原生质体来源的大白菜悬浮细胞系的超低温保存

原生质体来源的大白菜 Brasstca campessris var.pekinsis 悬浮细胞系在二甲亚砜的保护下,能在液氮中(-196℃)长期冻存。加入山梨醇能增强保护作用;而加入甘露糖则降低保护作用。培养基对冻存也有明显的影响。在液氮中存放的时间长短对细胞存活率没有多大影响。冻后相对活性最高可达75.4％,恢复生长快,化冻后重新悬浮培养6天,生长量可达300-500％。遮光比不遮光对恢复更有利。冻存后恢复生长的悬浮细胞,能与未经冰冻的对照一样进行原生质体分离和培养。

脂质体介导的基因转移在植物遗传工程中的运用

本文对脂质体研究的历史和现状,脂质体的制备技术,影响脂质体包裹率的因素,脂质体进入细胞的机制及其检测方法,脂质体为载体的外源遗传物质进入细胞內的影响因素进行了综述。指出了脂质体介导的植物遗传转化的优点及在植物遗传工程的基础和应用研究中的作用。

大白菜和黄瓜原生质体电击基因转移的研究

本文以钙黄素、FITC-IgG 和溴乙锭-质粒 DNA 为荧光标记物,研究了电脉冲引起大白菜和黄瓜原生质体质膜通透性的改变及其动力学过程以及脉冲电学参数(脉冲幅值、个数、宽度)对原生质体成活率和外源物质导入率的影响。通过电击法成功地将外源 CAT(氯霉素乙酰转移酶)基因导入黄瓜原生质体并实现瞬间表达。45℃热激预处理原生质体有效地促进了CAT 基因的电击转移。

完整植物细胞的电击基因转移

本文研究了高压电脉冲对大白菜悬浮细胞通透性和成活率的影响。与原生质体比较,完整细胞可以耐受更高幅值的电脉冲。采用45℃热激,酸性介质(pH4.0)或巯基乙醇预处理黄瓜、水稻和小麦完整植物细胞,有效地提高了导入率。于黄瓜和水稻未去壁的完整细胞,成功地实现了外源 cAT(氯霉素乙酰转移酶)基因的电击导入和瞬间表达。

脱水再加水法包裹DNA——影响包裹率因素的研究

脂质体(liposome)做为一种新的基因工程载体,近年来受到了广泛的重视。本文尝试用脱水再加水法制备脂质体来包裹质粒DNA,摸索包裹的合适条件。 脱水再加水法按文献[1];