树突状细胞TLRs信号通路与乙肝病毒感染研究进展

乙型肝炎病毒（Hepatitis B,HBV）感染是一个全球性的健康问题,2005年世界卫生组织统计,全球有20亿人感染过乙型肝炎病毒,其中3.5亿为乙型肝炎病毒携带者,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌,是构成全球疾病死亡的重要因素之一[1,2]。

HBsAg对脂多糖诱导树突状细胞分泌IL-6和IL-12的影响

目的研究HBsAg对脂多糖诱导树突状细胞(DCs)分泌IL-6和IL-12的影响。方法采用重组人粒-单核集落刺激因子(rhGM—CSF)联合重组人白细胞介素4(rhIL-4)诱导单个核细胞得到未成熟树突状细胞(iDCs),分别加入HB—sAg1、2、5μg/ml,并设对照组,各组再加入脂多糖诱导为成熟DCs。采用流式细胞术鉴定各组iDCs的表型(CD11c、HLA—DR),ELISA法检测脂多糖诱导后培养上清液中IL-6和IL-12的水平。结果 iDCs的CD11C/HLA—DR双阳性率为(83.62±6.89)%,显著高于单纯培养组(20.57±11.19)%,差异有统计学意义(P<0.05)。HBsAg 1、2、5μg/ml组培养上清液中IL-6分别为(609.36±127.06)、(566.01±173.46)、(295.03±76.08)pg/ml,低于对照组(1356.97±181.78)pg/ml(均P<0.05);HBsAg2、5μg/ml组IL-12分别为(854.49±67.92)、(472.09±55.70)pg/ml,低于对照组(1248.78±112.09)pg/ml(均P<0.05);1μg/ml组IL-12(1 103.53±134.15)pg/ml,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论低浓度HBsAg可下调脂多糖诱导的DCs细胞因子分泌。

阿德福韦酯致范可尼综合征1例并文献复习

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染严重威胁人类健康，每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝细胞癌等，是构成全球疾病死亡的重要因素之一[1]。核苷（酸）类似物是有效抑制HBV复制、减轻肝脏炎症、延缓肝硬化进展及其并发症发生的重要药物。近年来有关阿德福韦酯导致肾损害的报道日渐增多，现报道阿德福韦酯致范可尼综合征（FS）1例并文献复习。

双歧杆菌四联活菌对肝硬化患者血浆内毒素及肠黏膜通透性的影响

目的:探讨双歧杆菌四联活菌对肝硬化患者血浆内毒素及肠黏膜通透性的影响。方法:将76例肝硬化患者随机分为对照组和观察组。对照组患者予以常规保肝对症支持治疗;观察组在此基础上加服双歧杆菌四联活菌片3片/次,每天3次,连用6周,其他治疗同对照组。分别在治疗前后观察两组患者肝功能、血浆内毒素及肠道通透性的变化。结果:治疗4周后,两组患者肝功能(ALT、AST、TB)和内毒素水平均较治疗前明显下降(P<0.05或P<0.01)。同时两组患者血浆二胺氧化酶和D-乳酸水平均较治疗前明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:双歧杆菌四联活菌可明显降低肝硬化患者的肠黏膜通透性,改善肠黏膜屏障功能,从而降低血浆内毒素的水平,改善肝功能,具有辅助治疗肝硬化的作用。

