骨髓内皮细胞分泌的抑制CFU-F生长的因子(英文)

为探讨骨髓微环境中内皮细胞调节造血的可能机制 ,本实验研究了骨髓内皮细胞无血清条件培养液(BMEC CM )及其不同分子量组分对骨髓成纤维祖细胞 (CFU F)生长的作用。在体外培养条件下 ,收集人和小鼠纯骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ,应用连续超滤技术从其中制备出分子量 >10kD ,3- 10kD和 <3kD三种组分 ,进行骨髓CFU F集落形成实验 ,检测这些条件培养液及其超滤组分的作用。结果显示 ,人和小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液和分子量 <3kD超滤组分都抑制CFU F的生长 ,但是分子量 >10kD和 3- 10kD组分却不产生这种效应。两种条件培养液及其 <3kD组分不仅减少CFU F集落形成数 ,同时也使集落变小 ,而且 ,<3kD组分与CFU F集落数之间有明显的负相关浓度依赖性关系。这些结果提示 ,骨髓内皮细胞至少能分泌一种分子量小于 3kD的对骨髓CFU F生长有抑制作用的细胞因子。

小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液及其超滤组分对粒巨噬系祖细胞生长的影响

本研究通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞系细胞,收集无血清条件培养液(mBMECCM),将其作多级串联超滤,获得分子量大于10、3～10、1～3、05～1kD和小于05kD超滤组分。进行粒巨噬系造血祖细胞集落形成试验,检测了它们的作用。mBMECCM和3～10kD组分对粒巨噬系祖细胞(CFUGM)生长未见明显影响,而分子量大于10kD和05～1kD组分促进CFUGM的增殖,分子量1～3kD和小于05kD组分则抑制CFUGM的增殖。这4种超滤组分对CFUGM生长的效应均有剂量依赖性。这些结果提示,在体外培养条件下,小鼠骨髓内皮细胞分泌若干种活性成分。

瘦素(Leptin)与体力活动的研究综述

L eptin是 ob基因表达的脂肪组织源激素 ,其主要作用是减少体脂、控制体重和调节机体能量平衡。它的产生和代谢受到遗传和体内外环境因素的调控和影响。运动训练可减低 ob m RNA的表达和血 leptin浓度 ,训练所致的体脂量下降是产生这种作用的重要决定因素。单次运动对 lepin表达和其血中浓度的效应 ,有减低与无影响的研究结果。运动的这些效应可能依赖于运动负荷量和热能消耗量 ,也与一些激素和代谢物有关。

核受体超家族介导基因调控的分子机制

核受体超家族由甾体激素、甲状腺激素、维甲酸、维生素D等化学信号的受体及配体未明的多种孤儿受体组成 ,该家族成员的主要功能是作为配体激活的转录因子 ,调控代谢、发育、生殖相关基因的表达。核受体与启动子和增强子上的激素应答元件及其它DNA序列特异性激活因子结合 ,而激活或阻遏靶基因的转录。核受体调控基因转录需要募集称为辅调控因子的蛋白分子 ,这些蛋白分子与核受体一起装配成多组分的复合物 ,它们可提供相关的酶促活性和脚手架功能。通过与基础转录机器的相互作用和对染色质结构的可逆性共价修饰等作用 ,辅调控因子调控核受体对靶基因转录的激活或阻遏。

骨髓内皮细胞产物对 CFU-F、CFU-GM和WEHI-3细胞生长的作用

为了研究骨髓内皮细胞的造血调控功能 ,采用串联超滤技术从小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ( m BMEC- CM)中制备出不同相对分子质量 ( Mr)范围的超滤组分 ,进行细胞集落形成实验 ,检测了 m BMEC- CM及其超滤组分对骨髓成纤维祖细胞 ( CFU- F)、粒巨噬系造血祖细胞 ( CFU- GM)和小鼠粒单系白血病细胞系 WEHI- 3细胞生长的作用 .结果显示 :m BMEC- CM抑制 CFU- F的生长 ,对 CFU- GM和 WEHI- 3细胞的生长却未见明显影响 ;Mr>1 0 4 组分对 CFU- F的生长无明显作用 ,但促进 CFU- GM的生长和抑制 WEHI- 3细胞的生长 ;Mr<3× 1 0 3组分对这 3种细胞的集落形成均有抑制作用 .

