细菌回复突变试验菌株鉴定方法的比较

目的:对细菌回复突变试验(Ames试验)中的菌株鉴定方法进行比较分析,以期为试验菌株鉴定提供参考。方法:根据Ames试验相关的国家和行业标准、技术规范和指导原则要求,对试验菌株的组氨酸缺陷型鉴定、脂多糖屏障缺陷(rfa突变)鉴定、氨苄青霉素抗性(R因子)鉴定、四环素抗性(pAQ1质粒)鉴定和uvrB修复缺陷型(紫外线敏感性)鉴定方法进行了分析对比。结果:鉴定结果表明,TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535等5株菌株生长均需组氨酸,均具有rfa突变,除TA1535外均具有氨苄青霉素抗性,除TA102外均对紫外线敏感和均无四环素抗性。结论:虽然鉴定方法不同,但是判定标准和鉴定结果相同,各个实验室应规定好试验菌株鉴定的方法和频率,为Ames试验结果的真实、可靠提供根本保障。

山羊卵母细胞体外成熟过程中线粒体的动态分布

目的研究山羊卵母细胞减数分裂过程中线粒体的动态分布。方法收集山羊卵母细胞,在M199中分别培养4、8、12、16、20和24 h,用特异性线粒体标记探针进行标记,用激光扫描共聚焦显微镜观察线粒体的分布情况。结果生发泡期线粒体多分散在卵母细胞的胞质内,并且距生发泡有一定的距离;生发泡破裂期线粒体逐渐移向染色质;第一次减数分裂中期与第二次减数分裂中期线粒体成簇密布在染色体周围。排出的第一极体中也含有大量的线粒体。结论同其他哺乳动物卵母细胞体外成熟过程中线粒体分布情况相比,线粒体在山羊卵母细胞中的分布具有明显的相似性。线粒体密布在成熟卵母细胞染色体周围可能与极体的排出和受精后染色体的迁移有关。

济宁青山羊发情周期内促性腺激素和性激素分泌规律的研究

本试验对处于繁殖季节的济宁青山羊进行颈静脉采血，用放射免疫分析法测定了血浆内促性腺激素（FSH、LH）和性激素（E2、P）的含量。结果表明：整个发情周期中FSH、LH和E2均先后出现4个分泌峰，FSH的4个分泌峰分别晚于LH峰2d出现。E2的分泌峰除第3个分泌峰出现在第10天之外，其余3个峰均与LH峰同时出现。P在发情周期的第5天开始逐渐升高，间情期（第7～17天）维持在一个较高的水平（P〉O．05），发情前一天（第18天）骤然下降。在发情期和间情期，FSH和LH分泌方式均呈脉冲式，E2和P为波动式分泌。发情期FSH的脉冲频率较间情期低（P〉0．05），而LH的脉冲频率则高于间情期（P〉0．05）。

莱芜黑山羊消化道内分泌细胞的免疫组织化学研究

目的探究莱芜黑山羊消化道内5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)、胃泌素(Gas)和血管活性肠肽(VIP)4种免疫阳性细胞的形态结构和分布规律。方法采用免疫组织化学SABC法。结果消化道中4种免疫阳性细胞形态多样,大多呈椭圆形和锥体形。5-HT阳性细胞数量以结肠最多,空肠和回肠次之,幽门腺区、十二指肠和直肠较少,食管、贲门腺区、胃底腺区和盲肠中未见;SS阳性细胞在幽门腺区数量最多,贲门腺区、结肠、盲肠和直肠中未见;Gas阳性细胞大量出现于十二指肠,在食管、贲门腺区和盲肠未见;除个别器官(食管、十二指肠和回肠)未见VIP阳性细胞外,在消化道的其余各段均有分布。结论消化道内5-HT、SS、Gas和VIP 4种细胞出现最多的部位分别是结肠、幽门腺区、十二指肠和贲门腺区。

乌鸡白凤片对大鼠胚胎-胎仔发育的毒性研究

目的研究乌鸡白凤片对大鼠胚胎-胎仔发育的毒性,为临床用药提供参考。方法86只孕鼠随机分为乌鸡白凤片2.5,5,10 g/kg剂量组和溶媒对照组,于妊娠第6天至第17天连续重复灌胃给药,定期进行临床观察、体重和摄食量测定;妊娠第20天解剖,解剖后观察带胎子宫、卵巢以及着床、吸收胎、死胎、活胎、黄体等相关指标,并检查活胎外观、内脏和骨骼。结果乌鸡白凤片各剂量组孕鼠的体重、摄食量、生殖器官、生殖功能指标、外观形态、内脏和骨骼发育等相关指标均未见明显异常改变。结论妊娠SD大鼠母体无不良反应剂量及胎仔无不良反应剂量均为10 g/(kg·d)。