HBV相关肝病患者外周血NK细胞PD-1、Tim-3表达及意义

目的了解HBV相关肝病患者外周血NK细胞表面PD-1、Tim-3的表达情况,探讨PD-1和Tim-3的表达与血清HBV-DNA载量的相关情况。方法选择HBV感染相关肝病患者74例,其中CHB患者30例,LC患者24例,HCC患者20例,健康对照18例。应用流式细胞术检测NK细胞表面PD-1、Tim-3表达,荧光定量PCR检测HBV-DNA量,ELISA法检测细胞因子分泌水平。统计各组患者PD-1和Tim-3的表达率,比较各组差异,分析其与病情的相关性。结果 CHB、LC、HCC组外周血NK细胞表面PD-1和Tim-3的表达率分别为34.46%±7.31%、59.09%±12.35%、61.49%±15.26%和19.18%±6.05%、28.64%±11.20%、31.24%±11.85%,均高于对照组(P<0.01),LC组和HCC组明显高于CHB组(P<0.01),LC组和HCC组比较无统计学差异。在CHB组,PD-1的表达率与HBV-DNA呈负相关关系(R=-0.437,P=0.033)。CHB、LC、HCC各组血清中细胞因子TNF-α和IFN-γ水平分别为0.66±0.63、0.75±0.66、0.85±0.71和1.76±0.88、1.83±1.23、1.60±0.53,均低于健康对照组(P<0.01)。结论 HBV相关肝病患者NK细胞表面PD-1、Tim-3表达均增加,且与病情严重程度有关,增加表达的PD-1与血清HBV-DNA载量存在负相关性,HBV肝病各组血清TNF-α、IFN-γ分泌减少。

手足口病引起肝功能严重异常及心肌损伤1例并文献复习

手足口病是由多种肠道病毒引起的急性传染病,多发生于学龄前儿童,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征,而部分重症手足口病患儿可出现多系统损害,极少数病例病情危重可死亡。我院感染科收治1例手足口病出现严重肝功能异常、心肌损伤的患儿,现回顾性分析患儿的诊治经过并进行文献复习,提高对该病合并肝功能异常、心肌损伤的认识及诊治,早期发现重型病例,早期进行干预治疗,以降低病死率。

HBe Ag对髓样树突状细胞Toll样受体4及NF-κB信号通路的影响

目的探讨HBe Ag对髓样树突状细胞(mDC)Toll样受体4(TLR4)及NF-κB信号通路的影响。方法将健康者外周血单核细胞诱导分化为未成熟mDC;加入HBe Ag体外刺激,经脂多糖(LPS)刺激获得成熟mDC。采用Western blot法检测TLR4、NF-κB信号通路蛋白相对表达量,MTS法检测mDC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。结果培养至第9天,HBe Ag刺激组TLR4、NF-κB相对表达量为0.12±0.01、0.75±0.12,分别低于对照组的0.27±0.03、1.20±0.13(均P<0.05)。在DC/淋巴细胞比例为1∶5、1∶10、1∶20的反应中,HBe Ag刺激组刺激指数为2.93±0.05、2.56±0.19、1.44±0.09,分别低于对照组的4.83±0.05、3.57±0.35、2.13±0.11(均P<0.05)。结论 HBe Ag抑制mDC TLR4信号通路蛋白的表达,减弱mDC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。

新型布尼亚病毒感染22例临床分析

新型布尼亚病毒（SFTSV）是布尼亚病毒科白蛉病毒属的一种新型变异病毒，多由虫媒传播，若迁延不治病死率高达30%。我院于2011年6月首次诊断并报道了浙江省SFTSV所致发热伴血小板减少综合征[1]。现回顾我院收治的22例SFTSV感染病例，报道如下：1临床资料1.1一般资料收集我院2011年6月至2016年3月确诊的SFTSV感染住院患者22例，其中男12例，女10例；年龄31～79岁，其中31～40岁4例（18.2%），41～50岁6例（27.3%），51～60岁7例（31.8%），61～70岁3例（13.6%），＞71岁2例（9.1%）；发病至入院时间1～7天，平均（4.0±1.2）天。患者发病前均生活在台州市丘陵、山地等农村地区，均为农民，其中4例（18.2%）患者主诉有明确蜱虫叮咬史。

经方在治疗下血中的运用

1 黄土汤治疗直肠炎了血 杨某,女,36岁。诉便溏并有解不净感年余,日行2～3次不等,近半月伴下血,便血不相混。大便常规:红血球+。乙肠镜直视下,直肠粘膜水肿,血管纹理模糊,壶腹部见有3个点状出血灶。诊为慢性直肠炎。观其神萎,面色苍白、纳呆乏力,舌苔薄白,按脉濡细。治拟温阳健脾法,方选黄土汤。干地黄、炒白术各15g,淡附片、炙甘草各6g,炒黄芩。