人参皂甙Rg_1对小鼠力竭游泳后恢复期骨骼肌自由基代谢的影响

目的 :研究人参皂甙Rg1对急性力竭游泳后恢复期小鼠骨骼肌自由基代谢的影响。方法 :以小鼠为实验动物 ,测定 2 4h后第二次力竭游泳时间和不同恢复时间小鼠骨骼肌MDA含量、SOD、GPX及CAT的活性。结果 :(1 )人参皂甙Rg1给药组小鼠第二次力竭游泳时间较对照组明显延长 ;(2 )急性力竭游泳后恢复期人参皂甙Rg1给药组小鼠骨骼肌MDA含量的降低及SOD活性的升高与对照组比较均有显著性差异。结论 :人参皂甙Rg1能促进力竭游泳后小鼠体能的恢复 ,其机制可能与其能增强抗氧化酶的活性 ,加速自由基的清除 。

人参皂甙Rg1对小鼠力竭游泳恢复期的抗自由基作用

已有研究显示人参皂甙Rg1具有抗自由基效应.本实验旨在研究人参皂甙Rg1对急性力竭游泳小鼠恢复期肝组织的抗自由基作用.结果如下:小鼠力竭游泳后24 h的恢复期内,肝组织MDA含量、SOD活性、GPX活性和CAT活性的变化趋势相似;在恢复期1 h、6 h,人参皂甙Rg1给药组肝组织MDA含量显著低于生理盐水对照组;在恢复期的各时间点,人参皂甙Rg1给药组肝组织SOD活性均显著高于生理盐水对照组;在恢复期1 h、3 h、6 h和12 h人参皂甙Rg1给药组肝组织GPX活性均显著高于生理盐水对照组;CAT活性虽亦高于生理盐水组,但其差异无显著性意义.本文结果提示:小鼠力竭游泳后即刻,腹腔注射人参皂甙Rg1后能减轻急性力竭运动后恢复期内自由基对肝组织的氧化损伤作用.

人参皂甙Rg_1促进小鼠力竭游泳后体能恢复的作用

目的 :研究人参皂甙Rg1对力竭运动后小鼠体能恢复的作用 ,并从糖代谢角度探讨其机理。方法 :以小鼠为实验动物 ,测定力竭游泳时间和不同恢复时间点的血糖浓度、肌糖原含量、肝糖原含量及血乳酸浓度。结果 :(1 )人参皂甙Rg1给药组小鼠第二次力竭游泳时间较对照组明显延长。 (2 )力竭游泳后恢复期 ,糖原含量的增加、血乳酸浓度降低比对照组明显加快。结果表明 ,人参皂甙Rg1能促进力竭游泳后体能的恢复 ,其机制可能与其能促进糖原合成及加速乳酸清除有关。

