壳寡糖经MAPK信号调控紧密连接蛋白缓解LPS诱导的肠屏障损伤

该试验旨在研究壳寡糖(COS)缓解LPS诱导的猪肠上皮细胞(IPEC-J2)屏障功能损伤的作用机制。试验分为4组,分别为对照组、LPS处理组、COS处理组、COS+LPS处理组。采用(1)CCK-8法测定肠上皮细胞增殖率;(2)TEER法和FITC-dextran法测定单层融合上皮通透性;(3)Western blot测定细胞紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-4和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路关键蛋白ERK、JNK、P38及其磷酸化蛋白表达水平。结果表明:1)在LPS刺激下,IPEC-J2的增殖率显著下降,COS预处理能显著抑制LPS诱导的IPEC-J2增殖率下降(P<0.01)。2)COS能增加肠单层融合上皮的电阻率,并显著改善LPS诱导的肠单层融合上皮电阻率下降和对FITC-dextran的透过率增加(P<0.01)。3)COS能显著抑制LPS诱导的IPEC-J2中TNF-α和IL-β的上调(P<0.01)。4)LPS刺激后,细胞紧密连接蛋白显著下调,而COS预处理能显著抑制LPS诱导的紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-4下调;COS预处理能抑制LPS诱导的p-ERK表达下调。由此可见,壳寡糖具有明显的抗炎和黏膜保护功能;壳寡糖对炎性肠病的保护与紧密连接蛋白表达上调有关;壳寡糖经MAPK信号调控紧密连接蛋白表达而改善肠屏障损伤。