针刺对胃溃疡大鼠胃黏膜损伤及MEK/ERK通路相关蛋白表达的影响

目的通过观察针刺对应激性胃溃疡(SGU)大鼠表皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)-α含量和丝裂原活化蛋白激酶的激酶(MEK)/胞外信号调节激酶(ERK)信号通路相关蛋白表达的影响,探索针刺修复SGU胃黏膜损伤的作用及可能机制。方法58只雄性SD大鼠随机分为空白组10只、模型组12只、针刺治疗组12只、药物对照组12只及针刺对照组12只。采用束缚-冷应激(WRS)法制备SGU大鼠模型,针刺治疗组针刺大鼠中脘及双侧足三里穴,药物对照组予奥美拉唑肠溶片溶液(0.2 mg/kg),针刺对照组针刺中脘及足三里旁开5 mm处,连续治疗7 d。应用Guth法计算大鼠胃黏膜损伤指数(UI),HE染色及酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠胃黏膜形态学改变及血清中EGF、TGF-α含量变化。Western blot分析大鼠胃黏膜组织中pMEK、pERK及ZO-1、Occludin的蛋白表达。结果模型组大鼠UI值较空白组显著增高(P<0.01);胃黏膜损伤明显,可见充血、水肿、伴有糜烂;大鼠血清中EGF、TGF-α水平较空白明显降低(P<0.01);胃黏膜组织中pMEK、pERK、及ZO-1、Occludin的蛋白表达较空白组显著降低(P<0.01)。与模型组比较,针刺治疗组和药物对照组UI值显著下降(P<0.01),能有效改善大鼠胃黏膜损伤,显著升高大鼠血清中EGF、TGF-α水平(P<0.05,P<0.01),同时显著上调胃黏膜组织中pMEK、pERK及ZO-1、Occludin的蛋白表达(P<0.01)。针刺对照组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论针刺能够促进SGU大鼠胃黏膜损伤的修复,其经穴效应具有特异性,作用机制可能与调节MEK/ERK信号通路相关。

LINC00261/miR-182-5p/PFN1对乙肝病毒相关性肝细胞癌HepG2.2.5细胞放疗抵抗的影响

[目的]探讨LINC00261调控miR-182-5p/PFN1轴对乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌HepG2.2.15细胞放疗抵抗的作用机制。[方法]用1 Gy的X射线处理HepG2.2.15细胞得放疗抵抗细胞HepG2.2.15/R,RT-qPCR检测LINC00261和miR-182-5p表达,Western Blot检测PFN1的表达,CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,彗星实验检测DNA损伤情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-182-5p和LINC00261或PFN1的靶向关系。[结果]LINC00261在HepG2.2.15细胞中低表达(P<0.01),且在其放疗抵抗细胞HepG2.2.15/R中表达更低(P<0.01)。过表达LINC00261抑制HepG2.2.15/R细胞增殖(P<0.01),诱导细胞凋亡(P<0.05)和DNA双链断裂(P<0.01);6 Gy X射线处理可上调过表达LINC00261对HepG2.2.15/R细胞凋亡(P<0.05)和DNA损伤的促进作用(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-182-5p与LINC00261或PFN1的靶向关系。过表达LINC00261或过表达PFN1可下调过表达miR-182-5p对HepG2.2.15/R细胞增殖的促进作用(P<0.05)以及对凋亡和DNA损伤的抑制作用(P<0.05)。[结论]过表达LINC00261靶向下调miR-182-5p,促进PFN1表达,促进HepG2.2.15细胞放疗抵抗。