二甲亚砜、吐温80对小鼠骨髓来源细胞体外生长和活力影响的量效关系分析

本研究观察二甲基亚砜、吐温80对小鼠骨髓基质细胞(BMSC)、粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)和内皮细胞系细胞(BMEC)体外生长和活力的影响,并分析其量效关系。分别设置不同终体积分数二甲亚砜与吐温80的细胞培养体系及其对照,检测成纤维细胞形成单位(CFU-F)和CFU-GM的集落生成率,用MTT比色法和台盼蓝排斥试验测定BMSC和BMEC的细胞活力和活细胞百分率。结果表明:二甲亚砜为2%、吐温80为0.005%-0.01%时,CFU-F、CFU-GM集落产率与对照组相比显著降低(p<0.05或<0.01)。二甲亚砜为0.5%-1.0%、吐温80为0.002%-0.005%时,BMSC和BMEC的细胞活力和活细胞率与对照组相比显著减低(p<0.05或<0.01)。随着二甲亚砜、吐温80在上述体积分数上增加,各相应检测指标的减低率递增。结论:二甲亚砜,吐温80在细胞培养体系中达一定含量时,对小鼠骨髓BMSC、CFU-GM和BMEC细胞具有明显的生长抑制作用和(或)细胞毒性作用,含量增高则效应更显著。

AcSDKP抑制体外培养条件下人骨髓间充质干细胞的增殖

N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline,AcSDKP)是一种具有生理调控活性的四肽因子,对造血干/祖细胞增殖具有抑制作用。本研究采用集落形成实验、甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、细胞分裂指数测定等方法,考察了AcSDKP对体外培养的人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)增殖的影响。结果显示,在AcSDKP浓度为1×10-12mol／L-1×10-9mol／L的培养体系中,人骨髓MSC集落生成率和大小、活力细胞数和分裂指数均降低,最大效应浓度为1×10-11mol／L。以上实验结果表明,在体外培养条件下,一定浓度的AcSDKP对人骨髓MSC 的增殖具有抑制作用。

冲击波致伤作用实验研究进展

原发冲击伤是爆炸产生的冲击波直接作用于生物体而引起的。各种生物激波管和其它冲击波发生装置的研制大大促进了冲击波致伤作用的实验研究的开展。通过将多种动物、离体器官以及培养的细胞暴露于冲击波,获得了大量的原发冲击伤实验研究结果。作者在简述冲击波的基本物理学特征的基础上,着重概括了生物激波管研制和原发冲击伤实验研究方法及其主要进展。

贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法学探讨

本工作旨在探讨贴壁培养细胞台盼蓝拒染试验的方法,为其合理应用提出建议。用正常培养及NaN_3作致死处理的人视网膜色素上皮细胞株-19,进行原位贴壁细胞和培养体系上悬液中细胞的台盼蓝拒染实验,并比较其原位法与计数板法所测活细胞率。与计数板法相似,随染液浓度增高或染色时间延长,原位台盼蓝拒染实验的活细胞率检测值逐渐增加。培养体系上悬液中脱落细胞的存活率显著低于贴壁的细胞,NaN_3处理使脱落细胞增加。因此,对于贴壁牢固的培养细胞,原位台盼蓝染色是检测活细胞率的实用方法。根据细胞从培养表面上消化下来的难易程度和脱落到培养上悬液中的数目多少,可选用原位染色法或/和计数板法台盼蓝拒染试验,从而检测贴壁培养细胞的总存活率。

补肾通络方治疗肾病综合征的临床观察

目的评估补肾通络方治疗肾病综合征的临床疗效。方法将56例肾病综合征患者随机分为治疗组(30例)和对照组(26例)进行临床观察,治疗组服用补肾通络方,对照组服用强的松。治疗前后分别测定血清白蛋白(sAlb)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血清肌酐(Scr)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖甘醇(uNAG)、视黄醇结合蛋白(uRBP)等相关指标,以评估其疗效。结果治疗组和对照组的血清学指标除Scr变化不显著(P>0.05)以外,治疗后均有明显改善(P<0.05或P<0.01),且2组差值比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);尿液指标也显示了类似特点。结论补肾通络方治疗肾病综合征疗效优于强的松对照组,初步显示了其较好的临床应用前景。