HBsAg对健康成人外周血单核细胞来源树突状细胞Tim-3信号通路的影响

目的探讨HBsAg对健康成人外周血单核细胞来源树突状细胞(MD—DCs)的免疫活性及对T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)和下游信号分子核因子-κB(NF—κB)蛋白表达的影响。方法分离健康成人外周血单核细胞,经GM—CSF、IL-4联合诱导为树突状细胞(DCs),流式细胞术检测DCs表面标志物表达水平。MD—DCs分4组添加不同浓度HBsAg(0、1、2、5μg/ml),分别设为对照组、+1μg/ml组、+2μg/ml组、+5μg/nl组,Western印迹法检测Tim-3、NF—κB信号蛋白表达,细胞增殖与毒性检测试剂检测MD—DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,ELISA法检测细胞因子分泌水平。结果外周血来源单核细胞成功诱导分化为DCs。与对照组相比,+2μg/ml及+5μg/ml组MD—DCs Tim-3及NF—κB表达水平均上调,刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力均增强,炎症因子IL-6、IL-10、IFN—γ分泌水平均增高(均P<0.05),而+1μg/ml组较对照组无统计学差异(均P>0.05)。与其他3组相比,+5μg/ml组MD—DCs Tim-3、NF—κB、炎症因子分泌水平增高,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强(均P<0.05)。结论 HBsAg上调MD—DCs Tim-3及NF—κB表达水平,增强MD—DCs免疫活性,且刺激作用随HBsAg浓度的增高而增强。

成人足舟骨坏死诊疗研究现状

成人足舟骨坏死(Müller-Weiss病)通常呈双侧分布,患者主要表现为足部疼痛,伴有足舟骨畸形,出现足舟骨进行性坏死,最终内侧足弓代偿性变低,导致平足及“距楔关节”形成。该病治疗保守治疗无效的前提下,首选为手术治疗。本文就Müller-Weiss病的临床特征、影像学特点、鉴别诊断和治疗方法等予以综述研究。

美国小学生科学探究对我国小学科学课教学的启示

中美两国都高度重视科学课程的探究式教学,美国作为探究式教学的首创者,经过几十年的发展,始终走在世界的前沿。但有研究表明,美国学生的探究水平仅停留在最简单的水平。我国小学科学课程的综合实施条件不如美国,在现有条件下开展小学科学的探究式教学难度较大。通过对美国探究式教学的分析,对我国小学科学课探究式教学的发展提出了建议。

TLR10基因多态性与慢性乙型肝炎病毒感染的相关性研究

目的探讨TLR10基因多态性与慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。方法采集慢性HBV感染者(428例)、健康人群(210例)外周血,提取全血基因组DNA。聚合酶链反应扩增预定多态性位点,扩增产物纯化后进行直接测序。比较两组对象RS10004195与RS11096957基因型及等位基因分布特征,分析HBV感染患者临床特征与RS10004195基因变异的关系,采用logistic回归分析两组对象RS10004195、RS11096957、RS4129009位点基因型的关系。结果两组人群符合Hardy-Weinberg平衡(均P>0.05),具备群体代表性。在RS10004195位点,感染组基因型(AA+AT)变异频率、等位基因A频率分别为76.64%、53.50%,高于对照组的63.81%、39.05%(均P<0.05)。在RS11096957位点,感染组等位基因A频率(50.93%)高于对照组(43.33%),差异有统计学意义(P<0.05);而两组基因型(AA+AT)变异频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。在HBV感染患者中,HBeAg阳性患者RS10004195位点基因型(AA+AT)变异频率较HBeAg阴性患者增高(P<0.05);而在肝脏炎症程度、HBV DNA水平、家族史等方面,差异均无统计学意义(均P>0.05)。logistic回归分析提示RS10004195位点T向A突变时,HBV感染风险增高;RS4129009位点A向G突变时,HBV感染风险降低;RS11096957位点与HBV感染无关。结论TLR10基因RS10004195、RS4129009位点与HBV感染有关。

