甜菜夜蛾黄素单加氧酶的原核表达及其对杀虫剂的代谢作用

[目的]采用原核表达技术对甜菜夜蛾的黄素单加氧酶(FMO)进行体外表达,获得具有活性的FMO酶,在此基础上开展对杀虫剂的代谢功能研究。[方法]通过将甜菜夜蛾FMO基因的开放阅读框构建到pET32a原核表达载体中,在大肠杆菌中表达目的蛋白,利用该载体的His标签使用镍柱对表达蛋白进行纯化,再通过咪唑梯度洗脱得到纯化的重组FMO酶蛋白。采用还原型辅酶Ⅱ(NADPH)法测定FMO酶的活性以及对杀虫剂的氧化活性,并用HPLC法分析FMO酶催化杀虫剂降解的能力,最后用液质联用技术鉴定代谢产物。[结果]通过原核表达技术成功得到可溶性的SeFMO2与SeFMO3酶,这2种酶对FMO的模式底物甲巯咪唑与苄达明均具有氧化活性,SeFMO2与SeFMO3对甲巯咪唑S-氧化的代谢动力学参数Km值分别为37.59与3.00μmol·L^-1,对苄达明N-氧化的Km值分别为165.98与17.71μmol·L^-1。对模式底物的S-氧化活性与N-氧化活性均是SeFMO3高于SeFMO2,2种酶的S-氧化活性均高于N-氧化活性。SeFMO2和SeFMO3对毒死蜱、硫双威以及溴虫腈具有一定的代谢活性,HPLC分析表明这2种FMO酶均能催化这3种杀虫剂的氧化降解,SeFMO2对毒死蜱、溴虫腈和硫双威的降解率依次是11.8%、11.5%和27.8%,SeFMO3对它们的降解率分别是28.8%、23.1%和30.2%,其中对硫双威的降解作用较强。对硫双威代谢产物的鉴定表明:FMO主要催化硫双威的硫醚氧化,形成硫双威的砜化合物。[结论]甜菜夜蛾黄素单加氧酶对外源物具有S-氧化活性与N-氧化活性,对某些杀虫剂具有氧化代谢能力,是昆虫的重要解毒酶系之一。

稻纵卷叶螟杀虫剂敏感基线的建立与抗药性监测

[目的]为了对稻纵卷叶螟的抗药性进行系统性监测,建立了稻纵卷叶螟对常用药剂的毒力敏感基线,在此基础上测定分析了江苏省2015年稻纵卷叶螟的抗药性水平。[方法]采用稻苗浸渍法测定了2010至2013年间稻纵卷叶螟初孵幼虫对氯虫苯甲酰胺、毒死蜱、茚虫威、阿维菌素以及多杀菌素的敏感性,据此建立了稻纵卷叶螟对这5种杀虫剂的毒力敏感基线,在此基础上,2015年对采自江苏武进、盐城以及江浦稻田的稻纵卷叶螟抗药性水平进行了监测。[结果]氯虫苯甲酰胺、毒死蜱、茚虫威、阿维菌素和多杀菌素敏感基线的LC50值分别为1.017、1.147、0.018、0.014和0.019 mg·L-1,监测数据表明江苏武进、盐城以及江浦稻纵卷叶螟对氯虫苯甲酰胺的抗性倍数为0.6~1.2,对毒死蜱的抗性倍数为1.2~2.2,对茚虫威的抗性倍数为1.5~2.5,对阿维菌素的抗性倍数为1.0~4.3,对多杀菌素的抗性倍数为4.8~10.2。[结论]2015年江苏省稻纵卷叶螟尚未对氯虫苯甲酰胺、毒死蜱、茚虫威和阿维菌素产生抗性,但已对多杀菌素产生低到中等水平的抗性。

“横空出世”的鸡蛋饼

前几天，电视上有一个节目教大家怎么做鸡蛋饼，看得我直流口水，恨不得马上就动手做一个饱饱口福。

2016红点设计概念大奖

新的设计概念与创新是明日杰出产品之先驱，故此，红点设计概念大奖于2005年应运而生，对这些概念和创新进行发现和表彰。该奖坚持从设计特质出发、公正评判设计概念，并以此为基础创立了无与伦比的作品征集平台，广纳从公司到设计专业学生等各界人士的参赛作品。

枕头里的“蛇”

一天，邻居陈米的爸爸提了一条蛇，我到她家去看。陈叔叔问：“谁知道这条蛇有多长？”“一米多吧。”我用手臂比了比说。陈奶奶见我用手臂比蛇长，惊叫起来：“哎呀，谁比了蛇长，晚上睡觉枕头会变成蛇的!”我听了很害怕。