布舍瑞林注射液过敏性、溶血性及刺激性研究

本研究旨在通过过敏性、体外溶血性及肌肉刺激性评价布舍瑞林注射液的安全性。过敏性试验和溶血性试验中设立阴性和阳性对照,而刺激性试验中采用自身对照。试验过程中,对照系统均成立。Hartley豚鼠隔日腹腔连续3次注射给予布舍瑞林注射液(2μg/只),末次致敏后第14和21天分别静脉注射2倍致敏剂量供试品激发进行主动全身过敏试验,结果为阴性;同样的给药剂量,末次致敏后第10天,皮内注射给予对应的抗体血清,静脉注射激发后未见蓝斑,豚鼠被动皮肤过敏反应结果为阴性。采用2%红细胞悬液进行体外溶血性试验,温育15 min、30 min、45 min、1 h、2 h、3 h各观察1次,布舍瑞林注射液和阴性对照组所有试管未见溶血,终末未见红细胞凝集,而阳性对照组全部溶血。新西兰兔连续肌肉注射给予布舍瑞林注射液(0.5 mL/只),末次给药72 h后,病理组织学检查可见对新西兰兔股四头肌有刺激作用,恢复期结束未见刺激性反应,具有可逆性。研究结果表明,布舍瑞林注射液无过敏性和溶血性,对肌肉有刺激性但停药后可恢复,在应用过程中是安全的。

不同阶段幼龄SD大鼠血液指标差异的探讨

目的 本研究旨在采集不同发育阶段幼龄SD大鼠的血液指标,建立相应的背景数据,为开展儿科药物安全性评价提供参考。方法 分别收集3、6、8、12和16周龄共计约200余只幼龄SD大鼠的血样,采用全自动血球计数仪、生化分析仪、测定相应指标。结果 从各指标参数结果看,6周龄组大鼠的血液指标与16周龄大鼠相比RBC、HGB、TP、BUN等大部分指标存在一定差别,12周龄组大鼠的血液指标与16周龄大鼠相比WBC、HGB、BUN等大部分指标无差异。结论 结果表明不同周龄阶段的幼龄SD大鼠的血液指标具有一定的时间相关性,建立不同时期的背景数据对于幼龄大鼠试验血液指标的统计分析和讨论具有一定的指导意义。

CASANT抗肿瘤缓释剂Beagle犬肺部植入给药毒性研究

目的通过Beagle犬肺脏植入CASANT抗肿瘤缓释剂,评价其非临床安全性。方法采用MyLabTwice超声诊断仪引导定位犬肺脏后,植入低、中和高剂量的受试物,药后连续观察13周,药后2、4、8和13周进行体温、尿常规、标准Ⅱ导联心电图、血液学、血清生化学等指标检测,并于动物实验结束剖检后进行骨髓象检查,对主要脏器组织进行病理组织学检查。结果实验期间,各给药组动物一般状态、体温、尿常规、标准Ⅱ导联心电图、血液学、血清生化学等临床检测未见明显异常,病理组织学检查未见明显组织损伤。结论CASANT抗肿瘤缓释剂对Beagle犬的未产生毒性反应。

文蛤肉水解液的致突变性

目的评价文蛤肉水解液的致突变性,为文蛤的开发利用提供实验数据。方法采用Ames试验、小鼠嗜多染红细胞骨髓微核试验和CHL细胞体外染色体畸变试验3项致突变性试验,检测文蛤肉水解液有无致突变作用。结果 Ames试验中文蛤肉水解液各剂量组回变菌落数均在正常范围内,均未超过自发回变菌落数的2倍,在加与不加S9时5株试验菌株结果为阴性。CHL细胞体外染色体畸变试验,文蛤肉水解液各剂量组的染色体畸变率与阴性对照组比较,差异无显著性(P>0.05),结果为阴性。小鼠骨髓微核试验,各剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异无显著性(P>0.05),结果为阴性。结论在本试验条件和范围下,文蛤肉水解液未见潜在的致突变作用。

抗癫痫药卡马西平缓释片剂释药机制的研究

目的探讨抗癫痫药卡马西平缓释片剂的释药机制。方法分别在水介质、pH 1.0介质、pH 4.5介质和pH6.8介质中测定自制的3批卡马西平缓释制剂与原研制剂释放曲线并进行对比,对释药行为差异性进行研究。结果3个自制缓释处方在4种释放介质中释放曲线的f2相似因子存在较大差异,处方4可作为最佳处方。结论卡马西平缓释片在不同释放介质中的释药过程是羟丙甲纤维素K4M和甲基丙烯酸共聚物L100-55共同作用的结果,合理掌握羟丙甲纤维素K4M和甲基丙烯酸共聚物L100-55用量比例,可有效控制药物释放过程,实现缓释目的。