Rs4129009基因多态性与慢性HBV感染的相关性研究

目的探讨Toll样受体10(TLR10)基因多态性位点Rs4129009(Ile775Val)与慢性HBV感染的关系。方法采集428例慢性HBV感染患者、210例健康对照人群外周血并提取全基因组DNA。采用聚合酶链反应(PCR)法扩增特定基因多态性位点,产物经纯化后直接测序分析。结果两组均符合Hardy-Weinberg平衡(均P>0.05),即研究对象具有群体代表性。与健康对照组比较,HBV感染组变异型(AG+GG)、等位基因G频率均较低(均P<0.01)。高病毒载量(>10~6IU/ml)、HBe Ag阳性的变异型基因比例较高(均P<0.01),而HBV感染程度、乙肝家族史与基因多态性无关(均P>0.05)。结论 TLR10基因Rs4129009可能与慢性HBV感染相关。

踇外翻矫形失败致踇内翻1例

1病例资料患者,女性,57岁,2017年因"右足踇外翻畸形"在外院行手术治疗,术后右足疼痛症状未缓解,并逐渐出现踇内翻畸形,于2020年10月到天津市天津医院足踝外科就诊,门诊以"右足后天性踇内翻畸形"收入院。入院后专科体格检查:右足外观呈踇内翻畸形(图1A),第一跖骨内侧可见纵行切口,手术瘢痕,愈合良好,右足第1~4趾爪形趾畸形,第1趾间关节背侧略红肿,轻度压痛,第2~4趾近端趾间关节背侧可见胼胝体,无压痛。

浅析空调系统的节能

通风空调节能是一个系统而复杂的工程,既要照顾全面,又要顾及实际,所以必需在设计规划到运转的全过程中充分掌握节能的知识,才有可能达到全面真正节能的效果,如果在设计或应用中出现不合理,那么这个空调系统仍然不是一个成功的节能系统。

我心里住进了一尊佛

我爱在砚田耕作,是墨香所诱,是素纸所惑。如农夫命运总被四季节气所驱、铁匠被炉火和铁器所牵制、士兵被军号声催促去冲锋陷阵一样简单,书法于我是沁入骨髓深处的痴迷。于是,毛笔是我延伸的手指,墨汁是我另一种红茶和玉液琼浆。于是,我心里住进了一尊佛—书法之佛陀。

HBeAg对单核细胞来源树突状细胞TLR4及MAPK信号通路的影响

目的探讨HBeAg对脂多糖(LPS)刺激成熟的单核细胞来源树突状细胞(MoDC)表面Toll样受体4(TLR4)及下游丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法将健康者外周血单核细胞经重组人粒细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组白细胞介素-4(rhIL-4)诱导分化为未成熟MoDC,加或不加入HBeAg(即HBeAg刺激组与对照组),再加入LPS刺激成熟后,采用Western blot法检测MoDC表面TLR4、磷酸化p38(pp38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(pJNK)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)蛋白表达,同种异基因混合淋巴细胞反应试验检测MoDC刺激同种异基因淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测MoDC分泌下游细胞因子(IL-12、IL-6)水平。结果与对照组比较,HBeAg刺激组MoDC表面TLR4、pp38、pJNK、pERK1/2蛋白表达均明显降低(均P<0.05),MoDC刺激同种异基因淋巴细胞增殖能力均明显下降(均P<0.05),MoDC分泌IL-12、IL-6水平均明显减少(均P<0.05)。结论HBeAg能降低MoDC表面TLR4及下游MAPK信号通路传导,减少IL-12、IL-6分泌,减弱其刺激淋巴细胞增殖能力。

