一种优化的猪骨骼肌来源无细胞基质支架材料制备方法及鉴定

目的 探讨一种优化的猪骨骼肌脱细胞制备方法,以期制备理想的猪骨骼肌来源无细胞基质（decellularized porcine muscle tissue,DPMT）支架材料。方法 取市售新鲜健康成年家猪腰部骨骼肌组织,采用匀浆-球磨-去垢剂多步骤脱细胞方案制备DPMT。行组织学观察脱细胞、脱脂效果,天狼猩红染色分析胶原成分,扫描电镜观察材料内部微结构;测定材料中DNA含量及总蛋白质含量。取人脂肪来源干细胞（adipose derived stem cells,ADSCs）、小鼠成纤维细胞（NIH3T3）和人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）,置于不同浓度DPMT浸提液中,培养后第1、3、5天采用细胞计数试剂盒8法测算细胞相对增殖率,评价材料细胞毒性;通过DPMT表面接种HUVECs体外共培养3 d后,行活死细胞染色评价其体外细胞相容性。采用SPF级雄性SD大鼠建立DPMT大鼠背部皮下植入模型,于植入3、7、14、28 d取材,大体观察材料降解情况,并测量其横径;行HE染色和CD31免疫组织化学染色观察其生物相容性和血管新生情况。结果 匀浆-球磨-去垢剂多步骤脱细胞方法操作简便,制备DPMT仅需1 d时间;检测显示DPMT脱细胞、脱脂完全,主要成分为Ⅰ型胶原及Ⅳ型胶原;DPMT中DNA含量为（15.902±1.392）ng/mg干重,总蛋白质含量占其干重的68.94%,显著低于新鲜猪骨骼肌组织[分别为（140.724±10.422）ng/mg干重及93.14%]（P〈0.05）;DPMT内部呈均质疏松网状结构。体外细胞相容性实验显示DPMT细胞毒性评级均为0~1级,HUVECs在DPMT表面能稳定生长。DPMT大鼠皮下植入后14 d内可保持大体结构的稳定性,至28 d时完全降解;炎性反应在3 d时最明显,7 d时明显减轻,两时间点炎性细胞数量比较差异有统计学意义（P〈0.05）;植入后7 d即可见DPMT内部新生血管环结构形成,14 d时新生血管环数量显著增加,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 匀浆-球磨-去垢剂多步骤脱细胞方案省时高效、可重复性佳,所制备的DPMT脱细胞、脱脂完全,蛋白质成分保存良好,具有良好的体内外生物相容性,且可能具有一定诱导血管新生潜能。

脂肪间充质干细胞在皮肤创伤修复中的研究进展

目的综述脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在皮肤创伤修复中的研究进展。方法广泛查阅近年来将ADSCs应用于皮肤创伤修复的相关文献,对ADSCs进行皮肤创伤修复的体外、体内及临床研究治疗效果、可能机制、最新应用技术进行综述。结果体外、体内及临床研究均证实,ADSCs主要通过直接分化为皮肤创伤修复所需的靶细胞和间接旁分泌作用促进多种皮肤创伤修复所需细胞系的增殖与迁移来实现促进修复的作用。新兴支架材料、细胞膜片技术可进一步提高ADSCs促进创面愈合的能力。结论 ADSCs促进皮肤创伤修复的研究取得了显著进展,而ADSCs的应用途径仍有待进一步研究。

母乳微生态与哺乳期急性乳腺炎相关性的研究进展

随着新一代测序技术的发展,越来越多的研究表明母乳中存在着丰富的微生物,并且形成相互关联的母乳微生态系统。多种因素可能导致母乳微生态系统失调,继而诱发哺乳期急性乳腺炎。笔者就母乳微生态的组成、起源,以及其与哺乳期急性乳腺炎发生、发展和治疗的关系进行综述。

哺乳期乳腺炎综合诊治的研究进展

哺乳期乳腺炎是一种病因尚未明确的哺乳期女性乳腺炎性疾病。近几年,哺乳期乳腺炎发病率呈上升趋势,因而对其进行规范化诊疗显得尤为迫切。临床上,因其确切病因及发病机制尚不明确,对其进行标准化诊疗的方法也未达成共识,导致哺乳期乳腺炎愈后复发率较高。笔者对相关文献及国外指南进行阅读并综述了哺乳期乳腺炎的流行病学、危险因素、病因、临床表现及分型、辅助检查及治疗、继续母乳喂养安全性相关的进展,为认识这一疾病带来新的思考和展望。