人参皂苷水相助溶方法的研究

目的:寻找增加人参皂苷水相溶解度的方法。方法:在不同pH、温度、搅拌时间和使用潜溶剂的条件下,分别于水溶液中溶解人参茎叶皂苷和单体皂苷Rb1、Rg1、Re,分光光度法测定所试人参皂苷的溶解量。结果:在pH6.0～8.0范围内,人参茎叶总皂苷、Rb1、Rg1的溶解量随着pH的降低而增大;Re溶解量则在pH为7.0时最大。在5～35℃的范围内,人参皂苷溶解量均随着温度的增高而增加。搅拌时间在一定范围内延长,可通过加速助溶作用而提高人参皂苷的溶解量。乙醇或丙二醇对人参皂苷均有助溶作用,乙醇+丙二醇的助溶效果更好。二甲基亚砜除了能使单体皂苷Re的溶解量稍有增高外,反而使人参茎叶皂苷、Rb1、Rg1的溶解量降低。结论:在适当pH值、温度和搅拌条件下,使用乙醇和丙二醇是人参皂苷水相溶解的有效助溶方法。

人参皂甙Rgl对大鼠运动过程中血糖及相关调节激素的影响

研究人参皂甙Rgl对大鼠游泳过程中血糖和相关的血糖调节激素的血浓度变化的影响,为阐明其抗疲劳机制提供实验依据。连续两天给大鼠腹腔注射人参皂甙Rgl后,测定其力竭游泳时间、不同游泳时间后血糖、血胰岛素和血胰高血糖素浓度。人参皂甙Rgl给药组力竭游泳时间长于对照组;游泳过程中,给药组大鼠血糖浓度下降较慢,血胰岛素和血胰高血糖素浓度变化幅度较小。人参皂甙Rgl对游泳大鼠具有减缓血糖下降,预防运动性低血糖发生的作用,这种作用可能是由于相关血糖调节激素的分泌或活性变化引起。

AcSDKP对体外培养条件下人骨髓间充质干细胞增殖周期的影响

为阐明AcSDKP调控骨髓间充质干细胞(MSCs)生长的作用机制,进行人骨髓MSCs体外培养,采用BrdU掺入法、流式细胞术、MTT比色法和集落形成实验等,检测了在AcSDKP作用下的DNA合成速率、细胞周期活动和贴壁能力,观察了AcSDKP作用效应的可逆性.结果显示,在AcSDKP浓度为10-12～10-10mol/L的MSC培养体系中,BrdU标记阳性细胞数减少;S+G2/M期细胞的比率降低,G0/G1期细胞增加;24 h后的贴壁细胞数与对照组比较减少;在培养体系中撤除AcSDKP后,MSC集落生成数多于对照组.这些效应均有显著性意义.其结果提示,在体外培养条件下,AcSDKP能阻止人骨髓MSCs进入S期,减慢增殖周期运转,其作用具有可逆性,还能影响其贴壁能力.