HBeAg对树突细胞分泌白细胞介素6和12的影响

目的研究HBeAg对脂多糖（LPs）诱导树突细胞（DCs）分泌炎症因子自细胞介素（IL）-12和IL-6的影响。方法密度梯度离心法分离浓缩白细胞获得单个核细胞，经贴壁法纯化的单核细胞由刺激因子诱导得到未成熟DCs，形态学观察及免疫表型鉴定DCs；加入不同浓度（1、2、5μg／m1）HBeAg，LPS刺激摄取抗原的DCs，酶联免疫法测定培养上清液中IL-12和IL-6水平。细胞表型比较用Mann-WhitneyU检验，不同浓度组间数据的多重比较用LSD-t检验（方差齐）或Dunnett’sT3检验（方差不齐）。结果HBeAg1、2、5μg／ml组及对照组上清液的IL-6分泌水平分别为（1177．64±167．38）pg／ml、（1092．88±60．90）pg／ml、（793．65±96．29）pg／ml和（1612．38土244．59）pg／ml，HBeAg1、2、5μg／m]组的IL-6水平均低于对照组，差异有统计学意义（f值分别为3．35、4．00和6．32，P〈0．05或P〈0．01），HBeAg1μg／ml组IL-6分泌水平明显高于5μg／ml组（f=2．96，P〈0．05）；HBeAg1、2、5μg／ml组及对照组上清液的IL-12分泌水平分别为（1037．64土58．46）pg／ml、（885．31±13．00）pg／ml、（804．34士15．25）pg／ml和（1101．46±30．76）pg／ml，HBeAg1μg／ml组与对照组的IL-12分泌水平差异无统计学意义（t=1．67，P〉0．05），2ug／ml和5μg／ml组IL-12分泌水平较对照组明显下调（t值分别为11．21和14．99，P值均〈0．01），5Hg／ml组IL-12分泌水平明显低于2μg／ml组（f=7．00，P〈0．05）。结论HBeAg能下调Des分泌炎症因子IL—12和IL-6，这可能是HBV持续感染的免疫逃逸机制之一。

代偿期乙型肝炎肝硬化患者长期抗病毒治疗后临床特点和肝脏组织学改变

目的：探讨长期抗病毒治疗对代偿期乙型肝炎肝硬化（乙肝肝硬化）患者临床指标和肝脏组织学的影响。方法选择2010年9月至2015年3月于浙江省台州医院接受抗病毒治疗的61例代偿期乙肝肝硬化患者进行前瞻性研究，其中HBeAg阳性26例，HBeAg阴性35例。接受恩替卡韦（ ETV）治疗39例，阿德福韦酯（ ADV）治疗22例。每3个月检测患者生化学、血清学和病毒学指标，根据实验室检查作肝功能CTP（Child-Turcotte-Pugh）评分。所有患者在基线及治疗144周后行肝穿刺活检，采用Metavir评分系统评估患者肝组织炎症活动度（ A）和纤维化分期（ F），治疗前后的比较用配对资料Wilcoxon秩和检验。肝功能治疗前后的比较采用配对t检验。结果61例代偿期乙肝肝硬化患者抗病毒治疗144周后，95．1％（58／61）的患者 HBV DNA载量低于检测值下限，14例（14／26，53．8％）HBeAg阳性患者获得HBeAg消失，10例（10／26，38．5％）获得HBeAg血清学转换。与抗病毒治疗前相比，患者的丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和血清总胆红素（TBil）水平降低（t＝7．489、8．259和14．000，P值均＜0．01），凝血酶原时间（PT）缩短（t＝9．777，P＜0．01），血清白蛋白（Alb）水平增加（t＝3．446，P＜0．01），CTP评分降低（t＝6．026，P＜0．01）。抗病毒治疗后，患者肝组织炎症活动度和纤维化分期均得到明显改善（Z＝5．716和6．657，P＜0．01）。26例基线肝组织炎症活动度为A1的患者中，16例降为A0；24例基线为A2的患者中，9例降为A0，15例降为A1；11例基线为A3的患者中，1例降为A0，5例降为A1，5例降为A2。61例患者基线肝组织纤维化分期均为F4，治疗后7例降为F1期，22例降为F2期，20例降为F3期。结论代偿期乙肝肝硬化患者经过长期抗病毒治疗后临床指标和肝脏组织学均能得到改善。