菌为指示菌,对回收的嵌合蛋白P128进行溶(杀)菌活性测定。结果表明:P128-SPM-ELP融合蛋白获得高水平、可溶性表达,经过两轮ITC获得的融合蛋白纯度大于90%,其自切割效率接近100%,回收的嵌合蛋白P128对金黄葡萄球菌的最小抑菌浓度为8.4μg·mL-1,且有很强的杀菌作用。证明SPM-ELP融合表达与纯化系统是简单、经济、有效的重组蛋白表达与纯化系统,获得的嵌合蛋白P128可用于葡萄球菌性奶牛疾病防治。