人参皂甙Rgl对大鼠运动过程中糖代谢的影响

目的:探讨人参皂甙Rgl对大鼠游泳过程中血糖和相关血糖调节激素以及对血浓度变化的影响,为阐明其抗疲劳作用提供实验依据。方法:实验于2003-01/06在湖南师范大学动物实验室完成。进行两个实验,①42只大鼠随机平均分为6组(n=7),其中5组连续两天以5,10,15,25或30mg/(kg·d)的剂量给大鼠腹腔注射人参皂甙Rgl,给另一组腹腔注射等容积生理盐水,测定其力竭游泳时间。②84只大鼠随机分为12组(n=7),其中6组为人参皂甙Rg1给药组,另6组为生理盐水对照组。给药组大鼠连续两天以20mg/(kg·d)的剂量注射人参皂甙Rgl,对照组注射等体积生理盐水后。分别在安静状态下和游泳0.5,1,1.5,2,3h测定血乳酸、葡萄糖浓度及糖原含量。结果:126只大鼠均进入结果分析,无脱失值。①人参皂甙Rg1对大鼠力竭游泳时间的影响:人参皂甙Rgl给药组15mg/(kg·d)以上剂量,各给药组力竭游泳时间均长于对照组[(6.11±0.52),(6.29±0.65),(6.23±0.57),(4.00±0.37)h,P<0.05,P<0.01]。在5～25mg/(kg·d)剂量范围内随剂量增加,力竭游泳时间明显延长。②人参皂甙Rg1对大鼠游泳过程中肌、肝糖原含量的影响:安静状态下,给药组和对照组的肌、肝糖原含量基本相等。在游泳过程中,给药组与对照组肌、肝糖原含量均随着游泳时间延长而下降,但给药组下降较慢。给药组在游泳3h后约下降30%,对照组在相同的游泳时间后下降70%。③人参皂甙Rg1对大鼠游泳过程中血乳酸浓度的影响:人参皂甙Rg1给药组的血乳酸浓度上升不明显;而对照组的血乳酸浓度则有较大幅度上升,在运动1h后达到峰值,约为安静状态下的4倍。给药组游泳0.5,1h和1.5h的血乳酸浓度低于各相应对照组。④人参皂甙Rg1对大鼠游泳过程中血糖浓度的影响:游泳过程中,给药组血糖浓度仅略有下降,而对照组下降较为明显。对照组在运动1,2,3h后,下降幅度依次为24%,30%,35%,下降幅度明显大于安静组或相应给药组。结论:人参皂甙Rgl对游泳大鼠具有减缓血糖下降,预防运动性低血糖发生的作用,这种作用可能是由于相关血糖调节激素的分泌或活性变化引起。

小鼠骨髓内皮细胞系的长期传代培养和生物学特性鉴定

小鼠骨髓内皮细胞系建立、保存和传代培养已10年之久。本研究的目的是对该内皮细胞系的生物学特性进行新的鉴定,以便利用该内皮细胞系进行进一步研究。取经传代培养的该内皮细胞系细胞,进行显微光镜和电子显微镜观察、分子标志检测、吞噬实验、生长动力学分析以及核型鉴定等。结果表明:细胞在亚汇合贴壁层中多为椭圆形、圆形或梭形,部分可呈条索状排列,在汇合层中一般为鹅卵石状。CD31、vWF抗体染色阳性细胞占94%以上,摄取DiI-Ac-LDL的细胞达98.5%。在常规培养条件下,快速增殖期的细胞群体倍增时间约为54.6小时,分裂指数最高达到38‰。集落产率介于4.33%-7.40%。核型主要为超二倍体。结论:该细胞系保持了内皮细胞的基本特征,生长动力学和一些生物学行为与建系之初稍有差异。

丙二醛对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

为了探索氧化应激活性中间产物丙二醛对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制,体外培养的间充质干细胞经丙二醛处理后,在第4、7、14、21 d分别提取等份细胞进行碱性磷酸酶活性检测,第7 d时提取RNA通过实时定量RT-PCR测定ALP和Runx2/Cbfal mRNA表达,并在第21 d进行von Kossa染色,茜素红染色.研究发现:丙二醛通过降低碱性磷酸酶活性及ALP和Runx2/Cbfal mRNA的表达,抑制矿化骨节形成.这些结果表明:丙二醛可通过抑制ALP和Runx2/Cbfal通路,抑制小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化.

小鼠骨髓内皮细胞系的建立(英文)

对来源于正常小鼠的骨髓内皮细胞经连续传代培养18个月以上。这一培养是在加入经短期培养而获得的内皮细胞条件培养液及GM-CSF,在纤连蛋白覆盖的培养皿上种入低浓度的骨髓基质细胞完成的。在内皮细胞条件培养液和GM-CSF存在的条件下,细胞平均倍增时间为49小时。快速增殖时,细胞先为圆形,以后可变为立方形或梭形。所有培养的细胞与vWF,VCAM-1抗体染色阳性,UEA-1反应阳性,并产生细胞因子。这一骨髓内皮细胞系的建立可用于研究骨髓内皮细胞在造血过程中的作用。