生殖毒性特征指标的统计分析

生殖毒性实验产生的数据量大及种类多,因此数据的处理显得尤为重要。本文归纳汇总生殖毒性实验中产生的各类指标,并详述各类数据适于选择的统计方法,以及各种方法的优缺点,尤其是对具有窝效应特点的胎仔数据的分析进行了详细阐述。生殖毒性实验产生的母体数据可选择现有的统计方法进行分析,但这些常规统计分析方法未考虑到胎仔数据中窝效应和窝大小的不均一性,本文提出的随机效应logistic回归模型、广义估计方程、多水平模型等或者百分率统计和频数统计相结合的方法均能考虑到窝效应,对胎仔数据做出正确的统计分析。本文提出的各种模型和统计方法为生殖毒性实验产生的常规数据和窝效应数据提供了简便科学的统计分析方法。

SD大鼠自发性回肠黏液性腺癌1例的病理学观察

灌胃重复给药毒性试验中空白对照组SD大鼠出现1例雄性大鼠回肠黏液性腺癌。肉眼观察形态学见回肠浆膜层有3处结节,大小分别为1.4 cm×1.3cm、0.7 cm×0.5cm和0.4cm×0.3cm。HE染色显示,肿瘤细胞主要由立方细胞或柱状、杯状细胞组成,并排列成腺样结构,阿利新蓝-过硪酸-雪夫染色显示,肿瘤细胞质及腺腔内产生黏液样蛋白6结果表明该结节符合黏液性腺癌的形态学特征。

丹参酮II_A磺酸钠注射液体外改良溶血试验研究

目的:运用改良溶血率测定方法评价丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的体外溶血作用。方法:根据临床不同给药途径,采用体外试管法37℃温浴3 h后肉眼观察浓度分别为0.32,1.25和4.00 mg·m L^(-1)的供试品是否有溶血和红细胞凝集作用,同时增加一组相同供试品浓度不加红细胞悬液对照试管,用于改良法溶血率的计算。各试管离心后用Spectra Max I3多功能酶标仪在545 nm波长处测定上清液的吸光度,按照常规方法和改良方法计算溶血率,判定是否溶血。结果:体外试管法肉眼初步判定0.32和1.25 mg·m L^(-1)不发生溶血反应,4.00 mg·m L^(-1)肉眼难以法判断是否溶血;常规溶血率计算结果:1.25 mg·m L^(-1)剂量3~5号试管及4.00 mg·m L^(-1)剂量1~5号试管溶血率均>5%;改进溶血率计算结果:仅4.00 mg·m L^(-1)剂量3~5号试管溶血率>5%。结论:随着用药浓度的升高,丹参酮Ⅱ_A磺酸钠注射液可能出现溶血反应。当供试品溶液有颜色,可能干扰结果判断时,改良的溶血试验可更真实客观地评价供试品会否引起溶血反应。

斑马鱼疾病模型的研究简述

斑马鱼作为一种整体实验动物,具有子代多、体外受精、胚胎透明等生物特性,是一种良好的脊椎动物模式生物;能够较好检测化合物的活性,实现高内涵、高通量筛选。本文概述了近年来斑马鱼作为疾病模型的进展和特点,为斑马鱼以后的疾病模型研究提供借鉴参考,使斑马鱼模型在药效和药物筛选方面的应用更加深入广泛。

毛蚶提取物的遗传毒性试验研究

目的评价毛蚶提取物的遗传毒性,为评价其安全性提供毒理学依据。方法选用体外细菌回复突变(Ames)试验、中国仓鼠肺细胞(CHL)体外染色体畸变试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,进行毛蚶提取物的遗传毒性研究。Ames试验设5 000.0、2 500.0、1 250.0、625.0、312.5μg/皿5个剂量;体外CHL细胞染色体畸变试验,设立5.00、2.50、1.25 mg/m L 3个剂量,毛蚶提取物与CHL细胞分别接触6、24 h;小鼠骨髓微核试验,设立5 000、2 500、1 250 mg/kg 3个剂量,给药1次。结果 Ames试验,毛蚶提取物在加与不加S9时各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量相关性,结果为阴性;CHL染色体畸变试验,毛蚶提取物代谢活化组和非代谢活化组的染色体畸变率均低于5%,染色体畸变试验结果为阴性。小鼠骨髓微核试验,各剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异不显著,结果为阴性。结论在本试验条件下,毛蚶提取物未见潜在的遗传毒性。